青果總黃酮的提取分離及藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：以新鮮青果為研究對(duì)象,在前人的研究基礎(chǔ)上,首先對(duì)青果總黃酮有效成分的提取和純化方法及條件進(jìn)行篩選,及其含量測(cè)定;同時(shí)根據(jù)青果的藥理作用,對(duì)純化后的青果總黃酮,以小鼠為研究對(duì)象進(jìn)行急性毒性、抗炎及鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)研究;及其體外抗氧化實(shí)驗(yàn)研究,旨在青果總黃酮的進(jìn)一步分離及制備單體的研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
　　方法：在前期的研究基礎(chǔ)上,首先采用最佳的提取方法從青果中提取總黃酮類物質(zhì);并對(duì)其黃酮類物質(zhì)粗提物進(jìn)行純化研究,篩選最佳分離條

2、件;根據(jù)理化鑒別和紫外光譜檢測(cè)其純化物中具有黃酮類物質(zhì)的理化特征和光譜特征,可確定青果純化物可能是黃酮類。其次采用紫外-可見(jiàn)分光光度法對(duì)粗提取物和純化后的青果總黃酮進(jìn)行含量測(cè)定。最后,把得到的青果總黃酮進(jìn)行毒理學(xué)研究,青果總黃酮以最大濃度及最大給藥體積的藥液對(duì)實(shí)驗(yàn)組小鼠灌胃給藥,對(duì)照組給予等體積的溶媒,連續(xù)觀察7d;通過(guò)小鼠醋酸扭體法和小鼠熱板法,觀察青果總黃酮對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛作用;并采用蛋清致小鼠足跖腫脹、二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠

3、毛細(xì)血管通透性增加三種模型研究青果總黃酮的抗炎作用;及采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法、鄰苯三酚自氧化法、普魯士蘭法三種方法分別測(cè)定青果中總黃酮對(duì)羥自由基、超氧陰離子的清除能力及總還原能力。
　　結(jié)果：青果總黃酮的最佳提取工藝是取青果粗粉,按照固液比1:10加入70％乙醇在70℃水浴中回流加熱3小時(shí),濾渣重復(fù)提取3次,合并濾液,過(guò)濾回收溶劑。最佳純化藝是將提取物上聚酰胺柱,用水洗至無(wú)色,再用10％,30％,70％,以3 BV/h速度洗

4、脫,收集溶液,回收溶劑,加壓干燥即可。青果總黃酮未見(jiàn)任何急性毒性反應(yīng),小鼠灌胃青果總黃酮的最大耐受量為11.46g·kg-1,約相當(dāng)于成人臨床日用量的115倍;青果總黃酮能減少醋酸致小鼠的扭體次數(shù),提高小鼠熱板致痛閾值。青果總黃酮對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹、蛋清致小鼠足跖腫脹、醋酸致毛細(xì)血管通透性增加等急性炎癥模型均有抑制作用。還具有清除羥自由基和超氧陰離子的能力及一定的總的還原能力。
　　結(jié)論：通過(guò)對(duì)青果總黃酮提取和純化條件的篩選,