《分子遺傳學設備使用及實驗技能》_第1頁
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文檔簡介

1、《分子遺傳學設備使用及實驗技能》---醫(yī)學遺傳學實驗技術手冊,,第一章 容器、器械,一、容器㈠ 清洗液的配置㈡ 玻璃器皿的處理及烘干、高壓滅菌(853 洗滌法) ㈢ 橡膠類制品的處理㈣ 手術器械的處理㈤ 載玻片及蓋玻片器的處理㈥ 急用容器的應急方案,㈠ 清洗液的配置:,⑴ 清洗液的配制方法:★特別說明:在耐熱、耐酸的非金屬容器(容器容量要大于,需配置清洗液總量的一倍,這樣可以防止酸液迸濺到容器外),現(xiàn)將稱好的重鉻酸鉀道入

2、相對應量的自來水中,再緩緩加入相對應量濃硫酸,并用玻璃攪拌棒不停的攪拌,直至重鉻酸鉀全部融解。操作時要戴耐酸手套及膠皮圍裙,防止清洗液迸濺到手及衣服上,⑵ 清洗液配方:清洗液常用的有兩種,它是根據(jù)玻璃器皿的污凈程度選用之;,① 強液: 重鉻酸鉀 120g 濃硫酸(98%) 比重1.834 160ml 自來水

3、 1000ml ② 弱液:重鉻酸鉀 50g濃硫酸(98%)比重1.834 90ml自來水 1000ml③ 中液: 如需要介于強液與弱液之間的配方:可取三種試劑的平均值,即為中液,,注: 如果清洗液經(jīng)使用變色為黑綠色時,表明清洗液已經(jīng)失效,需重新配置。在挾持器皿時,忌用金屬工具,以免腐蝕。,㈡.

4、玻璃器皿的處理及烘干、高壓滅菌(853洗滌法),⑴ 先用自來水將玻璃器皿洗去臟物,再用洗滌劑煮沸30分鐘,趁熱刷洗干凈(或用超聲波清洗機用洗滌劑清洗);,,⑵ 將玻璃器皿內的洗滌劑充分洗去,再將玻璃器皿置于裝有自來水的容器內,要將玻璃器皿的空氣排凈,并流水沖洗30分鐘(洗滌劑會影響細胞生長);⑶ 將玻璃器皿洗凈、空干(約24時);,,⑷ 將空干的玻璃器皿,置于裝有清洗液的容器內,要將玻璃器皿的空氣排凈,使玻璃器皿裝

5、滿清洗液,浸泡48小時(有磨口的玻璃器皿:如玻璃注射器,磨口瓶等,免于浸泡清洗液這一步);,,⑸ 將玻璃器皿從清洗液中取出,用自來水充分沖洗8次,并流水沖洗30分鐘后,將玻璃器皿置于裝有蒸餾水的容器內,要將玻璃器皿的空氣排凈,使玻璃器皿裝滿蒸餾水,浸泡48小時,使清洗液的酸性物質完全去掉; ⑹ 將玻璃器皿再用蒸餾水、雙蒸水分別沖洗5次和3次;,⑺ 烘干、高壓滅菌:,① 將洗凈的玻璃器皿,倒置于80℃的烤箱內,烘干;②

6、如果是無菌室內,要用的玻璃器皿,則用(紗布包好脫脂棉制好的)棉塞塞緊器皿口,再用硫酸紙及牛皮紙包好并扎好(玻璃注射器要放入上下墊有紗布的飯盒內,并將注射器桶和芯分開,按對放好),高壓滅菌(15磅20分鐘);,,培養(yǎng)瓶、移液管、離心管等要放入上下墊有紗布的搪瓷盤內,放置烤箱高熱滅菌(180℃2小時)。培養(yǎng)瓶、移液管、離心管等要放入上下墊有紗布的搪瓷盤內,放置烤箱高熱滅菌(180℃2小時)。,㈢. 橡膠類制品的處理,⑴ 新橡膠制品①在

7、處理新橡膠制品時:②先用清水洗充分洗凈滑石粉、雜物及泥土等,③再用自來水水煮除去橡膠制品表面的臘(多次),,,④用1/2mol/L的NaOH 煮沸20分鐘,用自來水沖洗⑤再用1/2mol/L的NaOH 煮沸20分鐘,后用自來水沖洗,徹底沖去堿性物質,⑥最后用蒸餾水沖洗,用雙蒸水浸泡24小時,涼干,放入上下墊有紗布的飯盒內, 高壓滅菌(15磅20分鐘);,⑵ 用過的橡膠制品,用后的橡膠制品立即浸泡在清水中,用洗滌劑煮沸

8、30分鐘, 用自來水沖洗, 用蒸餾水沖洗,用雙蒸水沖洗用雙蒸水浸泡24小時,涼干,放入上下墊有紗布的飯盒內,高壓滅菌(15磅20分鐘)。,⑶ 注意事項,加熱煮沸時,不要擁鋁鍋,而要用不銹鋼鍋,這樣會減少金屬離子量;不銹鋼鍋內的水量,不要超過容量的2/3,防止液面溢出;用電磁爐加熱時,一定要用直徑大于12CM的不銹鋼鍋(不要復合底的),不能使用搪瓷盆等底面不平的容器,最好使用定時功能;用電爐子加熱時,不要離開人,以免燒干,釀

9、成火災。,㈣. 手術器械的處理,⑴ 新手術器械:新手術器械為了防止生銹,出廠前涂有黃油,在處理前用軟紙擦去油污,再用清水洗去污物后,加熱去除油脂再用洗滌劑煮沸2次,每次10分鐘, 用自來水洗去洗滌劑殘留,用蒸餾水沖洗,用過氧乙酸浸泡24小時, 用蒸餾水沖洗,洗去酸性物質, 用雙蒸水沖3次,涼干,放入上下墊有紗布的飯盒內, 高壓滅菌(15磅20分鐘)。,⑵ 用后的手術器械:,用后的手術器械立即清水洗去污物,用洗滌劑煮沸10分

