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1、目的: 通過對大鼠行單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù),觀察加減草果知母湯對UUO大鼠梗阻腎組織中的CTGF表達(dá)的影響,進而探討其阻緩腎間質(zhì)纖維化的可能作用機制。 方法: 1.SPF級健康成年雄性大鼠(150g-200g)共30只大鼠隨機分為模型組(n=6),加減草果知母湯組(n=6)、貝那普利組(n=6)、假手術(shù)組(n=6)、空白組(n=6)。 2.單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)制作大鼠腎間質(zhì)纖維化模型。模型組、加減草果知母湯組、貝那
2、普利組行左側(cè)輸尿管結(jié)扎。假手術(shù)組行皮膚切開后包扎逢合??瞻捉M未行手術(shù)。結(jié)扎日起三天每天肌注青霉素8萬單位/只預(yù)防感染。 3.模型組術(shù)后每日給生理鹽水3ml/d灌胃。貝那普利組術(shù)后給以貝那普利5mg/kg/d灌胃。加減草果知母湯組術(shù)后于以中藥6g/(kg·d)灌胃。假手術(shù)組行皮膚切開后包扎逢合并給生理鹽水3ml/d灌胃??瞻捉M只給生理鹽水3ml/d灌胃。至13天開始備行標(biāo)本收集。 4.通過觀察β2微球蛋白(β2-MG)、血
3、清肌酐(Scr)的變化探討加減草果知母湯對UUO大鼠的防治作用;采用免疫組化技術(shù)檢測每組手術(shù)側(cè)腎組織中結(jié)締組織生長因子表達(dá),觀察加減草果知母湯對UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化的影響;以腎組織做病理切片,在光鏡下觀察腎臟組織的結(jié)構(gòu)變化;以腎小管聞質(zhì)病理積分作為觀察指標(biāo),觀察加減草果知母湯對UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化的影響。 結(jié)果: 1.組織形態(tài)學(xué)觀察:加減草果知母湯組和模型組和貝那普利組梗阻側(cè)腎臟的體積增大,色澤蒼白,腎內(nèi)積水,腎實質(zhì)
4、變薄,腎盂乳頭受壓,穹窿部乳頭彎平,乳頭缺血萎縮,積液清亮透明,偶可見包膜下有點狀瘀血。 2.HE染色顯示空白組和假手術(shù)組腎臟腎小管結(jié)構(gòu)正常,模型組部分腎小管管腔擴張,小管上皮細(xì)胞呈扁平狀,部分腎小管萎縮,炎性細(xì)胞浸潤,加減草果知母湯和貝那普利組病變較模型組減輕。根據(jù)HE染色,腎小管間質(zhì)病理積分比較:加減草果知母湯組與模型組比較P<0.01;加減草果知母湯組與空白組比較P<0.01,加減草果知母湯組與貝那普利組比較P>0.05;
5、加減草果知母湯組與假手術(shù)組比較P<0.01。 3.模型組大鼠尿β2-MG含量明顯高于假手術(shù)組和空白組(P<0.01),加減草果知母湯和貝那普利治療組尿β2-MG含量較模型組明顯降低(P<0.01)加減草果知母湯與貝那普利治療組尿β2-MG含量比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05). 4.模型組腎組織中結(jié)締組織生長因子表達(dá)明顯高于假手術(shù)組和空白組(P<0.01),模型組腎組織中結(jié)締組織生長因子表達(dá)明顯高于加減草果知母湯組(P<0.01)
6、,加減草果知母湯組腎組織中結(jié)締組織生長因子表達(dá)高于貝那普利組(P<0.01),加減草果知母湯組腎組織中結(jié)締組織生長因子表達(dá)明顯高于空白組和假手術(shù)組(P<0.01)。 5.各組大鼠Scr含量之間比較無統(tǒng)計學(xué)意義. 結(jié)論: 本研究表明:UU0對大鼠腎臟的損傷主要在腎小管及腎間質(zhì)纖維化。CTGF的過度表達(dá)可能是其導(dǎo)致腎纖維化的機制之一。加減草果知母湯可以降低尿β2-MG含量和CTGF的表達(dá),對UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化具有
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