不同照射時間下核黃素a-波紫外線免鞏膜膠原交聯(lián)的研究.pdf

1、目的:通過對不同照射時間下核黃素A-波紫外線兔鞏膜膠原交聯(lián)實驗的研究，探討鞏膜生物力學(xué)強度與紫外線燈照射時間的關(guān)系，及其在實驗過程中紫外線燈照射對視網(wǎng)膜是否造成損傷。
　　 方法:將新西蘭白兔24只隨機分為A、B、C三組，選左眼為實驗眼，右眼為對照眼，麻醉后充分分離左眼內(nèi)外直肌間的球結(jié)膜及筋膜并于上直肌止端剪斷上直肌，充分暴露鼻上方鞏膜。在暴露鞏膜處滴加0.1％5-磷酸核黃素5分鐘后，用波長為370nm，功率為3.0mW/cm2

2、的紫外線燈分別對A、B、C三組實驗眼鞏膜照射20min、30min、50min。術(shù)后2周進行全視野視網(wǎng)膜電流圖(full-field electroretinogram f-ERG)檢測。術(shù)后2個月，處死兔子，取實驗眼實驗部位鞏膜及對照眼相應(yīng)部位鞏膜，制作成5mm×10mm的鞏膜條帶，測量其厚度及彈性模量、蠕變率、極限應(yīng)力、極限應(yīng)變。用光學(xué)顯微鏡，透射電子顯微鏡觀察視網(wǎng)膜、鞏膜組織結(jié)構(gòu)。采用SPSS17.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析，用配對t檢

3、驗進行檢驗，P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、不同紫外線照射時間下兔鞏膜透明度的變化
　　 實驗過程中A、B、C三組實驗眼鞏膜經(jīng)紫外線照射后，鞏膜由原來的瓷白色逐漸透見葡萄膜色素，且透見葡萄膜色素隨照射時間的延長越來越來清晰，面積越來越大。鞏膜透明度隨紫外線照射時間的延長而增加。
　　 2、不同紫外線照射時間對兔f-ERG的影響
　　 A、B、C三組兔f-ERG:暗適應(yīng)3.0、

4、明適應(yīng)3.0的b-波振幅、a-波振幅、b-波潛伏期、a-波潛伏期的結(jié)果，實驗眼與對照眼差異無統(tǒng)計學(xué)意義。(P＞0.05）
　　 3、不同紫外線照射時間對鞏膜厚度的影響
　　 A、B、C三個實驗眼鞏膜條帶厚度較對照組分別增加了15.62％、12.07％、16.46％，實驗組與對照組進行統(tǒng)計學(xué)檢測，C組有統(tǒng)計學(xué)意義。（P＜0.05）
　　 4、不同紫外線照射時間對鞏膜條帶生物力學(xué)的影響
　　 A、B、C三組鞏

5、膜條帶彈性模量分別增加了26.31％、11.24％、33.43％;蠕變率分別降低了40.47％、29.96％、53.17％;極限應(yīng)力分別增加了12.21％、22.41％、42.05％，A組、C組極限應(yīng)變分別降低了24.94％、38.57％。采用配對t檢驗對實驗組與自身對照組進行檢測:C組彈性模量P=0.025;C組蠕變率P=0.041;C組極限應(yīng)變P=0.012。P值均小于0.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 5、不同紫外線照射時間

6、對視網(wǎng)膜、鞏膜組織結(jié)構(gòu)的影響
　　 光鏡下A、B、C三組視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)均存在，視網(wǎng)膜色素上皮層、視細胞層未見明顯損傷或變薄。15000倍透射電鏡下可見A、B、C三組鞏膜膠原纖維直徑較對照組均增大，并隨紫外線照射的時間延長膠原纖維直徑逐漸增大;膠原纖維之間的距離較對照組均增加，且隨紫外線照射的時間延長膠原纖維之間的距離逐漸增加。對照組鞏膜成纖維細胞線粒體嵴和膜有損傷，實驗眼較對照組損傷明顯，線粒體有空泡，髓樣變，細胞水腫，細胞器減

7、少，各實驗眼之間鞏膜成纖維細胞損傷程度差別不大。
　　 結(jié)論:
　　 1、核黃素A-波紫外線兔鞏膜膠原交聯(lián)實驗中，當(dāng)鞏膜厚度為400μm，照射時間在50分鐘內(nèi)，隨紫外線照射時間的延長鞏膜的透明度逐漸增加，鞏膜膠原纖維直徑逐漸增加，鞏膜厚度逐漸增加，生物力學(xué)強度逐漸加強。
　　 2、當(dāng)兔鞏膜厚度為400μm時，用波長為370nm，功率為3.0mW/cm2的紫外線燈照射鞏膜時間在50分鐘內(nèi)，核黃素A-波紫外線兔鞏膜膠