10、鐘, 用自來水沖洗,去洗滌劑殘留, 用蒸餾水沖洗,用過氧乙酸浸泡24小時, 用蒸餾水沖洗,洗去酸性物質, 用雙蒸水沖3次,涼干,放入上下墊有紗布的飯盒內,高壓滅菌(15磅20分鐘)。,㈤ 急用容器的應急方案,當你準備實驗時,發(fā)現(xiàn)你準備的器皿數(shù)量不足;或你準備的器皿被他人挪用,而重新準備時間又不足!你可以用快速干燥法去準備:⑴ 要養(yǎng)成好習慣,將用完的器皿隨時處理,刷洗到要滅菌之前那一步;⑵ 其次也要將用完的器皿,將污物處理干凈

11、;⑶ 如果重頭來處理器皿,就將相對干凈的器皿刷洗干凈,在涼干那一步用無水乙醇涮到器皿的全部內面,甩凈,由于無水乙醇蒸發(fā)的速度較快,同時也能將有機物及水份一起蒸發(fā)掉,這樣就加快了涼干的速度了,其他步驟照舊。,㈥ 載玻片及蓋玻片器的處理,⑴ 載玻片 將載玻片從包裝中取出,去掉載玻片中夾的薄紙,在用前24小時將載玻片放入95%乙醇的容器內,浸泡、去脂后取出,用真絲布將玻片仔細擦凈,使之無塵無毛無油漬,放入干凈有蓋的盒內備用;,⑵

12、蓋玻片,載玻片在用前24小時,將載玻片放入95%乙醇的容器內,浸泡、去脂后取出用真絲布將玻片仔細擦凈,由于蓋玻片薄擦拭時要用拇指和食指在真絲布下,小擦使之能感到手指能用上力而又不使蓋玻片不碎,為好。,第二章 儀器設備,,儀器設備是我們實驗的工具和確保證實驗成功的有力保障; 儀器設備的完好和正常運轉會直接影響到我們實驗的進度和實驗結果的準確性。 所以,認真按規(guī)范正確操作方法使用儀器,定期認真維護儀器,不讓儀器帶病運轉,也就

13、成了我們實驗的重要的一部分。,㈠ 加熱儀器、設備,1.電磁爐使用中的注意事項:⑴ 一定要使用不銹鋼容器;不銹鋼容器與電磁爐接觸的底面直徑要大于12CM; ⑵ 不銹鋼容器與電磁爐接觸的底面要平,不要有上凸或下凹;,,⑶ 不銹鋼容器與電磁爐接觸的底面,不能是復合底;⑷ 不要將空不銹鋼容器放在電磁爐,否則會使將不銹鋼容器產(chǎn)生的熱量,將電磁爐面燙壞;⑸ 容器內所加入的液體,不能多于容器高度的2/3,入容器內所加入的液體

14、含有洗滌劑等去污劑,則不能多于容器高度的1/2;,,⑹ 不能在電磁爐上使用搪瓷盆等非不銹鋼容器;⑺ 在使用完畢時,關閉電源開關后,不要馬上拔下電源插頭,因為電磁爐內部的風扇還要將電磁爐內部的熱量散發(fā)出去,等風扇自動停止后,方可電源插頭;⑻ 電磁爐的放置:要放在水濺不到、通風良好的地方,并要使電磁爐的臺面潔凈、無塵,防止小金屬物件混入電磁爐內部;,,⑼ 要定期用不會劃傷電磁爐的軟布清理電磁爐的表面,防止污物影響容器底與電磁

15、爐表面的接觸及導熱;⑽ 如果發(fā)現(xiàn)異常,立即關閉電源,并及時告知負責維修人員,切勿自行拆卸?。?⒉ 微波爐,微波爐也是一種常見的加熱設備,使用方法及操作步驟簡單,它是由微波爐內的磁控管引起食物內水的極性分子以每秒24.5億次振動,由于振動所引起的摩擦使水產(chǎn)生高熱,從而達到加熱的目的。,⑴ 微波爐按功能分為幾種型,① 微波+燒烤型:是除有利用磁控管加熱的外,在微波爐內膽頂還有2~3支紅外管,用于輻射加熱,即燒烤;② 微波+光波型:

16、光波微波組合爐是在微波爐爐腔內增設了一個光波發(fā)射源,能巧妙地利用光波和微波綜合對食物進行加熱,光波有殺菌消毒功能,能根據(jù)不同物品進行消毒;,,③ 微波+轉波型: 這是繼微波爐、燒烤(光波)爐、轉波爐之后,全球第四種微波爐,解決了前三種微波爐不能蒸食物的難題。即以前微波爐是轉盤帶著食物轉,現(xiàn)在是食物不動,微波帶著蒸汽在轉,相對增加了微波爐的空間;④ 還有三合一、四合一型;,⑵ 下面將注意事項說一下:,⑴ 單獨微波加熱時,嚴禁放入

17、金屬物品及容器,僅能放入有容許放入微波爐標識的塑料、玻璃、陶瓷等容器,否則會產(chǎn)生火花,燒毀電磁爐,發(fā)生火災;⑵ 燒烤加熱時,嚴禁放入易燃物品,如:塑料、紙制容器,否則會產(chǎn)生明火,燒毀電磁爐,發(fā)生火災;,,⑶ 單獨光波加熱時,僅能對濕毛巾等物品進行消毒,不能單獨加熱物品;⑷ 微波爐內嚴禁放入密閉物品,如:蛋類、未開啟的罐頭等,否則,由于加熱后,物品內部膨脹產(chǎn)生爆炸,損壞微波爐;,,⑸ 在放入有容許放入微波爐標識的塑料、玻璃、陶

