幾種環(huán)境因子及藥物殘留對刺參體內(nèi)活性氧產(chǎn)生的影響研究.pdf

1、由于缺乏獲得性免疫，仿刺參等棘皮動物主要依靠天然免疫進行自身防御，保護宿主免受非己物質(zhì)如病菌、真菌和異物的侵害。仿刺參免疫系統(tǒng)中，體腔細胞的吞噬作用具有重要意義。而吞噬作用的關(guān)鍵就是吞噬過程中所分泌的相關(guān)溶酶體酶和活性氧類物質(zhì)；活性氧在消除非己物質(zhì)如病菌、真菌和大顆粒物質(zhì)時發(fā)揮舉足輕重的作用。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴利用化學發(fā)光法，研究了酵母體外誘導(dǎo)仿刺參體腔細胞產(chǎn)生活性氧類物質(zhì)的過程。實驗確定了仿刺參體腔細胞化學發(fā)光的最優(yōu)反

2、應(yīng)體系：體腔細胞濃度在106/mL時，酵母終濃度為0.5mg/mL，魯米諾終濃度為2.5×10-4 mol/L。實驗數(shù)據(jù)顯示，檢測溫度對體腔細胞的影響比較大，理想檢測溫度在17℃左右。刺參注射脂多糖后，體腔細胞體外吞噬酵母時活性氧的產(chǎn)生先升高，在第9h達到峰值，然后降低。⑵研究了環(huán)境因子溫度，鹽度和pH對仿刺參體腔細胞吞噬過程中活性氧產(chǎn)生的影響。不同環(huán)境條件處理暫養(yǎng)一周的仿刺參，于不同時間點抽取體腔液，然后用魯米諾化學發(fā)光法檢測仿刺參體

3、腔細胞體外吞噬酵母細胞時活性氧的產(chǎn)生。結(jié)果表明與對照組相比（17℃），6℃和26℃水溫中的仿刺參分別從第1 d和第15 d極大地增加了活性氧的產(chǎn)生。鹽度25和鹽度35兩組海參體腔細胞比對照組吞噬過程產(chǎn)生更多的活性氧，而鹽度16和40兩組第1 d時活性氧的產(chǎn)生也顯著增強。較低pH同樣極大增強了吞噬作用中活性氧的產(chǎn)生。結(jié)果表明，溫度、鹽度和pH均可影響仿刺參體腔細胞吞噬過程中活性氧的產(chǎn)生。本文為進一步研究仿刺參在適應(yīng)不同環(huán)境時的生理生化過程

4、及無脊椎動物免疫機制奠定了基礎(chǔ)。⑶設(shè)置仿刺參3組，分別連續(xù)3天注射呋喃唑酮、氯霉素和紅霉素，于不同時間抽取仿刺參體腔液，用魯米諾化學發(fā)光法檢測體腔細胞經(jīng)酵母誘導(dǎo)后的化學發(fā)光現(xiàn)象。結(jié)果顯示，整個實驗過程中，靜息狀態(tài)下，呋喃唑酮和紅霉素均抑制了體腔細胞活性氧的產(chǎn)生。注射紅霉素組，仿刺參體腔細胞經(jīng)酵母誘導(dǎo)的化學發(fā)光現(xiàn)象均有所增強，且最大值出現(xiàn)在第15天。注射呋喃唑酮后，仿刺參體腔細胞吞噬過程活性氧的產(chǎn)生先增強，隨后在第七天時發(fā)光值低于對照組，