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文檔簡介
1、轉基因棉花是世界上種植面積最廣的轉基因植物之一,轉基因植物大面積野外釋放以后的生態(tài)安全性一直是個人們關注的熱點問題。本研究選取轉基因抗蟲棉中棉所30及其母系對照非轉基因棉中棉所16(中國農(nóng)業(yè)科學院棉花研究所提供)為實驗材料,在溫室中,采取盆栽實驗的方法,研究轉基因棉花對根際微生物多樣性的影響。 實驗包括三部分:一、棉花不同生長時期,葉片蛋白的檢測運用ELISA法,對不同時期不同種植密度的葉片總蛋白和Bt蛋白進行測定。結果表明:每
2、個密度梯度組內,在棉花生長2葉、5葉、7葉、9葉期總蛋白含量由低到高(5葉期最高),再變低;不同種植密度的植株葉片總蛋白含量差異不大;Bt蛋白含量動態(tài)變化和總蛋白變化一致。各種植密度植株在2葉期Bt蛋白含量占總蛋白的百分比差異不大,在5、7、9葉期,種植密度大(4株/盆、5株/盆)的植株明顯比密度小(2株/盆、3株/盆)的植株所含Bt蛋白含量占總蛋白的百分比大,其中7葉期Bt蛋白含量占總蛋白的百分比差異最大。 二、根際土壤微生物
3、群落生理功能的動態(tài)變化運用BIOLOG法,分析了棉花土壤根際微生物對31種碳底物代謝反應的平均顏色反應(AWCD)值;通過方差分析、主成分分析和聚類分析,結果表明:在2葉和5葉期,轉基因抗蟲棉中棉30的根際土壤微生物在代謝特征上與非轉基因中棉16的根際土壤微生物產(chǎn)生了較大差異,轉基因中棉30根際微生物的生理代謝能力明顯高于非轉基因中棉16根際微生物;但在11葉期,這種差異性變小。 三、棉花根際土壤微生物的變性梯度膠電泳分析應用P
4、CR-DGGE分子生物技術,對不同時期、不同種植密度的棉花土壤微生物16sRNA基因的V3區(qū)進行了分析。結果表明,在2葉、5葉和11葉期,轉基因中棉所30與非轉基因中棉所16的根際土壤微生物在16sDNA條帶數(shù)量和位置差異不大,說明轉基因棉花對根際土壤微生物的遺傳多樣性影響不大。 綜合以上的研究結果,可以得出結論:轉基因抗蟲棉在Bt蛋白含量高的時期(2葉期和5葉期),對土壤微生物的群落生理功能影響較大,根際微生物的生理代謝能力有
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