18、瓷等容器后,其容器內的液體,要少于容器高度的2/3,否則液體溢出后,會流入轉盤下的電機里,造成電磁爐損壞;⑹ 放入微波爐內的容器,不要過高、過大,以不影響轉盤轉動為好,如果影響到轉盤轉動或將轉盤卡死,會使電機憋燃,燒毀微波爐產(chǎn)生火災;,,⑻ 如果發(fā)現(xiàn)微波爐的門沒有關嚴,而微波爐還在工作,一定要快速遠離微波爐,立即拉下電閘??!否則會產(chǎn)生微波泄漏,有生命危險?。。、?如果發(fā)現(xiàn)異常,立即關閉電源,并及時告知負責維修人員,切勿自行

19、拆卸??!,⒊ 水浴箱,浴箱又稱電熱恒溫水浴鍋與水箱是一種隔水加熱的最常見的設備之一, 第一次使用時要搞好箱內衛(wèi)生,擦去內膽的油污。 電熱恒溫水浴鍋、水浴箱,水浴鍋一般被用為蒸發(fā)和恒溫加熱或保溫用。 水浴鍋由水槽加熱管及控溫部分組成,水槽一般為鋁合金、不銹鋼或黃銅板制成,有焊接和一次拉伸成形兩種; 控溫系統(tǒng)采用電子控溫電路,使其產(chǎn)品穩(wěn)定性、可靠性有很大的提高,溫度控制有旋鈕式和按鍵式,一般旋鈕

20、式配有指式溫度顯示器,而按鍵式則配數(shù)字或溫度顯示器。,⑴水浴鍋工作條件:,環(huán)境溫度:5—40℃ 相對濕度≤80% 電源220±22V、50±1HZ水浴鍋的溫度波動度及溫度均勻性應不大于±0.5℃。水浴鍋設置溫度精度不大于2%;水浴鍋顯示溫度精度不大于2%。水浴鍋加水至隔板以上50mm,由環(huán)境溫度升至沸點的時間應不超過60min。,,水浴鍋工作室與外殼間應均勻充填絕熱材料,外殼溫升不大于25℃。水

21、浴鍋的出水口不得有堵塞滲水現(xiàn)象,并應能在1Omin內將水放完。 水浴鍋單列4孔、6孔應帶有牢固的支架和夾子,夾子應能前后調節(jié)。水浴鍋電源線穿過外殼處,應有絕緣護圈,并且電源線外露部分的長度不短于2M。,⑵ 根據(jù)控溫加熱方式分為:,機械控制、電子控制兩種;⑴使用方法及操作步驟極為簡單,但有幾點要注意:①使用前,用前首先水浴箱內加的水,一定要加入蒸餾水,這樣可以防止水垢產(chǎn)生,影響導熱,還可以確保水溫的準確性;也可加入去離子水或蒸餾

22、水,,,② 水位調至適當?shù)纳疃?,最低水位不得低于電熱管以?厘米,并隨時觀察水量,防止水面低于電發(fā)熱管,否則水位過低將導致電熱管因溫度過高而燒毀;最高水位一般不超過水浴鍋容量的2/3;③ 由于水浴箱是一種低檔設備,所以,溫度的準確性,相對較低,或誤差較大,為了校正誤差,多選幾支在同一室溫下溫度一致的溫度計,放入水浴箱內,將溫度計與水浴箱上的溫度指示相比較, 校正誤差;,,④ 在使用機械控制溫度的水浴箱時,要在使用前3~5天,接

23、通水浴箱電源,將控溫旋鈕調到總刻度的1/3處,隨時觀察,將控溫旋鈕調每次往高溫處增加少許,直至溫度達到所需溫度,不要一次調的過大,使之超出所需溫度,如果是夏天,降溫會很慢(如果超出所需溫,就要加入少許冷水,再慢慢調上溫度來),如果操之過急,水溫波動會很大,不好控制!,,在使用期間,尤其是提拿水浴箱內物品時,要遠離電路控制部分,防止滴下的水滴掉進電路內,造成儀器損壞及事故;⑥ 恒溫箱使用時嚴禁把酸、堿、鹽等化學藥品灑入加熱水中,以防

24、腐蝕箱體。電源插頭接在插座上,并在插座的粗孔安裝地線。,,接通電源,打開開關,調整旋鈕至所需溫度。綠燈亮,表示加熱;黃燈亮為恒溫狀態(tài)。此時顯示數(shù)值為所需溫度;⑧ 在使用一段時間后,要及時更換水浴箱內的蒸餾水,這樣可以減少水浴箱內的污垢、水垢、霉菌及酸性或堿性物質;,,在更換水浴箱內的蒸餾水的同時,要仔細清洗水浴箱內膽,特別是電熱管及測溫部件(如:溫度計的水銀部分、電子控溫的金屬探頭部分),使溫度顯示的更準確;⑩ 在用完水浴箱

25、后,及時關蓋,可以防止水份蒸發(fā),掉進異物使水不潔凈同時還浪費電力資源,以保證溫度準確;,⑵ 安全性注意事項:,電源電壓必須與產(chǎn)品要求的電壓相符,電源插座應采用三孔安全插座,必有良好的接地保護。熔斷器要有相關人員更換,切勿隨意自行更換。注水時,不可將水流人控制箱內,以防發(fā)生觸電。用戶不能隨意調動和更換機內部件、元件,如果發(fā)現(xiàn)冒煙等異常,立即關閉電源,并及時告知負責維修人員,切勿自行拆卸?。∈褂们?,必首先將水加入至隔板以上50mm以

26、上,再通電加熱。注意不能干燒。 使用時,注意放隔板,不應手觸電熱元件,避免燙傷。如果發(fā)現(xiàn)異常,及時告知負責維修人員,切勿自行拆卸??!,4.數(shù)顯超級恒溫油槽 數(shù)顯超級恒溫油浴,超級恒溫循環(huán)油槽(浴),是恒溫油槽的基礎上改進的產(chǎn)品,廣泛應用于蒸餾、干燥、濃縮以及浸漬化學藥品或生物制品。是各大中專院校、環(huán)保、科研、衛(wèi)生、防疫、石油、冶金、化工、醫(yī)療等單位實驗室化驗人員必備的理想工具。,1.性能,(1) 電源220V±10V 5

