Y500R CHA人工骨及氟化物Y500R CHA復(fù)合人工骨在兔顱面成骨效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)探索.pdf

1、口腔種植的臨床應(yīng)用是20世紀(jì)牙科史上最令人囑目的一大進(jìn)展，而在臨床實(shí)踐中，大量的牙種植病員由于各種原因而都需行骨增量手術(shù)，但骨增量的成功與否很大程度上依賴(lài)于骨代用品材料的引導(dǎo)骨再生的效能。通過(guò)不斷的臨床治療，人們充分認(rèn)識(shí)到引導(dǎo)骨再生術(shù)及骨代品的重要價(jià)值，并努力通過(guò)科學(xué)研究提高骨代用品的骨引導(dǎo)及骨誘導(dǎo)能力促進(jìn)骨生成作用。從骨代用品的結(jié)構(gòu)和物理特性出發(fā)，鈣磷成份越合理，生物相容性越好，三維立體結(jié)構(gòu)越接近人類(lèi)松質(zhì)骨，骨代用品的骨引導(dǎo)作用就能最

2、大程度的發(fā)揮，而且結(jié)構(gòu)和成份也影響著骨代用品可吸收可重建的能力。常用的骨代用品只能提供引導(dǎo)新骨生長(zhǎng)的物理支架，那么要誘導(dǎo)相關(guān)細(xì)胞成份進(jìn)而促進(jìn)骨代謝仍需要加入刺激因子，通過(guò)影響成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的分化、增生、成熟和活化，作用于骨質(zhì)重建過(guò)程?；仡櫘?dāng)前所常用的骨替代品，它們雖然都具有良好的生物相容性，但是也存在很多缺陷，如自體骨容易吸收不能維持足夠的骨量，脫鈣小牛無(wú)機(jī)骨基本不能吸收，影響植骨區(qū)域骨重建等一些特性都很大程度上影響了它們引導(dǎo)骨再生

3、的效果。另外在已研究發(fā)現(xiàn)的一些骨代謝刺激因子方面也同樣存在著制備難度大、成本高以及副作用難以預(yù)料等實(shí)踐應(yīng)用難點(diǎn)，未來(lái)仍需要作進(jìn)一步研究，待改進(jìn)后方能被真正應(yīng)用于臨床。人們正通過(guò)多方面的研究試圖尋找具有更高成骨效能的代用材料，以及更具實(shí)用價(jià)值骨刺激因子，而近來(lái)，新型珊瑚骨羥基磷灰石人工骨的研制開(kāi)發(fā)，以及氟離子對(duì)種植體骨界面成骨效應(yīng)影響的發(fā)現(xiàn)，都將使制造更高性能的復(fù)合骨替代材料并將其應(yīng)用于臨床成為可能。本論文將通過(guò)動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)對(duì)新型珊瑚骨羥

4、基磷灰石人工骨在引導(dǎo)骨再生能力上的表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)估，以及觀察在此其基礎(chǔ)上加入一定濃度的氟離子對(duì)骨代用品引導(dǎo)骨再生效能所帶來(lái)的變化。 目的: 探索Y500R珊瑚骨羥基磷灰石（CHA）人工骨在兔顱面成骨效應(yīng)以及氟離子對(duì)Y500R珊瑚骨羥基磷灰石（CHA）人工骨成骨效應(yīng)的影響。 方法: 1.利用直徑11.5mm醫(yī)學(xué)純鈦棒，機(jī)械加工成一定規(guī)格的鈦金屬隔離杯，充分拋光后進(jìn)行多次超聲及化學(xué)試劑表面清洗，分裝、高溫高壓消毒

5、、干燥備用。 2.制備Y500R CHA人工骨，規(guī)格顆粒大小Ф0.25-1.0 mm，配置一定濃度的氟化鈉溶液，將CHA人工骨浸泡于氟化鈉溶液中，使氟離子吸附于骨粉表面，在烘箱（80℃）烘干至完全干燥狀態(tài)，分別包裝，消毒滅菌（鈷60）備用。 3.新西蘭大白兔48只，隨機(jī)分成A、B、C三組動(dòng)物，A組24只大白兔，通過(guò)手術(shù)方法于顱面制備環(huán)形骨陷窩及新鮮骨創(chuàng)面后，各固定一個(gè)裝有自體骨的鈦隔離帽及一個(gè)充滿(mǎn)骨髓血的鈦隔離帽，B組1

6、2只大白兔，顱面各固定兩個(gè)裝有Y500R CHA人工骨的鈦隔離帽，C組12只大白兔，顱面各固定兩個(gè)裝有含氟CHA人工骨的鈦隔離帽，松解皮膚嚴(yán)密縫合關(guān)閉創(chuàng)口，術(shù)后3天均肌注青霉素20萬(wàn)單位以預(yù)防感染，單獨(dú)喂養(yǎng)。于術(shù)后10日、11日皮下注射四環(huán)素，而處死前3日、4日皮下注射鈣黃綠素。分別于2、4、6周后A組各處殺8只動(dòng)物，而B(niǎo)、C組各處殺4只動(dòng)物，將鈦帽連同顱骨完整取下并修整后以10%福爾馬林4℃浸泡固定，進(jìn)行大體標(biāo)本的觀察，以酒精梯度脫水

