洋金花殺滅魚類指環(huán)蟲的活性成分研究.pdf

1、魚類體外寄生指環(huán)蟲病是危害水產養(yǎng)殖最為嚴重的寄生蟲病害之一。當前，國內外防治主要以化學藥物為主，長期使用導致指環(huán)蟲的抗藥性與日俱增，用藥量增大，治療效果下降，成本提高，甚至還產生致畸、致突變等副作用。因此，開發(fā)能替代現(xiàn)有藥品的無公害、環(huán)保型天然植物源殺蟲藥，以及從天然植物中分離殺蟲活性成分，進而進行仿生合成是今后研究的方向和熱點。本研究正是以此為出發(fā)點開展了活性植物篩選、成分預試、殺蟲活性成分的跟蹤分離、光譜分析等工作，并取得了以下結果

2、： 1．具有殺蟲活性植物的篩選：通過藥效試驗，檢測了15種天然植物乙醇提取物對寄生于金魚的中型指環(huán)蟲的殺滅活性。試驗結果表明：48h內，洋金花、蛇床、鴉膽子、檳榔、云南重樓、木通、牛心樸子、吳茱萸和夾竹桃的最高殺蟲率均達70％以上，其中洋金花、蛇床和鴉膽子的最高殺滅率達到100％，并且這幾種植物對試驗魚安全性較高；另外，牽牛子、青蒿對指環(huán)蟲有一定殺滅作用，不僅殺蟲濃度高，殺蟲率也較低，分別為55％、30％。綜合15種植物的殺蟲試

3、驗效果、藥物毒性以及實驗操作的實際情況，再結合陜西當?shù)刭Y源情況，選擇洋金花作為研究對象。 2．洋金花化學成分預試與殺蟲活性部位篩選：采用試管法對洋金花化學成分進行預試。結果顯示：洋金花以生物堿成分為主，提取物呈弱堿性；用石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、蒸餾水六種溶劑對洋金花進行部位提取，采用藥效試驗觀察各部位提取物的殺蟲活性，結果表明：洋金花的殺蟲活性部位為氯仿提取物濃度為200 mg．L<'-1>(按生藥計)。乙醇提取物和

4、乙酸乙酯提取物也有一定的殺蟲作用，殺蟲最佳濃度分別為400mg．L<'-1>、250 mg．L<'-1>(按生藥計)時，最高殺滅率達85％以上，且金魚的中毒率較低；石油醚提取物、丙酮提取物和蒸餾水提取物在試驗濃度范圍內幾乎不具備殺蟲作用。所以洋金花的氯仿提取物殺蟲活性是洋金花主要殺蟲活性部位。 3．洋金花殺蟲活性成分的追蹤分離與結構鑒定：采用三級硅膠柱層析法，一級柱以氯仿：甲醇為溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，對洋金花的氯仿提取物進行分離，得

5、到A—F等6段混合物，藥效試驗發(fā)現(xiàn)，C段混合物具有較強的殺蟲活性，48h內平均殺滅率為95％。二級柱合并C段化合物以石油醚：乙酸乙酯為溶劑系統(tǒng)進行柱層析分離純化，得到C1一C7段混合物，藥效試驗發(fā)現(xiàn)，C6段混合物具有突出的殺蟲活性，48h內的平均殺滅率大于95％。三級柱合并C5、C6和C7段化合物，以石油醚：乙酸乙酯的比例為1.5：1恒定極性洗脫系統(tǒng)對C6段進行分離，得到三種化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ，藥效試驗發(fā)現(xiàn)，化合物Ⅱ 48h內的平均殺滅率