膠束體系中葡萄糖氧化酶結(jié)構(gòu)的去折疊路徑及恢復(fù)性的研究.pdf

1、在生物體的功能膜蛋白、包涵體蛋白的純化、復(fù)性和活性穩(wěn)定等問題的研究中,表面活性劑是最常用的試劑之一。
　　當(dāng)表面活性劑與活性蛋白相互作用時,常常引起活性蛋白二級、三級結(jié)構(gòu)的變化。當(dāng)活性蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生不可逆的改變時,其功能完全或部分喪失。
　　為了揭示表面活性劑如何解構(gòu)活性蛋白以及解構(gòu)活性蛋白構(gòu)象可恢復(fù)性與解構(gòu)的方式有何關(guān)系,本論文采用了紫外吸收光譜法、內(nèi)源熒光光譜法、圓二色譜法、等溫滴定量熱法四種方法,選取了常見的三種陰離子

2、表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)、正辛烷基硫酸鈉(SOS)、辛酸鈉(SO)和一種陽離子表面活性劑十六烷基三甲基溴化銨(CTAB),在(pH3.920 mM)NaAc-Hac buffer和(pH5.920 mM)Na2HPO4-NaH2PO4 buffer兩種緩沖體系中,研究了表面活性劑對葡萄糖氧化酶結(jié)構(gòu)的去折疊路徑及恢復(fù)性。
　　實驗結(jié)果表明:GOD結(jié)構(gòu)中的FAD結(jié)構(gòu)是GOD的活性存在的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),FAD結(jié)構(gòu)的丟失會導(dǎo)致GOD活

3、性的喪失;陰離子表面活性劑與GOD相互作用去折疊GOD時,靜電作用是非常重要的影響因素,而陽離子表面活性劑與GOD相互作用的過程中,靜電作用力可能不是主要的作用;陰離子表面活性劑的非極性碳氫鏈尾部對GOD結(jié)構(gòu)的去折疊及恢復(fù)性的影響是非常重要的因素,碳氫鏈與GOD結(jié)合的作用力的強弱隨著碳氫鏈的長短而變化,碳氫鏈越長,作用力越大;無論是陰離子表面活性劑還是陽離子表面活性劑,表面活性劑的極性頭基對GOD結(jié)構(gòu)的去折疊及恢復(fù)性的影響是非常重要的因