27、0HZ(2) 控溫范圍室溫—300℃(3) 控溫精度:±0.1(4) 帶循環(huán)泵 油槽內可裝油20升(5) 有內循環(huán),和外循環(huán)二種方式(6) 循環(huán)泵的流量≥8升/分 循環(huán)進出口外 徑10mm 內徑8mm(7)工作室尺寸400×300×180 特殊規(guī)格可以定做,⑵ 使用方法,本品為電熱式,所以用電功率較大,使用前首先要查看電源的負載受力,以防過載,如使用電源符合使用條件,再接通后面

28、接線端(接地線一定要良好)首先將油注入油槽,至油位線,再打開電源開關至ON檔,此時控制顯示油溫度,如需設定槽內溫度,將儀器控制面板溫控儀,調至溫控儀加閥器至你所需要溫度。再將加熱一關至ON檔,此時開始加溫,指示燈為綠色,當溫度達到設定值時,指示燈為紅色,此時油槽里面溫度就是你所需要溫度,因油槽體積較大,油槽溫度有一定溫沖,可能高于設定溫度,等恒溫幾分鐘后油槽溫度就是你所設定溫度,使用完該儀器后請將加閥器調至零端,以備后用,同時關閉電源

29、開關和電閘,⑷ 注意事項,為了確保安全,使用時請接地線嚴禁不加油、干燒③ 不工作時,應切斷電源,以免發(fā)生意外,5.電熱恒溫干燥箱,電熱恒溫干燥箱也叫電烤箱、電烘箱是利用電熱絲隔層加熱使物體干燥的設備。它適用于比室溫高5~300℃(有的高200℃)范圍的烘培、干燥、加熱處理,靈敏度通常為±1℃。它的型號很多,但基本結構相似,一般由箱體、電熱系統(tǒng)和自動控溫系統(tǒng)三部分組成。,,由于它的工作溫度較高,其周圍不要放置易燃易爆物

30、品。干烤培養(yǎng)瓶等物品,包有牛皮紙及包有棉塞等易燃物時,應放在搪瓷盤中。第一次使用時要搞好箱內衛(wèi)生,擦去內膽的油污,以防加熱時出現(xiàn)冒煙。橡膠制品嚴禁干烤!如發(fā)生燃燒冒煙等意外,切忌勿用水澆,應立即拉斷電源??!并通知相關人員。,⑴ 其使用及注意事項總結如下:,① 烘箱應安放在室內干燥和水平處,防止振動和腐蝕。② 要注意安全用電,根據(jù)烘箱耗電功率安裝足夠容量的電源閘刀。選用足夠的電源導線,并應有良好的接地線。③ 烘箱內外要保持干凈

31、。,,④ 使用時,溫度不要超過烘箱的最高使用溫度。⑤ 為防止燙傷,取放試品時要用專門工具。⑥ 止烘焙易燃、易爆、易揮發(fā)及有腐蝕性的物品。,⑵電烤箱分為:,⑴ 電熱恒溫干燥型;⑵ 自動電熱恒溫干燥型(即有定時功能);,⑴ 電熱恒溫干燥型;,在使用時要注意:① 在使用前要選好一個準確的溫度計,溫度計的量程,要在250℃上,帶有電接點水銀溫度計式溫控器的烘箱,應將電接點溫度計的兩根導線分別接至箱頂?shù)膬蓚€接線柱上。另將一支

32、普通水銀溫度計插入排氣閥中,(排氣閥中的溫度計是用來校對電接點水銀溫度計和觀察箱內實際溫度用的)打開排氣閥的孔。調節(jié)電接點水銀溫度計至所需溫度后緊固鋼帽上的螺絲,以達到恒溫的目的。但必須注意調節(jié)時切勿將指示鐵旋至刻度尺外;,,③ 放入干烤物品一定要80℃一下烘干或自然涼干,以免水流到烤箱內;當一切準備工作就緒后方可將試品放入烘箱內,然后連接并開啟電源,紅色指示燈亮表示箱內已加熱。當溫度達到所控溫度時,紅燈熄滅綠燈亮,開始恒溫。為了防止溫

33、控失靈,還必須照看;④放入試品時應注意排列不能太密。散熱板上不應放試品,以免影響熱氣流向上流動;,,⑤ 放入干烤物品并達到需要溫度后,一定要關閉排氣口!否則會引發(fā)電烤箱內易燃物品燃燒!并開始干烤計時;⑥ 當需要觀察工作室內樣品情況時,可開啟外道箱門,透過玻璃門觀察。但箱門以盡量少開為好,以免影響恒溫。特別是當工作在200℃以上時,開啟箱門有可能使玻璃門驟冷而破裂。,,⑦ 干烤完畢后(一般為180℃2小時),不要立即打開電烤箱!烤

34、箱內的玻璃器皿會炸裂,電烤箱內易燃物品也會遇空氣燃燒;⑧ 由于該型號電烤箱無自動關機功能,應有人看管,切記??!到時關閉電烤箱;否則會引發(fā)火災!,⑵自動電熱恒溫干燥型(即有定時功能):,在使用時要注意:① 在使用前要選好一個準確的溫度計,溫度計的量程,要在250℃上,并用這個溫度計校準電烤箱上的溫度指示;加熱前將排氣口打開;需干烤的物品必須是干燥的;放入干烤物品并達到需要溫度后,一定要關閉排氣口!干烤完畢后,不要立即打開

