羊水來(lái)源干細(xì)胞生物學(xué)特性及治療大鼠骨質(zhì)疏松的初步研究.pdf

1、研究目的：
　　1.復(fù)蘇，傳代培養(yǎng)羊水干細(xì)胞
　　2.對(duì)其生物學(xué)特性及向成骨細(xì)胞定向分化經(jīng)行研究
　　3.沿尾靜脈注射AFS，對(duì)其治療大鼠骨質(zhì)疏松（OP）效果進(jìn)行評(píng)價(jià)
　　材料和方法：
　　1.選取不同代數(shù)的AFS，復(fù)蘇，傳代培養(yǎng)。
　　2.觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特性，描述體外培養(yǎng)的AFS的生物學(xué)特性
　　3.應(yīng)用誘導(dǎo)因子誘導(dǎo)AFS定向分化為成骨細(xì)胞，并通過(guò)一系列方法（細(xì)胞形態(tài)，細(xì)胞堿性磷酸酶染色，Ⅰ

2、型膠原蛋白測(cè)定等）對(duì)分化后的細(xì)胞進(jìn)行鑒定
　　4.AFS對(duì)大鼠OP治療效果的評(píng)價(jià)：采用同齡SD大鼠，隨機(jī)分為4組，A組正常組，B組模型組，C組制造模型并且一次性注入AFS，D組制造模型并且不同時(shí)間兩次注入AFS。除A組灌胃用等量生理鹽水，其余各組連續(xù)14天灌胃RA，同時(shí)，C組于灌胃第14天尾靜脈注射AFS，D組于灌胃第7天及第14天尾靜脈注射AFS。實(shí)驗(yàn)過(guò)程觀察生活習(xí)性及體重變化，骨密度測(cè)定，血清骨代謝指標(biāo)檢測(cè)定，測(cè)量股骨橫斷面外

3、徑（B）及濕重，骨微觀結(jié)構(gòu)的觀察。
　　結(jié)果：
　　1.成功復(fù)蘇AFS，誘導(dǎo)分化細(xì)胞具有成骨細(xì)胞特性
　　2.AFS對(duì)大鼠骨質(zhì)疏松治療效果的評(píng)價(jià)
　　2.1股骨骨密度（BMD）測(cè)定結(jié)果顯示：D組實(shí)驗(yàn)前后差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），說(shuō)明AFS對(duì)骨質(zhì)疏松具有潛在緩解效果
　　2.2血清生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示：D組血鈣，血磷，TRACP實(shí)驗(yàn)前后均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），ALP實(shí)驗(yàn)后較前明顯增加，說(shuō)明AF

4、S對(duì)骨質(zhì)疏松鈣鹽沉積具有潛在治療效果
　　2.3D組大鼠股骨濕重實(shí)驗(yàn)前后無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明 AFS對(duì)骨質(zhì)疏松的修復(fù)作用表現(xiàn)在股骨重量上
　　2.4骨薄片Goldner三色法染色顯示：D組可見部分膠原恢復(fù)到與A組骨膠原相似的結(jié)構(gòu)
　　結(jié)論：
　　1.成功復(fù)蘇并傳代不同代數(shù)的AFS，證明其具有定向誘導(dǎo)分化的能力
　　2.RA具有致骨質(zhì)疏松作用，成功制造出OP模型
　　3.AFS可以抑制血鈣濃度升高，增加鈣