用于檢測水楊酸的熒光分子探針的設計與合成研究.pdf

1、水楊酸(salicylic acid，SA)是一種重要的信號分子，在植物生長和激發(fā)抗性的過程中都發(fā)揮著極其重要的作用。由于SA激發(fā)植物抗性的過程復雜，目前仍缺乏簡便有效的方法對內(nèi)源性SA進行實時的跟蹤監(jiān)測。熒光分子探針技術具有選擇性高、檢測極限低、實時檢測等特性，而且具備檢測內(nèi)源性小分子的能力，是研究SA調(diào)控機制的理想方法。
　　SA與Cu2+具有較好的親和作用，而且SA可以通過與Cu2+絡合的方式與蛋白進行結合。因此，我們試圖利

2、用含有Cu2+的絡合型探針來檢測SA。首先，設計對Cu2+具有較高親和作用的熒光團配體；然后，利用該配體與Cu2+形成穩(wěn)定的絡合型探針；最終，利用該絡合型探針對SA進行實時的跟蹤檢測。
　　基于上述思路，本論文以羅丹明 B為報告基團，通過環(huán)化和取代反應合成了一系列含雙酰肼(胺)及硫脲結構的熒光分子探針。通過對雙酰肼取代基的改造，探針3實現(xiàn)了通過調(diào)控其與 Cu2+的作用方式對 SA、S2-以及 Cu2+進行多功能檢測的目的。Cu2+

3、在不同識別過程中充當著不同的角色：在甲醇溶液中，Cu2+與探針3通過簡單混合后形成的組裝體對SA表現(xiàn)出明顯的熒光選擇性，加入SA后體系熒光增強倍數(shù)(約15倍)為其他競爭離子的5倍；在乙腈溶液中，探針3與Cu2+形成的絡合型探針3-Cu對S2-表現(xiàn)出良好的熒光選擇性，加入S2-后體系由紫色變?yōu)闊o色，熒光強度被猝滅約20倍；且該絡合型探針具有較好的重復使用性，通過反復加入Cu2+，探針重復使用4次后依然對S2-表現(xiàn)出較好的識別效果。而在甲醇

4、與乙腈的混合溶劑中，Cu2+能夠促使探針3分解為羅丹明B，體系熒光增強達400倍以上且具有良好的裸眼識別效果，此外，探針3對Cu2+的檢測極限達3 nM，且對濃度為1-10?M的Cu2+具有定量檢測功能，表明探針3對Cu2+具有良好的熒光選擇性和靈敏性。
　　通過對探針3進行結構優(yōu)化，探針4在保持了對SA、S2-以及Cu2+具備多功能選擇性的同時，其檢測靈敏度較探針3也有了明顯的提高。探針4對 Cu2+的檢測極限仍能達到4 nM，