35、電烤箱!因為一般電烤箱的鐵門內還有一層玻璃門,突然遇冷,玻璃門以及烤箱內的玻璃器皿會炸裂,電烤箱內易燃物品也會遇空氣燃燒;,⑶電熱鼓風恒溫干燥型:在使用時要注意:,干烤達到溫度后,有鼓風的烘箱,在加熱和恒溫的過程中必須將鼓風機開啟,否則影響工作室溫度的均勻性和損壞加熱元件;由于該型號電烤箱無自動關機功能,為了防止溫控失靈,還必須照看!切記??!到時關閉電烤箱;否則會引發(fā)火災?、?其他與電熱恒溫干燥型烤箱注意事項一致;,⑷ 自動電

36、熱鼓風恒溫干燥型(即有定時功能),① 在使用前要選好一個準確的溫度計,溫度計的量程,要在250℃上,并用這個溫度計校準電烤箱上的溫度指示;② 加熱前將排氣口打開;③ 需干烤的物品必須是干燥的;④ 放入干烤物品并達到需要溫度后,一定要關閉排氣口!,,⑤ 有鼓風的烘箱,在加熱和恒溫的過程中必須將鼓風機開啟,否則影響工作室溫度的均勻性和損壞加熱元件。⑥ 干烤完自動關畢后,不要立即打開電烤箱!因為電烤箱的鐵門內還有一層玻

37、璃門,突然遇冷,玻璃門以及烤箱內的玻璃器皿會炸裂,電烤箱內易燃物品也會遇空氣燃燒;,,自動電熱鼓風恒溫干燥箱,只是升溫和計時及關是自動的,其他還需有人看管;⑧ 如果發(fā)現(xiàn)異常,立即關閉電源,并及時告知負責維修人員,切勿自行拆卸!!,6. 恒溫培養(yǎng)箱,恒溫培養(yǎng)箱用于醫(yī)療衛(wèi)生、醫(yī)藥、生物、農業(yè)、科研等部門作儲藏菌種、生物培養(yǎng)。是進行科研的必不可少的常用設備,電熱恒溫培養(yǎng)箱采用薄鋼板制作而成,工作室內有試品擱板,工作室與箱體外殼之間有保溫

38、層,第一次使用時要搞好箱內衛(wèi)生,擦去內膽的油污,用洗滌劑清洗干凈后,用75%乙醇擦拭,再用過氧乙酸或碘伏擦拭消毒,方可使用。,分類,根據(jù)加熱方式分為電加熱,燃油加熱(現(xiàn)基本絕跡)等;根據(jù)箱體的保溫材料,分為氣套和水套式;根據(jù)內膽材料,可分為不銹鋼內膽和銅內膽;根據(jù)控溫方式,分為程控,電子控溫,機械控溫;根據(jù)顯示方式,分為數(shù)碼顯示,液晶顯示,電子顯示等等。,⑴使用環(huán)境,①溫度:5-----40℃ ② 相對濕度:≤90% ③

39、 電源:220V±22V,頻率:50HZ±1HZ ④ 周圍無強烈震動及腐蝕性氣體存在。 ⑤ 應避免陽光直接照射或其他冷熱源的影響。,⑵ 恒溫培養(yǎng)箱無論什么方式或型號,主要是在使用時要注意:,① 通電前,先檢查培養(yǎng)箱的電氣性能,并應注意是否有斷路或漏電現(xiàn)象。② 在使用前要選好一個準確的溫度計,溫度計的量程,要在(培養(yǎng)細菌或細胞時)50℃以內,(這樣的溫度計更精密一些,),并用這個溫度計校準恒溫培養(yǎng)

40、箱的溫度顯示;,,③ 如果是水套恒溫培養(yǎng)箱,在使用前需在恒溫培養(yǎng)箱的箱壁上方加水口,加入含有少許硫酸銅的水溶液(使水略帶有綠色即可,其目的是起防腐作用),加至約箱高的3/4處,或浮漂標志處,加水不能過多或過少,過多水會溢出,損壞電路;過少也會損壞電路,并使箱內溫度不穩(wěn);,,④在使用機械控制溫度的恒溫培養(yǎng)箱時,要在使用前3~5天,接通恒溫培養(yǎng)箱電源,將控溫旋鈕調到總刻度的1/3處,隨時觀察,將控溫旋鈕調每次往高溫處增加少許, 溫度恒溫時

41、,其溫度往往會繼續(xù)上升,這是余熱影響,此現(xiàn)象約90分鐘后趨于穩(wěn)定。直至溫度達到所需溫度,不要一次調的過大,使之超出所需溫度,降溫困難;,,⑤電熱培養(yǎng)箱準備就緒,可放入試品,關上箱門,適當調節(jié)排氣閥,物品放置箱內不宜過擠,以便冷熱空氣對流不受阻塞,以保持箱內溫度均勻恒溫培養(yǎng)箱應放在一個相對穩(wěn)定,空氣流通少的位置,,⑥ 控溫紐要絕少移動,用不同的溫度培養(yǎng)物,應分別放在相應的恒溫培養(yǎng)箱內;隨意調控溫紐,會使恒溫培養(yǎng)箱內的溫度波動很大,并不能在

42、短時間內穩(wěn)定;⑦ 在每次取培養(yǎng)物時,最好動作迅速,以免影響箱內溫度。在使用一段時間后,注意觀查箱膽內的水位,注意添加,以免燒漏水套。,注意事項,① 箱體內必須有可靠的接地,以確保安全。通電時切忌打開箱體,左側門內有電器線路,防止觸電,切勿用濕布楷摸,更不能用水沖洗。② 打開大門觀察試物時,不能將水點濺在玻璃上,以防玻璃受聚冷而暴烈。,,移動箱體必須先切斷電源,將箱內的物品取出,防止觸電和碰損。易燃物品不宜放入箱內作烘焙

43、試驗,如需作烘焙試驗,事先應測得各物品的燃燒溫度,以防燃燒。 經(jīng)常保持箱體及電器線路清潔,如果發(fā)生故障時應停止使用送有關單位修理。,7. 二氧化碳培養(yǎng)箱,CO2培養(yǎng)箱是通過對周圍環(huán)境條件的控制制造出一個能使細胞/組織更好地生長的環(huán)境,條件控制的結果就會形成一個穩(wěn)定的條件:如恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、穩(wěn)定的溫度(37℃)、較高的相對濕度(95%)、穩(wěn)定的CO2水平(5%),這就是為什么上述領域的研究員如此熱衷于使用方便穩(wěn)

