用于檢測(cè)水楊酸的熒光分子探針的設(shè)計(jì)與合成研究.pdf

1、水楊酸(salicylic acid，SA)是一種重要的信號(hào)分子，在植物生長(zhǎng)和激發(fā)抗性的過(guò)程中都發(fā)揮著極其重要的作用。由于SA激發(fā)植物抗性的過(guò)程復(fù)雜，目前仍缺乏簡(jiǎn)便有效的方法對(duì)內(nèi)源性SA進(jìn)行實(shí)時(shí)的跟蹤監(jiān)測(cè)。熒光分子探針技術(shù)具有選擇性高、檢測(cè)極限低、實(shí)時(shí)檢測(cè)等特性，而且具備檢測(cè)內(nèi)源性小分子的能力，是研究SA調(diào)控機(jī)制的理想方法。
　　SA與Cu2+具有較好的親和作用，而且SA可以通過(guò)與Cu2+絡(luò)合的方式與蛋白進(jìn)行結(jié)合。因此，我們?cè)噲D利

2、用含有Cu2+的絡(luò)合型探針來(lái)檢測(cè)SA。首先，設(shè)計(jì)對(duì)Cu2+具有較高親和作用的熒光團(tuán)配體；然后，利用該配體與Cu2+形成穩(wěn)定的絡(luò)合型探針；最終，利用該絡(luò)合型探針對(duì)SA進(jìn)行實(shí)時(shí)的跟蹤檢測(cè)。
　　基于上述思路，本論文以羅丹明 B為報(bào)告基團(tuán)，通過(guò)環(huán)化和取代反應(yīng)合成了一系列含雙酰肼(胺)及硫脲結(jié)構(gòu)的熒光分子探針。通過(guò)對(duì)雙酰肼取代基的改造，探針3實(shí)現(xiàn)了通過(guò)調(diào)控其與 Cu2+的作用方式對(duì) SA、S2-以及 Cu2+進(jìn)行多功能檢測(cè)的目的。Cu2+

3、在不同識(shí)別過(guò)程中充當(dāng)著不同的角色：在甲醇溶液中，Cu2+與探針3通過(guò)簡(jiǎn)單混合后形成的組裝體對(duì)SA表現(xiàn)出明顯的熒光選擇性，加入SA后體系熒光增強(qiáng)倍數(shù)(約15倍)為其他競(jìng)爭(zhēng)離子的5倍；在乙腈溶液中，探針3與Cu2+形成的絡(luò)合型探針3-Cu對(duì)S2-表現(xiàn)出良好的熒光選擇性，加入S2-后體系由紫色變?yōu)闊o(wú)色，熒光強(qiáng)度被猝滅約20倍；且該絡(luò)合型探針具有較好的重復(fù)使用性，通過(guò)反復(fù)加入Cu2+，探針重復(fù)使用4次后依然對(duì)S2-表現(xiàn)出較好的識(shí)別效果。而在甲醇

4、與乙腈的混合溶劑中，Cu2+能夠促使探針3分解為羅丹明B，體系熒光增強(qiáng)達(dá)400倍以上且具有良好的裸眼識(shí)別效果，此外，探針3對(duì)Cu2+的檢測(cè)極限達(dá)3 nM，且對(duì)濃度為1-10?M的Cu2+具有定量檢測(cè)功能，表明探針3對(duì)Cu2+具有良好的熒光選擇性和靈敏性。
　　通過(guò)對(duì)探針3進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，探針4在保持了對(duì)SA、S2-以及Cu2+具備多功能選擇性的同時(shí)，其檢測(cè)靈敏度較探針3也有了明顯的提高。探針4對(duì) Cu2+的檢測(cè)極限仍能達(dá)到4 nM，