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文檔簡介
1、1.研究目的:
從抗氧化酶學、組織學和超微結構三個層面來揭示20周規(guī)律有氧運動對中老年大鼠動脈管壁結構及抗氧化能力的影響,同時對20周規(guī)律有氧運動延緩血管的效果做出評價。
2.研究方法:
30只18月齡健康雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,由湖南農業(yè)大學實驗學部提供。隨機分成2組:中老年對照組,中老年遞增強度有氧運動組,每組15只;另設:年輕對照組,6月齡年輕SD大鼠,共15只。按國
2、家實驗動物飼養(yǎng)標準分籠飼養(yǎng)。
采用遞增負荷跑臺運動,應用血乳酸指標監(jiān)控運動強度,制定中老年大鼠遞增負荷強度有氧運動方案。乳酸閾測試方案:采用割尾取血的方法,以乳酸--功率曲線為原理,參考馮美云乳酸閾測定的跑臺遞增負荷方法進行測定。起始負荷為15m/min,持續(xù)時間為2-3min,遞增幅度為3m/min,間歇時間為30S。
大鼠運動方案:第一階段:環(huán)境適應,不訓練:第二階段:適應跑臺訓練;第三階段:每天以規(guī)定的
3、強度進行遞增負荷有氧運動。具體如下:第一周速度為15m/min運動,每次時間為15min;之后按照單周增加速度雙周增加時間的原則依次進行遞增,遞增的時間幅度為:5min/week:遞增的速度幅度為1m/min/week。每周訓練6天,星期天休息。共運動20周。
運動期滿后,運動方案結束后12h,稱量體重并記錄后,用0.4%水合氯醛1ml/100g體重麻醉,將大鼠呈仰臥位固定于解剖桌上,眼眶取血后,解剖大鼠暴露胸腔,將抽取的
4、血液用低溫離心機在4℃,以2500r/min離心10分鐘,離心好的血液留取上清液,棄下面沉淀不用。取血結束后,取大鼠胸主動脈段,用于晚期氧化蛋白產物(Aopps)的檢測及形態(tài)結構的檢測。通過分光光度計法進行SOD、NO和GSH-Px活性的檢測,使用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(Elisa)對Aopps的含量進行檢測,采用光鏡和電鏡的手段進行動脈管壁的組織學和超微結構的檢測。
3.研究結果:
3.1血乳酸測試結
5、果
從安靜狀態(tài)到運動強度為24m/min時血乳酸值變化幅度不大,處于一個相對恒定的變化中。當速度大于24m/mim時,血乳酸值增大,表明為糖酵解。因此大鼠運動強度不高于24m/min。
3.2規(guī)律有氧運動對大鼠抗氧化酶及晚期氧化蛋白產物檢測
(1)中老年對照組和中老年運動組動脈勻漿Aopps含量均高于年輕對照組,且具有非常顯著性差異(P<0.01),中老年運動組Aopps含量低于中老年對照組,且
6、具有非常顯著性差異(P<0.01)。
(2)中老年運動組和中老年對照組大鼠血漿SOD活性均低于年輕對照組,中老年對照組大鼠與年輕對照組大鼠SOD活性具有非常顯著性差異(P<0.01);中老年運動組大鼠與中老年對照組大鼠SOD活性具有顯著性差異(P<0.05)。
(3)中老年運動組和中老年對照組大鼠血漿GSH-Px活性均低于年輕對照組,中老年對照組大鼠與年輕對照組大鼠GSH-Px活性具有非常顯著性差異(P<0.
7、01);中老年運動組GSH-Px活性高于中老年對照,中老年運動組大鼠與中老年對照組大鼠GSH-Px活性具有顯著性差異(P<0.05)。
(4)中老年運動組和中老年對照組血漿NO含量均低于年輕對照組,其中中老年對照組與年輕對照組NO含量具有非常顯著性差異(P<0.01),中老年運動組與年輕對照組NO含量具有顯著性差異(P<0.05);中老年運動組NO含量高于中老年對照組,且具有非常顯著性差異(P<0.01)。
8、3.3大鼠主動脈HE染色結果
與年輕對照組比較,中老年對照組內徑(d)、外徑(D)和動脈壁厚(ADT)均呈非常顯著性增加(P<0.01),中老年運動組d和D呈顯著性增加(P<0.05),ADT呈非常顯著性增加(P<0.01);與中老年對照組比較,中老年運動組d、D和ADT呈非常顯著性減少(P<0.01)。
3.4大鼠血管彈力纖維EVG染色結果
年輕對照組大鼠彈力纖維膜染色較深且均勻,膜結構完整,
9、波浪狀折疊豐富,折疊幅度大,甚至呈“卷發(fā)狀”;中老年對照組大鼠彈力纖維膜染色較淺且變薄,甚至出現斷裂,只有非常稀疏的折疊,且折疊數量和幅度非常?。恢欣夏赀\動組大鼠彈力纖維膜染色較深,波浪狀折疊的數量和幅度有所增加;
3.5大鼠主動脈膠原纖維免疫組織化學染色觀察結果
與年輕對照組比較,中老年對照組陽性表達呈非常顯著性增加(P<0.01),中老年運動組陽性表達呈顯著性增加(P<0.05);與中老年對照組比較,中老
10、年運動組陽性表達呈非常顯著性減少(P<0.01)。
3.6大鼠主動脈電鏡觀察結果
年輕對照組未看到主動脈腔內任何異常病變;中老年對照組局部漿泡壞死形成空泡,嚴重處呈粘液稠狀,整個管壁內彈力纖維斷裂,膠原纖維明顯增多并排列紊亂:中老年運動組內皮細胞損害較輕微,彈性纖維排列也較有規(guī)律。
4.結論:
4.120周規(guī)律有氧運動能提高中老年大鼠抗氧化酶活性;
4.220周規(guī)律有
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