7、，三氯甲烷浸泡透明，塑料包埋制作帶金屬硬組織切片，熒光顯微鏡下以及經(jīng)過(guò)甲苯胺藍(lán)-酸性品紅染色后在光學(xué)顯微鏡下作組織學(xué)觀察，通過(guò)應(yīng)用圖像測(cè)量軟件對(duì)硬組織切片進(jìn)行分析并獲取相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)資料，把不同組間的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比分析后，得出相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)論。 結(jié)果: 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后生長(zhǎng)恢復(fù)良好，傷口無(wú)炎癥無(wú)裂開(kāi)，鈦隔離帽穩(wěn)固無(wú)松脫，動(dòng)物飲食活動(dòng)無(wú)障礙。 2.大體標(biāo)本觀察切開(kāi)大白兔頭部皮膚可見(jiàn)纖維軟組織將鈦隔離帽緊密包裹，

8、未見(jiàn)空腔形成，鈦隔離帽與骨面嵌合良好，穩(wěn)固無(wú)松動(dòng)脫落，有效的屏蔽了結(jié)締組織長(zhǎng)入，且形成新骨生長(zhǎng)的理想空間。去除鈦隔離帽周?chē)L(zhǎng)的軟組織，緩慢旋轉(zhuǎn)鈦帽并向上脫除，去掉鈦杯可見(jiàn)骨替代物規(guī)整一致呈圓柱形，未見(jiàn)有纖維組織長(zhǎng)入，新生骨質(zhì)自骨面向上生長(zhǎng)，由于附著了鈣黃綠素呈橙紅色可清晰判別并作比對(duì)分析。含氟CHA組新生骨量比CHA組要多，成骨效應(yīng)更顯著。 3.熒光顯微鏡下觀察新生骨質(zhì)因附著了熒光染色劑而發(fā)出綠色及黃色熒光，各組樣品間新生

9、骨質(zhì)形成的熒光高度和面積對(duì)照清晰，可比性良好。測(cè)量鈦杯內(nèi)新生骨所發(fā)出的熒光面積顯示：2周及4周新生骨量含氟CHA組>CHA組>自體骨組>空白組，而6周標(biāo)本新生骨量含氟CHA組>CHA組≈自體骨組>空白組。 4.光學(xué)顯微鏡下觀察甲苯胺藍(lán)-酸性品紅染色后，可見(jiàn)新生骨從骨面向鈦隔離帽中長(zhǎng)入，成熟的骨質(zhì)被染成深紅色，而類(lèi)骨質(zhì)被染成藍(lán)色。2周時(shí)新生骨量較少，空白組幾乎無(wú)新骨生成，而其他三組都可見(jiàn)骨質(zhì)從骨創(chuàng)面向上生長(zhǎng)，含氟CHA組新生骨量最

10、多，其次是CHA組，自體骨組較填入骨代用品組新生骨量明顯要少些；4周后各組都可見(jiàn)較多的呈小梁狀骨質(zhì)生成，含氟CHA組成骨效應(yīng)仍然比其他組要明顯，而空白組也可見(jiàn)一定量新生骨長(zhǎng)入；6周后新生骨質(zhì)已成熟，呈致密板塊狀，類(lèi)骨質(zhì)已充分占據(jù)鈦隔離帽的所有空間，含氟CHA組成骨效應(yīng)最顯著。 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果：2周后，自體骨組、空白組、含氟CHA組、CHA組的新生骨熒光面積分別是：（2.86±0.43）m㎡、（1.09±0.2）m㎡、（7.3

11、8±0.57）m㎡、（4.46±0.38）m㎡，方差分析結(jié)果：含氟CHA組>CHA組>自體骨組>空白組（P<0.01）；4周后，自體骨組、空白組、含氟CHA組、CHA組的新生骨熒光面積分別是：（6.67±0.74）m㎡、（3.68±0.72）m㎡、（11.78±0.78）m㎡、（9.22±0.52）m㎡，方差分析結(jié)果：含氟CHA組>CHA組>自體骨組>空白組（P<0.01）；6周后，自體骨組、空白組、含氟CHA組、CHA組的新生骨熒光面

12、積分別是：（10.24±0.54）m㎡、（5.5±0.43）m㎡、（13.91±0.60）m㎡、（10.47±0.40）m㎡，方差分析結(jié)果：含氟CHA組>CHA組≈自體骨組（組間P>0.05）>空白組（P<0.01）。 結(jié)論: 1.利用鈦隔離帽所制作的引導(dǎo)骨再生動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ筒僮鞣椒ê?jiǎn)便，創(chuàng)傷很小，所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性好，且數(shù)據(jù)更具有客觀性，可比性強(qiáng)。 2.空白組中充填骨髓血具有成骨細(xì)胞等大量細(xì)胞成份.但在缺少新骨