珍珠層人工骨復(fù)合成骨細(xì)胞的體內(nèi)成骨作用研究.pdf

1、目的:1、通過(guò)珍珠層復(fù)合人工骨對(duì)成骨細(xì)胞(OBs)在體內(nèi)外分化、增殖影響的研究,探討其在體內(nèi)、外的生物相容性;2、探討珍珠層人工骨與同種異體OBs復(fù)合移植體內(nèi)異位成骨的作用機(jī)制,以及珍珠層的骨誘導(dǎo)作用;3、研究珍珠層人工骨復(fù)合同種異體OBs修復(fù)兔橈骨臨界性骨缺損的成骨作用.方法:1、將馬氏珍珠貝的珍珠層粉和消旋聚乳酸通過(guò)有機(jī)溶劑注模、控溫模壓塑形、鹽析致孔等技術(shù),加工制成珍珠層(N/P)復(fù)合人工骨.將新西蘭白兔OBs種植到N/P人工骨材

2、料上,用四唑鹽(MTT)比色法、組織學(xué)和掃描電鏡方法,研究OBs在體外增殖情況;2、將同種異體OBs與N/P人工骨復(fù)合物移植體內(nèi),觀察人工骨在體內(nèi)的炎性反應(yīng)和免疫排斥反應(yīng);在體外用5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)標(biāo)記OBs,并將標(biāo)記的同種異體OBs接種于N/P人工骨表面,復(fù)合培養(yǎng)1周后植入體內(nèi),采用免疫組織化學(xué)方法,檢測(cè)OBs在體內(nèi)外的存活、增殖情況.3、將體外培養(yǎng)的同種異體新西蘭白兔OBs,種植到N/P人工骨材料上,復(fù)合培養(yǎng)1周后移植

3、至兔背部皮下.以未復(fù)合OBs的N/P人工骨材料作對(duì)照,分別于植入后1、4和8周取材,經(jīng)大體觀察、組織學(xué)和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)異位成骨情況.4、手術(shù)造成15mm橈骨骨缺損模型,將體外培養(yǎng)的同種異體新西蘭白兔OBs,種植到N/P人工骨、PDLLA人工骨材料上.以復(fù)合OBs的N/P人工骨為實(shí)驗(yàn)組,以復(fù)合OBs的PDLLA人工骨和未復(fù)合OBs的N/P人工骨作對(duì)照組,移植修復(fù)兔橈骨臨界性骨缺損.分別于術(shù)后4、8、12周取材,經(jīng)大體觀察、X線、生物