苦豆子總堿提取與注射液制備及藥效學(xué)研究.pdf

1、苦豆子是我國(guó)常用的傳統(tǒng)中藥，屬豆科槐屬植物，味苦性寒，早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就有記載，有清熱燥濕、祛風(fēng)殺蟲、利尿抑菌、抗心律失常的功效，主要分布于我國(guó)西北省區(qū)?？喽棺又懈缓喾N化學(xué)成分，目前，作為藥品開發(fā)，國(guó)內(nèi)外研究的重點(diǎn)均在生物堿上?，F(xiàn)代藥理學(xué)證實(shí)，苦豆子生物堿具有抗病毒、抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗?jié)?、升高白?xì)胞、抗癌、平喘、止痛等作用。臨床研究表明，苦豆子生物堿對(duì)各種細(xì)菌、真菌及病毒都有較強(qiáng)的殺滅作用?？喽棺由飰A的藥用價(jià)值已被醫(yī)藥界所公

2、認(rèn)和重視。目前，鑒于苦豆子生物堿制劑已廣泛應(yīng)用于人醫(yī)臨床，但在治療動(dòng)物疾病的研究方面尚處于起步階段，該論文通過對(duì)苦豆子生物堿的提取、苦豆子總堿注射液的制備及藥效學(xué)三方面研究，達(dá)到在獸醫(yī)臨床開發(fā)和應(yīng)用苦豆子的目的。
　　 首先采用酸水浸提法和醇酸浸提法兩種提取工藝分別對(duì)苦豆子中的生物堿進(jìn)行提取，考察了提取過程中的主要因素對(duì)提取率的影響。從性狀、鑒別、檢查、含量等指標(biāo)開展苦豆子總堿質(zhì)量控制方法的建立。用薄層色譜法對(duì)苦參堿、氧化苦參堿

3、及槐定堿進(jìn)行鑒別，并對(duì)不同的色譜條件進(jìn)行了考察。建立了包括干燥失重和重金屬及砷鹽兩項(xiàng)測(cè)定的檢查項(xiàng)。用酸性染料分光光度法進(jìn)行苦豆子總堿的含量測(cè)定，用高效液相色譜法測(cè)定了指標(biāo)成分苦參堿及氧化苦參堿的含量。制備了4%的苦豆子總堿注射液，通過對(duì)注射液的性狀、可見異物、pH、含量測(cè)定、熱原、無(wú)菌等方面的考察，制訂了質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)?？疾炝丝喽棺涌倝A注射液的穩(wěn)定性，進(jìn)行了影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)及長(zhǎng)期試驗(yàn)(12個(gè)月)?？疾炜喽棺涌倝A注射液對(duì)大腸桿菌、金黃

4、色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及鏈球菌的體外抑菌效果。用大腸桿菌建立了大鼠臨床型乳腺炎疾病模型，給予不同劑量的苦豆子總堿注射液治療后，以乳汁體細(xì)胞數(shù)及臨床指標(biāo)評(píng)價(jià)治療效果。以腹腔注射方式給予小鼠不同劑量的苦豆子總堿后，確定苦豆子總堿對(duì)小鼠腹腔注射的LD50。
　　 結(jié)果表明，苦豆子經(jīng)酸水提取法提取，提取物得率5.07%，提取物中的苦豆子總堿含量61.21%，苦參堿和氧化苦參堿總量為17.08%；經(jīng)醇酸浸提法提取，提取物得率5.19%左

5、右，提取物中苦豆子總堿含量約64.76%，苦參堿和氧化苦參堿總量約為19.89%。兩種提取方法得率相當(dāng)，醇酸浸提法對(duì)大生產(chǎn)要求及成本較酸水提取法高，認(rèn)為酸水浸提法較醇酸浸提法較為合理和實(shí)用。制訂了苦豆子總堿的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，用薄層色譜法、紫外分光光度法及高效液相色譜法測(cè)定苦豆子總堿的含量，提取物干燥失重、重金屬及砷鹽檢查符合規(guī)定，形成了苦豆子總堿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。制備了4%的苦豆子總堿注射液，通過檢查、鑒別、含量測(cè)定相關(guān)項(xiàng)的結(jié)果制訂了4%的

6、苦豆子總堿注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。穩(wěn)定性試驗(yàn)表明苦豆子總堿注射液的穩(wěn)定性較好，暫定藥品有效期為1年。體外抑菌試驗(yàn)顯示，苦豆子總堿注射液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及鏈球菌最低抑菌濃度為3.13～12.5mg/mL，耐藥株與敏感株MIC值無(wú)差別。用60mg/kg劑量給予模型鼠肌肉注射4%的苦豆子總堿注射液治療，有效率為70%，治愈率為50%，且急性毒性試驗(yàn)確定苦豆子總堿對(duì)小鼠通過腹腔注射的LD50為490.35mg/kg，說明4