艱難梭菌毒素A功能區(qū)基因的克隆、表達(dá)及其生物學(xué)特性.pdf

1、目的:艱難梭菌(Clostridium difficile,CD)是醫(yī)院內(nèi)腸道感染的主要致病菌.約25﹪的抗生素相關(guān)性腹瀉(Antibiotic-associated diarrhea,AAD)、75﹪的抗生素相關(guān)性腸炎(Antibiotic-associated colitis,AAC)和近100﹪的偽膜性腸炎(Pseudomembranous colitis,PMC)由此菌引起,統(tǒng)稱(chēng)為艱難梭菌相關(guān)性疾病(Clostridium di

2、fficile-associated diseases,CDAD).CD的臨床檢測(cè)方法主要有糞便標(biāo)本的細(xì)菌B毒素細(xì)胞學(xué)鑒定(金標(biāo)準(zhǔn)),細(xì)菌培養(yǎng),ELISA法檢測(cè)艱難梭菌毒素A(cdtA);前兩者所需的條件較高,時(shí)間較長(zhǎng);后者敏感性不高且有假陰性,不能及時(shí)有效地指導(dǎo)臨床治療.幾乎所有抗生素包括萬(wàn)古霉素,甚至一些腫瘤化療藥均可引起CDAD,因而,抗生素治療CDAD也存在加重疾病的問(wèn)題.CDAD首選治療是口服甲硝唑或萬(wàn)古霉素,重癥患者萬(wàn)古霉素

3、是目前唯一有效的藥物,但停藥2-8周后易復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)率為20﹪,近年來(lái)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)艱難梭菌帶有多種抗生素耐藥基因,特別是臨床已經(jīng)分離出同時(shí)耐甲硝唑和萬(wàn)古霉素的菌株,預(yù)示在不遠(yuǎn)的將來(lái)這引起抗生素將對(duì)艱難梭菌無(wú)效.該實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟趯で蠓乐蜟DAD的疫苗,同時(shí)探尋一種能快速檢測(cè)CD的方法.結(jié)論:1、通過(guò)基因重組,克隆并表達(dá)了cdtA膜受體結(jié)合蛋白,此重組蛋白具有良好的抗原性且無(wú)毒性.可作為基因工程重組疫苗,此外,重組蛋白還可作為檢測(cè)抗原,用于臨床檢測(cè)