珍珠層人工骨復合成骨細胞的體內成骨作用研究.pdf

1、目的:1、通過珍珠層復合人工骨對成骨細胞(OBs)在體內外分化、增殖影響的研究,探討其在體內、外的生物相容性;2、探討珍珠層人工骨與同種異體OBs復合移植體內異位成骨的作用機制,以及珍珠層的骨誘導作用;3、研究珍珠層人工骨復合同種異體OBs修復兔橈骨臨界性骨缺損的成骨作用.方法:1、將馬氏珍珠貝的珍珠層粉和消旋聚乳酸通過有機溶劑注模、控溫模壓塑形、鹽析致孔等技術,加工制成珍珠層(N/P)復合人工骨.將新西蘭白兔OBs種植到N/P人工骨材

2、料上,用四唑鹽(MTT)比色法、組織學和掃描電鏡方法,研究OBs在體外增殖情況;2、將同種異體OBs與N/P人工骨復合物移植體內,觀察人工骨在體內的炎性反應和免疫排斥反應;在體外用5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)標記OBs,并將標記的同種異體OBs接種于N/P人工骨表面,復合培養(yǎng)1周后植入體內,采用免疫組織化學方法,檢測OBs在體內外的存活、增殖情況.3、將體外培養(yǎng)的同種異體新西蘭白兔OBs,種植到N/P人工骨材料上,復合培養(yǎng)1周后移植

3、至兔背部皮下.以未復合OBs的N/P人工骨材料作對照,分別于植入后1、4和8周取材,經大體觀察、組織學和免疫組織化學方法檢測異位成骨情況.4、手術造成15mm橈骨骨缺損模型,將體外培養(yǎng)的同種異體新西蘭白兔OBs,種植到N/P人工骨、PDLLA人工骨材料上.以復合OBs的N/P人工骨為實驗組,以復合OBs的PDLLA人工骨和未復合OBs的N/P人工骨作對照組,移植修復兔橈骨臨界性骨缺損.分別于術后4、8、12周取材,經大體觀察、X線、生物