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文檔簡介
1、背景和目的
胃腸道間質瘤(gastrointestinal stromal tumor,G IST)作為20世紀80年代才提出的一個新概念,隨著分子生物學技術的不斷發(fā)展與進步,有研究表明,GIST目前已經成為消化道最常見的間葉源性腫瘤,GIST作為一種非定向分化的消化道間質腫瘤,目的就是區(qū)別于發(fā)生在胃腸道的其他肌源性或神經源性肉瘤,過去由于缺乏特異性的免疫組織化學技術,電鏡下單從形態(tài)上難以區(qū)分腫瘤類別,該類腫瘤常被誤診為平
2、滑肌或神經來源的腫瘤。目前,雖然沒有判斷GIST良惡性的統(tǒng)一標準,但大多數(shù)人認為腫瘤大小及核分裂像是胃腸道間質瘤預后的重要指標,同時,腫瘤是否破潰也對預后產生重要影響。目前,關于GIST的細胞學研究和動物學研究報道較少,本文在建立裸鼠皮下移植瘤模型的前提下,比較在不同周齡個體的裸小鼠不同部位皮下移植瘤生長情況,可為以后其他疾病建立裸鼠荷瘤模型提供參考,并在活體狀態(tài)下研究胃腸道間質瘤細胞的發(fā)生、發(fā)展和各種生物學特點及篩選各種抗癌藥物提供一
3、個必不可少的工具;為進一步實驗研究搭建平臺。
材料與方法
將40只裸小鼠按周齡隨機分為兩組,每組再以接種部位不同隨機分成2組,共四組,取新鮮間質瘤手術標本,無菌條件下分成2cm×2cm×2cm大小組織塊,將分離好的間質瘤組織塊分別接種于4周齡裸鼠腋下、4周齡裸鼠臀部、8周齡裸鼠腋下、8周齡裸鼠臀部部位,將裸鼠嚴格飼養(yǎng)在無特定病原體(SPF)環(huán)境下,恒溫(22-26℃),恒濕(40-60%),每三天記錄一次腫瘤
4、生長體積,直至腫瘤長至1 cm3,并繪制生長曲線圖,處死裸小鼠并觀察瘤體形態(tài),內臟有無轉移,并行病理組織學和免疫組織化學檢測與人胃腸間質瘤標本進行比較;各組計量數(shù)據(jù)采用x±s表示,運用四格表x2檢驗,方差分析對數(shù)據(jù)處理,p<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義,SAS軟件進行統(tǒng)計學分析。
結果:
1.成瘤率:腫瘤接種于4周齡裸鼠腋下部位(100%)較接種于4周齡裸鼠臀部(80%)皮下成瘤率高;接種于4周齡裸鼠腋下部
5、位(100%)較接種于8周齡裸鼠腋下部位(70%)成瘤率高;接種于4周齡裸鼠臀部部位(80%)較接種于8周齡裸鼠臀部部位(40%)成瘤率高;以上p<0.05,差異有統(tǒng)計學意義。但腫瘤接種于8周齡裸鼠腋下部位(70%)與接種于8周齡裸鼠臀部部位(40%),p>0.05,尚不能說明兩者有統(tǒng)計學意義。
2.破潰率:腫瘤接種于4周齡裸鼠臀部部位(10%)較接種于4周齡裸鼠腋下部位(0%)破潰率高;接種于8周齡裸鼠臀部部位(20%)
6、較接種于8周齡裸鼠
腋下部位(0%)破潰率高,以上p<0.05,差異有統(tǒng)計學意義;而腫瘤接種于8周齡裸鼠臀部部位(20%)與接種于4周齡裸鼠臀部部位(10%)比較,p>0.05,尚不能說明兩者有統(tǒng)計學意義,并且接種于4周齡裸鼠腋下和8周齡裸鼠腋下部位的腫瘤均沒有破潰現(xiàn)象(0%)。
3.軟化消失率:腫瘤接種于4周齡裸鼠臀部(10%)較接種于4周齡裸鼠腋下部位(0%)軟化率高;接種于8周齡裸鼠腋下(30%)較接種
7、于4周齡裸鼠腋下部位(0%)軟化率高;接種于8周齡裸鼠臀部部位(40%)較接種于4周齡裸鼠臀部(10%)軟化率高,以上p<0.05,差異有統(tǒng)計學意義;而腫瘤接種于8周齡裸鼠臀部(40%)較接種于8周齡裸鼠腋下(30%),兩者軟化率比較,p>0.05,尚不能說明兩者有統(tǒng)計學意義。
4.腫瘤生長速度:腫瘤接種于4周齡裸鼠腋下部位體積長至1cm3的時間(21.00±2.00天)較接種于8周齡裸鼠腋下(27.86±1.46天)所需
8、時間短;接種于4周齡裸鼠臀部(25.33±1.58天)較接種于8周齡裸鼠臀部(31.50±3.00天)所需時間短,以上p<0.05,差異有統(tǒng)計學意義;而腫瘤接種于4周齡裸鼠腋下部位與接種于4周齡裸鼠臀部的腫瘤比較;接種于8周齡裸鼠腋下部位與接種于8周齡裸鼠臀部部位的腫瘤比較,生長速度差異沒有統(tǒng)計學意義(p>0.05)
結論:
本實驗將不同部位不同周齡裸小鼠移植瘤情況做一比較,得出如下結論:
1.
9、裸鼠周齡越小,標本成瘤率越高,且接種于腋下部位較臀部部位成瘤率高;周齡越大,成瘤率越低,且接種于不同部位的標本成瘤率無顯著差別。
2.不論裸鼠周齡大小,接種于臀部部位的腫瘤破潰率大于腋下部位的腫瘤破潰率。研究還發(fā)現(xiàn):周齡越大的裸鼠,不論腫瘤接種部位如何,瘤體自行軟化消失率越高,但在周齡較小的裸鼠身上,臀部移植瘤自行消失率高于腋下移植部位。
3.不論接種部位如何,周齡越小的裸鼠,移植瘤生長速度越快;但對于相同周
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