末水壇紫菜多糖降解物降脂減肥作用的研究及其復合沖劑的研制.pdf

1、末水壇紫菜，通常指六水紫菜，雖然色澤差，口感粗糙，但其含有大量多糖（20.67％）、蛋白質和礦物元素等營養(yǎng)物質，具有很高開發(fā)利用價值。相關研究表明，壇紫菜及其多糖具有增強免疫力、抗腫瘤、抗衰老、降低血清膽固醇等作用。然而，末水壇紫菜多糖的降脂減肥作用研究目前未見報道。本文對末水壇紫菜多糖進行適度降解，研究多糖降解物的體外降脂效果，然后將多糖降解物與山楂黃酮和絞股藍皂苷進行復配，通過體外高脂細胞模型和體內動物實驗探討三者構成的復合物降脂減

2、肥協(xié)同效應，并優(yōu)化復合物的配方；將復合物制備成沖劑并進行毒性評價。最終，研制開發(fā)出安全有效的降脂減肥沖劑。具體內容如下：
　?。?）多糖降解物的制備：采取水提醇沉法提取多糖，經除蛋白、透析等獲得末水壇紫菜多糖（PHP）。①超聲波法制備多糖降解物：以α-淀粉酶和胰脂肪酶抑制率為考察指標，PHP濃度、超聲功率、超聲處理時間為因素進行正交試驗優(yōu)化降解條件。結果表明，PHP濃度9.0mg/mL、超聲功率800w、超聲處理1.0h時、制備的

3、超聲多糖降解物（UDP）對ɑ-淀粉酶和胰脂肪酶的抑制活性最高，其半數(shù)抑制濃度IC50值分別為15.65mg/mL和16.08mg/mL，遠低于未降解多糖（PHP）的47.63mg/mL和66.21mg/mL。②化學法制備多糖降解物：采用實驗室前期建立的條件，即利用過氧化氫（H2O2）和維生素C（VC）體系產生的羥自由基（·OH）對PHP進行化學降解，通過超濾得到分子量為10KD-50KD多糖溶液，冷凍干燥得化學多糖降解物（CDP）。

4、r>　　（2）多糖降解物、山楂黃酮、絞股藍皂苷及其復合物體外降脂活性研究和復方優(yōu)化：以含1%BSA、1.5mmol/L油酸的DMEM培養(yǎng)基孵育HepG2細胞24h后，建立體外高脂細胞模型，以脂質清除率為指標評價多糖降解物、山楂黃酮、絞股藍皂苷的體外降脂功效，繼而利用響應面法對三者的復合物配方進行優(yōu)化。結果表明：UDP和CDP體外均具有較好的降脂效果，當兩者濃度為200μg/mL時，脂質清除率分別達到50.78%和51.21%；而山楂黃酮

5、和絞股藍皂苷亦顯示了良好的體外降脂作用，當濃度分別為200μg/mL和90μg/mL時，脂質清除率分別達51.19%和50.22%；響應面實驗結果分析發(fā)現(xiàn)：當UDP、山楂黃酮、絞股藍皂苷分別以濃度194.39μg/mL、216.24μg/mL、91.27μg/mL組合成復合物（CTC）時，在相同用藥體積下脂質清除作用最強，脂質清除率高達72.92%，具有較好的協(xié)同降脂效應。
　?。?）不同藥物體內降脂減肥作用的研究：高脂肥胖大鼠模

6、型建立后分組，其中各給藥組灌胃給予不同藥物治療，高脂肥胖模型對照組給予等量生理鹽水。給藥四周后實驗大鼠眼眶取血、解剖，分析相關生化指標。結果表明：與模型對照組相比，不同藥物組均顯著抑制高脂肥胖大鼠攝食量（P<0.01），降低大鼠體重（P<0.01）和脂肪指數(shù)；大鼠血清TC、TG、LDL-C水平明顯降低，HDL-C含量升高，其中以復合物中劑量（M-CTC）和UDP中劑量組效果最佳（P<0.01）；同時，不同藥物亦可不同程度降低谷草轉氨酶（

7、AST）活性，提高脂蛋白脂酶（LPL）、肝脂酶（HL）酶活，并對肝臟損傷具有一定的修復作用。表明多糖降解物及其與中藥成分組成的復合物具有良好的降脂、減肥、保肝作用，該實驗結果與體外實驗一致。
　?。?）復合降脂減肥沖劑的制備及其毒性評價：以經脫腥脫色處理后、粉碎過200目篩的末水壇紫菜為主料，與UDP、山楂黃酮、絞股藍皂苷構成紫菜復合物，利用添加脫脂奶粉和木糖醇以調整營養(yǎng)和風味，通過單因素實驗探討黃原膠、羧甲基纖維素鈉、微晶纖維素

8、對沖劑感官的影響。最后利用正交實驗確定了復合降脂減肥沖劑的最佳工藝配方為：以10g粉為單位，其中紫菜復合物4.0g、脫脂奶粉4.0g、木糖醇2.0g，另添加黃原膠0.08g，CMC－Na0.015g，微晶纖維素0.02g。由此配方組合所得沖劑風味、感官評價最佳。毒理學實驗結果顯示，復合降脂減肥沖劑屬于實際無毒級，其LD50>10g/kg。
　　綜上所述，UDP、山楂黃酮、絞股藍皂苷組合存在協(xié)同效應，其復合物具備良好的降脂減肥活性。