HSPCO11和HSPCO16基因在毛乳頭細(xì)胞的表達(dá)及其生物學(xué)功能的研究.pdf

1、在該研究中,我們首先從人頭皮毛囊分離培養(yǎng)成人和胎兒毛乳頭細(xì)胞,這些細(xì)胞具有周期性凝集性生長(zhǎng)特性,而且這種特性隨著傳代次數(shù)的增多而逐步喪失.凝集性生長(zhǎng)作為毛乳頭細(xì)胞的固有特性與其生物學(xué)功能密切相關(guān).然后我們應(yīng)用原位雜交技術(shù)證實(shí)了HSPCO11和HSPCO16基因在凝集性生長(zhǎng)的成人毛乳頭細(xì)胞和胎兒毛乳頭細(xì)胞均表達(dá),而二者在傳代后失去凝集性生長(zhǎng)特性的人毛乳頭細(xì)胞和人真皮成纖維細(xì)胞均不表達(dá),這些結(jié)果表明HSPCO11和HSPCO16為凝集性生長(zhǎng)

2、毛乳頭細(xì)胞的特異性表達(dá)基因,其表達(dá)可能與毛乳頭細(xì)胞的凝集性生長(zhǎng)等生物學(xué)特征有關(guān).應(yīng)用RT-PCR技術(shù),我們從凝集性生長(zhǎng)的人毛乳頭細(xì)胞RNA中擴(kuò)增到分子量約為430bp的HSPCO11基因開放閱讀框cDNA序列,并構(gòu)建了其真核表達(dá)重組質(zhì)粒pCI-neo/HSPCO11,通過(guò)酶切分析和測(cè)序鑒定,RT-PCR所克隆的cDNA與GenBank中相應(yīng)HSPCO11基因序列完全吻合.這些研究結(jié)果進(jìn)一步證明了HSPCO11基因在凝集性生長(zhǎng)的人毛乳頭細(xì)

3、胞特異性表達(dá),其表達(dá)可能與毛乳頭細(xì)胞的凝集性生長(zhǎng)、毛囊生長(zhǎng)周期的調(diào)控等生物學(xué)功能有關(guān).而RT-PCR不能對(duì)HSPCO11基因進(jìn)行克隆,HSPCO16基因開放閱讀框cDNA序列(約200bp)的克隆使用了基因合成技術(shù),所合成的cDNA在真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+)進(jìn)行定向克隆,酶切分析和測(cè)序鑒定表明所克隆的cDNA與GenBank中相應(yīng)HSPCO16基因序列完全吻合.通過(guò)以上研究,我們確定了HSPCO11和HSPCO16基因在凝集性