44、定可靠的二氧化碳培養(yǎng)箱。此外,由于增加了二氧化碳濃度控制,并且使用微控制器對培養(yǎng)箱溫度進行精確控制,使生物細胞,組織等的培養(yǎng)成功率、效率都得到改善。總之,二氧化碳培養(yǎng)箱是普通電熱恒溫培養(yǎng)箱不可替代的新型培養(yǎng)箱。,,⑴ 二氧化碳培養(yǎng)箱分類 根據(jù)保溫外壁分為: 水套式和氣套式:,,⑴ 水套式: 二氧化碳培養(yǎng)箱主要由箱體結構件、溫度控制系統(tǒng)和CO2濃度控制系統(tǒng)三部分組成。

45、 箱體結構件由外殼、保溫材料和不銹鋼水套組成為水套式,水套式為雙層箱體構造,一個一英寸的水套包裹內層箱體,此層之外第二層為絕緣層包裹不銹鋼外箱體,這種設計能夠獲得特別的溫度一致性,它將熱量損失和腔體內部冷點減少到最少,這種設計也減少了主要污染源產(chǎn)生的濃縮, 除正面玻璃門外,其余五面均為充滿水的不銹鋼夾層,通過熱水的循環(huán),使工作室處于等溫水的夾層包圍中,因此受熱均勻、恒定,降溫慢,即使停電5~6小時,也保證細胞存活,但它與氣套式相比 ,加

46、熱略慢。采用雙層門設計,內面的玻璃門便于觀察細胞生長,又對環(huán)境干擾較?。?,⑵ 氣套式: 箱體結構件由外殼、保溫材料和不銹鋼氣套組成為氣套式, 它與水套式相比 , 具有加熱快特點, 但如果開門次數(shù)過多,向內溫度易下降過快; 氣套式與水套式二氧化碳培養(yǎng)箱外門內側設有自動控溫的襯板,使玻璃門不結露、不受環(huán)境溫度變化的影響。,2) 二氧化碳培養(yǎng)箱根據(jù)二氧化碳傳感器的不同分為:,銀摻雜的半導體氧化物二氧化碳傳感器;新型紅

47、外二氧化碳 C/T 傳感器; 超聲波傳感器; CO2 IR傳 感器, 熱傳導二氧化碳傳感器等,傳感器結構特點,熱導式傳感器結構熱導式傳感器結構簡單、成本低廉,但過于靈敏,受環(huán)境影響大,容易產(chǎn)生零點漂移。,,② 紅外傳感器(IR)作為另一個可選擇的控制系統(tǒng)比TC系統(tǒng)具備更精確的CO2控制能力,它是通過一個光學傳感器來檢測CO2水平的,紅外線式傳感器不能在潮濕的培養(yǎng)箱內工作,便采用外置傳感器方式,將培養(yǎng)箱內的氣體用氣泵抽

48、出并冷凝去濕后再檢測,然后將氣返送回箱內。這種方式管路復雜,機械耗損大,檢測結果滯后,故障率也高。自動控制CO2濃度 只要給定一個設定值,儀器便自動控制CO2濃度,比較流量計方式,操作更簡單,省氣精度高,穩(wěn)定性好;,,③ 二氧化碳超聲波傳感器,高濕度不受影響,具有性能穩(wěn)定、檢測速度快、能適應潮濕的箱內環(huán)境、線性好等優(yōu)點,無機械磨損,使用壽命長。,⑶ 二氧化碳培養(yǎng)箱的選購:,① 使用者對二氧化碳培養(yǎng)箱的選購最關心的當然就是其可靠性、

49、污染物的控制和使用方便。CO2培養(yǎng)箱主要控制模擬活體內環(huán)境相關的3個基本變量:穩(wěn)定的CO2水平、溫度、相對濕度。要有穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境,就要考慮這三方面的影響因素,選購時,就應該對這些“重中之重”有一定的了解才能選到適合自己的儀器。但是,其它的一些方面的“小”因素也不能忽略,因為這些都會影響儀器的使用價值和壽命。選購時,就應該從各方面的因素加以考慮。,② 要看二氧化碳培養(yǎng)箱所放置的位置、環(huán)境:,二氧化碳培養(yǎng)箱所放置環(huán)境溫度變化比較大,使

50、用二氧化碳培養(yǎng)箱的人多,開關二氧化碳培養(yǎng)箱門的次數(shù)較頻,則應選購水套式;因為水套式二氧化碳培養(yǎng)箱受熱均勻、恒定,降溫慢,即使停電5~6小時,也保證細胞存活; 如果使用培養(yǎng)箱的人少,不經(jīng)常停電,且周圍環(huán)境溫度相對恒定,則應選購氣套式,因為氣套式升溫快,箱內溫度均衡,開門所下降的溫度,能很快升; 二氧化碳培養(yǎng)箱的傳感器應選擇超聲波傳感器,高濕度不受影響,具有性能穩(wěn)定、檢測速度快、能適應潮濕的箱內環(huán)

51、境、線性好等優(yōu)點,無機械磨損,使用壽命長。,⑷ 二氧化碳培養(yǎng)箱使用注意事項:,二氧化碳培養(yǎng)箱所使用的二氧化碳,濃度 要純,找正規(guī)氣體公司提供服務,鋼瓶在 使用前要打壓,氣體需純凈達標,以免損 傷儀器;② 二氧化碳培養(yǎng)箱所使用的二氧化碳減壓表,要準確,為二氧化碳減壓專用表,不可用 其他壓力表代替;,,③ 二氧化碳培養(yǎng)箱所使用的二氧化碳供氣管要專用,不要用其他膠管替代(如聽診器管等耐壓低的膠管

