昆明(KM)突變小鼠慢性炎癥性皮膚病模型的研究.pdf

1、背景：KM突變小鼠是我所KM封閉群小鼠繁殖過程中出現(xiàn)的一例自發(fā)突變小鼠，表型異常，全身被毛稀少，表皮增厚有皺褶。為進一步育種研究，于SPF級動物房內(nèi)進行近交化培育保種，其突變表型可穩(wěn)定遺傳。該KM突變小鼠初生時與野生型KM小鼠間表型無差異，至一周左右被毛生長后即可與野生型相區(qū)分，其被毛稀疏，至離乳仍可見粉紅色皮膚，成年后皮膚明顯松弛褶皺，表面干燥，部分動物有皮屑脫落，部分動物出現(xiàn)皮膚潰破，類似于人類的慢性炎癥性皮膚病病變表現(xiàn)。因此我們對

2、KM突變小鼠進行近交系培育，以期發(fā)現(xiàn)其突變的遺傳規(guī)律并對突變基因進行定位；同時，研究中主要對該突變小鼠的生物學(xué)特性進行觀察分析，檢測其在生物學(xué)特性方面與野生小鼠間的差異；根據(jù)突變小鼠的表型，觀察其皮膚的病理改變及免疫細胞和分子改變，檢測免疫器官脾臟和淋巴結(jié)淋巴細胞的改變等，目的在于了解KM突變小鼠的系統(tǒng)表型特點、遺傳規(guī)律等，為其后的基因定位和機制研究奠定基礎(chǔ)，以期開發(fā)新的疾病動物模型。
　　 方法：選用同胞雜交、測交等方法近交培

3、育的KM突變小鼠和對照野生小鼠作為研究對象，觀察其遺傳規(guī)律；電子攝像動態(tài)觀察表型；對不同月齡，不同性別小鼠進行體重、臟器系數(shù)、代謝率、體溫、及血液學(xué)常規(guī)、生化檢測；通過常規(guī)HE病理組織學(xué)、免疫組織化學(xué)及特殊染色對3月齡、6月齡KM突變小鼠和野生KM小鼠皮膚炎癥細胞及細胞因子進行檢測比較及脂肪組織脂肪因子瘦素檢測比較；對不同年齡段的小鼠皮膚組織、脾臟及淋巴結(jié)細胞的凋亡與增殖以及脾臟、淋巴結(jié)組織T、B細胞數(shù)量進行檢測比較。
　　 結(jié)

4、果：KM突變小鼠近交培育至第10代，突變表型穩(wěn)定遺傳，通過觀察突變表型外顯率，基本符合孟德爾基因分離規(guī)律，且與性別無關(guān)，推測為單基因控制的常染色體隱性遺傳突變；突變表型為皮膚稀毛、皮屑、皮皺等；KM突變小鼠的體重與同齡野生小鼠比較明顯降低，且生長緩慢，但除胸腺及腹腔脂肪臟器系數(shù)比KM野生小鼠低之外，其它主要臟器重量系數(shù)均高于野生KM小鼠；體溫高，平均日飲水量大；外周血白細胞、淋巴細胞百分比比同齡野生小鼠多，粒細胞百分比隨年齡增長下降；單

5、核細胞百分比呈明顯增高的趨勢;血糖、總膽固醇、甘油三酯及高密度脂蛋白低、低密度脂蛋白高；皮膚組織病理表現(xiàn)為表皮細胞壞死，上皮角化過度或不全，顆粒層增厚，基底細胞層水腫，真皮淺層血管擴張，結(jié)締組織炎細胞浸潤等；皮膚真皮層T細胞、巨噬細胞、肥大細胞浸潤，炎癥因子IL-6、IL-22，TNF-α、IFN-γ表達增多；脂肪組織瘦素表達增多；表皮細胞凋亡增多，毛囊及皮脂腺細胞增殖減少；脾臟及淋巴結(jié)細胞凋亡相對增多,3月齡、6月齡KM突變小鼠增殖增