菝葜抗炎活性成分的譜效關(guān)系研究.pdf

1、菝葜又名金剛藤，其藥用部位為百合科植物菝葜Smilax China L.的干燥根莖，收載于2015版《中國藥典》一部，具有利濕去濁、祛風(fēng)除痹，解毒散瘀的功效,用于小便淋濁，帶下量多，風(fēng)濕痹痛，疔瘡癰腫等癥。目前菝葜臨床上主要用于治療盆腔炎、附件炎、包塊等婦科疾病。
　　中藥譜效學(xué)是在中醫(yī)藥理論現(xiàn)代研究的基礎(chǔ)上,以中藥指紋圖譜為基礎(chǔ)，以效應(yīng)及效應(yīng)體學(xué)為主要內(nèi)容，應(yīng)用生物信息學(xué)方法，建立中藥指紋圖譜與中藥質(zhì)量療效內(nèi)在關(guān)系的一門學(xué)科。課

2、題組前期研究確定了菝葜抗炎有效部位群及12個(gè)抗炎活性成分。由于菝葜所含成分眾多，還有哪些成分具有抗炎活性目前還不清楚。因此，本論文在前期研究基礎(chǔ)上，釆用譜效關(guān)系研究的思路，以不同產(chǎn)地的菝葜藥材乙醇提取物為研究對(duì)象，開展化學(xué)指紋圖譜、生物活性及基于“譜效關(guān)系”的有效物質(zhì)辨識(shí)研究，為完善菝葜藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)及進(jìn)一步詮釋其抗炎活性的物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)。
　　本論文主要完成了以下研究工作：
　　1、菝葜指紋圖譜研究
　　收集了全

3、國10個(gè)不同產(chǎn)地的菝葜藥材，采用UPLC-DAD法建立菝葜指紋圖譜。結(jié)果顯示，10批菝葜藥材乙醇提取物的化學(xué)成分存在較大差異。從DAD指紋圖譜中選取45個(gè)峰，在10批菝葜藥材中這些峰的峰面積存在明顯的差別，表明可以采用這些菝葜藥材制備差異提取物進(jìn)行譜效研究。2、體內(nèi)抗炎活性研究
　　采用二甲苯致炎小鼠耳腫脹模型觀察菝葜差異提取物的抗急性炎癥效果，以耳腫脹度及腫脹率為評(píng)價(jià)指標(biāo)。結(jié)果顯示，除來自于河南的樣品（S4）外，其他9個(gè)樣品與模

4、型組比較均能顯著降低實(shí)驗(yàn)小鼠的耳腫脹率，且抗炎活性存在較大差異。
　　采用機(jī)械損傷合并大腸桿菌菌液注入法制備大鼠慢性盆腔炎（CPID）動(dòng)物模型，觀察菝葜差異提取物的抗CPID的效果。以血清中SOD、MDA、IL-6、TNF-α為評(píng)價(jià)指標(biāo)。結(jié)果顯示，不同產(chǎn)地菝葜提取物對(duì)各個(gè)血清指標(biāo)的作用不同。
　　3.體外抗炎活性研究
　　采用LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞產(chǎn)生炎癥模型，檢測(cè)IL-6、TNF-α2個(gè)炎癥因子，對(duì)差異提取物

5、進(jìn)行體外抗炎活性的研究，考察體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否具有一致性，以期為譜效關(guān)系研究思路提供參考。結(jié)果顯示，體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)對(duì)IL-6的作用結(jié)果一致；對(duì)TNF-α的作用，有7個(gè)產(chǎn)地藥材體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。提示進(jìn)行譜效關(guān)系研究時(shí)，采用體外實(shí)驗(yàn)代替體內(nèi)實(shí)驗(yàn)有一定的可能性，但還需要進(jìn)行更多對(duì)比試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。
　　4、菝葜抗炎作用譜效關(guān)系分析
　　在菝葜指紋圖譜和體內(nèi)抗炎活性藥理數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，采用灰色關(guān)聯(lián)分析方法對(duì)菝葜藥材差異提取物指紋圖譜的