52、); 二氧化碳減壓表與二氧化碳培養(yǎng)箱間的供氣管要串接二氧化碳過濾器,以保證給二氧化碳培養(yǎng)箱提供的二氧化碳無雜質,防止堵塞二氧化碳培養(yǎng)箱內的二氧化碳過濾器,也可防止雜質損壞二氧化碳控制閥門;,,④ 二氧化碳減壓表的供氣表,不可將流入氣體壓力調至過大,要控制在0.06MP內,過高會使二氧化碳培養(yǎng)箱內的二氧化碳進氣口的膠管脫落,也會使二氧化碳培養(yǎng)箱內的二氧化碳控制閥損壞及損傷探測器;⑤ 儀器應放置在平整的地面上,環(huán)境應清潔整齊,干燥

53、通風處,第一次使用時要搞好箱內衛(wèi)生,擦去內膽的油污,用洗滌劑清洗干凈后,用75%乙醇擦拭,再用過氧乙酸或碘伏擦拭消毒,再用高壓過的蒸餾水徹底清洗,方可使用;,,⑥ 如果是水套式二氧化碳培養(yǎng),在使用前需在二氧化碳培養(yǎng)的箱壁上方加水口,加入含有少許硫酸銅的水溶液(使水略帶有綠色即可,其目的是起防腐作用),為了防止水受熱也出第一次不要加的過滿,等到溫度恒定,以水不溢出為好,或加到水位標志處,加水不能過多或過少,過多或過少都會損壞電路,并使箱

54、內溫度不穩(wěn);在使用一段時間后,注意觀查水套內的水位,注意添加,以免燒漏水套;,,⑦ 儀器使用前,各控制開關均應處于非工作狀態(tài),調速旋鈕應置于最小位置;每次停機前,各控制開關均應處于非工作狀態(tài)才切斷電源;⑧ 物品放置箱內不宜過擠,以便使氣體對流不受阻塞,卻保持箱內溫度均勻, 不適用于含有易揮發(fā)性化學溶劑,低濃度爆炸氣體和低著火點氣體的物品以及有毒物品的培養(yǎng);,,⑨ 使用時盡量減少開關二氧化碳培養(yǎng)箱門的次數(shù),以保證二氧化碳的濃度及箱內

55、溫度,以免氣體外泄,影響試驗效果;⑩ 二氧化碳培養(yǎng)箱內的水盤所加的,一定是滅菌的蒸餾水,并注意觀察,防止霉菌生長!如果發(fā)現(xiàn)霉菌生長,要嚴格將二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒滅菌;保持培養(yǎng)箱內空氣干凈,并定期消毒;經(jīng)常注意箱內蒸餾水槽中蒸餾水的量,以保持箱內相對濕度,同時避免培養(yǎng)液蒸發(fā);,⑸ 溫度控制:,保持培養(yǎng)箱內恒定的溫度是維持細胞健康生長的重要因素。 當選購二氧化碳培養(yǎng)箱時,有兩種類型的加熱結構可供選擇:氣套式加熱和水套式加熱。雖

56、然這兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的,但是它們都有著各自的優(yōu)點和缺點。,,水套式培養(yǎng)箱是通過一個獨立的熱水間隔間包圍內部的箱體來維持溫度恒定的。熱水通過自然對流在箱體內循環(huán)流動,熱量通過輻射傳遞到箱體內部從而保持了溫度的恒定。 獨特的水套式設計有其優(yōu)點:水是一種很好的絕熱物質,當遇到斷電的時候,水套式系統(tǒng)就能更可靠地長久保持培養(yǎng)箱內的溫度準確性和穩(wěn)定性(維持溫度恒定的時間是氣套式系統(tǒng)的4-5倍)。如果您的實驗環(huán)境不太穩(wěn)定

57、(如有用電限制,或者經(jīng)常停電)并需要保持長時間穩(wěn)定的培養(yǎng)條件,此時,水套式設計的二氧化碳培養(yǎng)箱就是您最好的選擇。,,而氣套式加熱系統(tǒng)是通過箱體內的加熱器直接對箱內氣體進行加熱的。氣套式設計在箱門頻繁開關引起的溫度經(jīng)常性改變的情況下能夠迅速恢復箱體內的溫度穩(wěn)定。因此,氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關的培養(yǎng)。此外,對于使用者來說氣套式設計比水套式更簡單化(水套式需要對

58、水箱進行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運作的情況)。在購買氣套式培養(yǎng)箱時,要注意的是:為了不影響培養(yǎng),培養(yǎng)箱還應該有一個風扇以保證箱內空氣的流通和循環(huán),此裝置還有助于箱內溫度、CO2和相對濕度的迅速恢復。,,此外,有些類型的二氧化碳培養(yǎng)箱還具備外門及輔助加熱系統(tǒng),這個系統(tǒng)能加熱內門,提供給細胞良好的濕度環(huán)境,保證細胞滲透壓維持平衡,且可有效防止形成冷凝水以保持培養(yǎng)箱內的濕度和溫度。如果您的培養(yǎng)環(huán)境需要精確的控制,那么這個輔助系統(tǒng)則是

59、必不可少的,⑹  CO2控制,CO2濃度探測當二氧化碳培養(yǎng)箱的門被打開時,CO2從箱體內漏出,此時傳感器就會探測到CO2濃度的降低,并做出及時的反應,重新注入CO2使其恢復到原先預設的水平。熱傳導傳感器(TC)監(jiān)控CO2濃度的工作原理是通過測量兩個電熱調節(jié)器(一個調節(jié)器暴露于箱體環(huán)境內,另一個則是封閉的)之間的電阻變化來實現(xiàn)的。箱內CO2濃度的變化會改變兩個電熱調節(jié)器間的電阻,從而促使傳感器產(chǎn)生反應以達到調節(jié)CO2水平的作用

