盾殼霉抗殺菌劑農(nóng)利靈突變菌株的獲得、特性及其應(yīng)用研究.pdf

1、由核盤(pán)菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary]引起的菌核病是油菜上的一種重要病害,在中國(guó)長(zhǎng)江流域?yàn)楹?yán)重.近年來(lái),菌核病的生物防治研究引起了國(guó)內(nèi)外許多研究者的重視.盾殼霉(Coniothyrium minitans)是核盤(pán)菌的一種重寄生菌,具有防治油菜菌核病的潛能.該文從適應(yīng)性變異的盾殼霉后代中獲得了4個(gè)抗殺菌劑vinclozolin的突變菌株;研究了這些突變菌株抗藥性的遺傳穩(wěn)定性和一些生理特性;

2、研究了突變菌株寄生核盤(pán)菌蓖核及抑制核盤(pán)菌侵染的效果;最后探討了利用盾殼霉抗vinclozolin這一遺傳標(biāo)記研究其在土壤中和油菜花瓣上定殖規(guī)律的可行性.采用適應(yīng)性變異方法獲得了4個(gè)抗殺菌劑vinclozolin的盾殼霉突變菌株.與野生型菌株相比,抗性菌株菌絲生長(zhǎng)的EC<,50>為2219.1-2683.9μg ai.i./mL,而野生型菌株的EC50為1.1μga.i./mL.抗性菌株分生孢子萌發(fā)的EC<,50>為609.3—931.3

3、 μga.i./mL,而野生型菌株的EC<,50>為140.0μg a.i./mL.將這些抗性菌株在不含vinclozolin的馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上連續(xù)轉(zhuǎn)代培養(yǎng)(8代)或感染核盤(pán)菌菌核,再分析后代的抗藥特性.結(jié)果表明:4個(gè)盾殼霉突變菌株對(duì)vinclozolin的抗性具有遺傳穩(wěn)定性.在生物學(xué)特性方面,突變菌株在菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)方面略低于野生菌株.但它們?cè)诩纳吮P(pán)菌菌核和抑制核盤(pán)菌子囊孢子侵染等方面與野生菌株沒(méi)有明顯差異.突

4、變菌株在幾丁質(zhì)酶、淀粉酶以及蛋白酶活性等指標(biāo)方面也發(fā)生了不同程度的變化.連續(xù)兩年(2003、2004)的田間試驗(yàn)結(jié)果表明盾殼霉與低劑量的殺菌劑多菌靈或農(nóng)利靈混用對(duì)油菜菌核病均有一定的防治效果.在2003年試驗(yàn)中,使用盾殼霉以及盾殼霉+多菌靈處理的油菜小區(qū)產(chǎn)生的菌核中遭到盾殼霉寄生的頻率分別為46.0﹪和45.3﹪.以青霉素(抑制細(xì)菌)、鏈霉素(抑制細(xì)菌)和農(nóng)利靈(抑制真菌)為基礎(chǔ)配制成一種選擇性分離盾殼霉突變菌株的培養(yǎng)基.對(duì)土壤和油菜花