60、。,⑺ 相對濕度控制,培養(yǎng)箱內相對濕度的控制是非常重要的,維持足夠的濕度水平才能保證不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。大型的二氧化碳培養(yǎng)箱是用蒸汽發(fā)生器或噴霧器來控制相對濕度水平的,而大多數(shù)中、小型培養(yǎng)箱則是通過濕度控制面板(humidity pans)的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95-98%)。 一些培養(yǎng)箱有一個能在加熱的控制面板上保持水份的濕度蓄水池(humidity reservoir),這樣可以增強蒸發(fā)

61、作用,此蓄水池能增加相對濕度水平達97-98%。但是,這個系統(tǒng)也更復雜,由于復雜結構的增加一些難以預料的問題也會在使用過程中出現(xiàn)。,⑻ 微處理控制系統(tǒng):,每一個使用者都希望所用的儀器能夠方便好用,微處理控制系統(tǒng)和其它各種功能附件(如高溫自動調節(jié)和警報裝置、CO2警報裝置、密碼保護設置、自動校準系統(tǒng)等等)的運用,就使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和控制都非常的簡便。微處理控制系統(tǒng)是維持培養(yǎng)箱內溫度、濕度和CO2 濃度穩(wěn)態(tài)的操作系統(tǒng);,,例如PI

62、C微處理器控制系統(tǒng),它能嚴格控制氣體的濃度并將其損耗降至極低水平,以保證培養(yǎng)環(huán)境恒定不變,且能保證長期培養(yǎng)過程中箱內溫度精確,并有LED 顯示,可設置、校正溫度和CO2濃度。 不同的微處理系統(tǒng)雖然名字不相同,但是其原理與控制效果則無甚區(qū)別,選購時不必太在意它們名字上的區(qū)別,關鍵是要自己覺得使用起來方便,容易操作,而且要能夠達到所需的控制精度。,⑼ 特別注意:,① 如有密碼: 操作密碼設置需至少3人知道, 以免遺忘密碼而無法開啟

63、儀器;② 正確地使用和注意儀器的保養(yǎng),使其處于良好的工作狀態(tài),可延長儀器的使用壽命;,③ 儀器在連續(xù)工作期間,每三個月應做一次 定期檢查: 檢查是否有水滴,污物等落入電機和外露的制冷元件上; 清理壓縮機,冷凝器上的灰塵和污物; 檢查保險絲,控制元件及緊固螺釘;,,④ 如果發(fā)現(xiàn)異常,及時告知負責維修人員,切勿自行拆卸??! ⑤ 注意二氧化碳培養(yǎng)箱的工作電壓,尤其是原裝進口設備?。?㈡ 低溫儀器、設備,⒈ 電冰箱

64、 電冰箱是最常用的保鮮設備,但使用中經(jīng)常會出現(xiàn)使用錯誤,須注意:,,⑴ 使用電冰箱前,應詳細閱讀說明書。必須按照本手冊中的安裝說明進行正確的安裝,并把它安放在合適的位置: 箱頂留 30 厘米以上,兩側留5厘米以上,后背留 10 厘米以上空間。開門留有轉動空間。 不要用拉拽電源線的方式拔掉冰箱的插頭。通常要抓牢插頭,然后直著從插座中拔出插頭,在移動冰箱時,注意不要讓冰箱扎過電源線以毀壞電源線。 新購買或搬運后的電冰箱

65、,應靜置2至6小時后再開機,以免油路故障。,,電冰箱的外壁有時可能會比較熱,特別是剛安裝好之后。不要驚慌。這是由于冷 凝管的原因,它把冰箱內的熱量抽出以防止電冰箱的外壁“出汗”。 使用前,先進行2至6小時空箱通電運行,如果制冷效果好,方可存放物品。電冰箱應安放在遠離熱源,不受陽光直射的地方,因工作時需要與外界進行熱交換,既通過冷凝器向外界散熱,外界環(huán)境溫度越高,散熱越慢,會使電冰箱和冰柜工作時間越長,增大耗電量,制冷

66、效果差, 易使冰箱零件受潮生銹。,,⑵ 當冰箱開始工作后,請不要觸摸冷凍室內冷凍的表面,特別是當您的手潮濕或濕的時候。皮膚會粘在這些冰冷的表面上。 意外情況下,當剛停機后不可立即啟動,需等待 5 分鐘以上,使冷凝管制冷劑回流, 防止冷凝管堵塞,以免燒壞壓縮機; 在大部分情況下,一個或兩個小時的停電不會影響冰箱的溫度。 但是,在停電期間您應該盡量減少打開電冰箱門的次數(shù)。在較長的停電時間里,放置一塊干冰在冷

67、凍室的頂層。,,⑶ 使用一段時間后,要定期對冰箱內部進行清洗,以免積存污物,滋生細菌。清洗前要切斷電源,用餐具清洗劑沖洗,洗后擦試干凈或晾干。 清洗或維修時,要將冰箱的插頭從插座上拔下來。千萬不要用濕手觸摸,這樣會觸電或受傷。 疏通并清除下水管污物。用茶葉或吸味劑放入箱內吸味。定期清除冷凝器和壓縮機表面的灰塵,以免不停機,不達溫??梢杂密浢⒒蛭鼔m器清理,不可用水噴淋沖洗,也不可加防塵蓋。

68、 電冰箱不要停機或長期放置,以免滋生細菌,導致變形,產(chǎn)生潤滑不良、腐蝕等缺陷,影響冰箱使用壽命。因特殊原因而停機應每周通電運行6至8小時。,,⑷ 壓縮機運轉過程中剛停機的一段時間內,從箱內傳出流水聲,是制冷劑流動聲,屬正?,F(xiàn)象。夏季壓縮機表面溫度較高,可達90℃,冷凝器可達60℃,屬正?,F(xiàn)象。放置在高濕度環(huán)境中,箱體表面會結露,屬正常,可用干布擦拭干凈。冷凍室不要放置液體、玻璃器皿,以防凍裂損壞。 具有揮發(fā)性

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