短柱肖菝葜化學(xué)成分及質(zhì)量控制研究.pdf

1、短柱肖菝葜為百合科肖菝葜屬短柱肖菝葜(Heterosmilax yunnanensis Gagnep．)的干燥根莖。具有清熱、除濕、解毒、通利關(guān)節(jié)之功能，臨床用于濕熱淋濁，帶下，癰腫，瘰癘，疥癬，梅毒，筋骨攣痛，以及鉤端螺旋體病。短柱肖菝葜的化學(xué)成分研究未見(jiàn)報(bào)道。本研究的初步活性篩選試驗(yàn)結(jié)果表明，短柱肖菝葜具有較好的抗腫瘤作用。本課題以短柱肖菝葜為研究對(duì)象，對(duì)其化學(xué)成分和質(zhì)量控制進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，同時(shí)還對(duì)其抗腫瘤活性進(jìn)行了探討，從而

2、為其臨床應(yīng)用和進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)提供了物質(zhì)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。主要包括以下幾方面內(nèi)容： 1 利用多種色譜技術(shù)對(duì)短柱肖菝葜根莖的化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)的提取、分離，并利用現(xiàn)代光譜、波譜技術(shù)對(duì)提取分離得到的化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。從中分離得到了31個(gè)化合物，鑒定了29個(gè)，其中黃酮類成分8個(gè)：大豆素(1)，甘草素(2)，橙皮苷(3)，芒果苷(4)，3-0-β-D-吡喃葡萄糖-l，3，6，7-四羥基一口山酮苷(5)*，7-0-甲基芒果苷(6)，4

3、-C-β-D-吡喃葡萄糖-l，3，6-三羥基-7-甲氧基口山酮苷(7)，2一0-α-L-鼠李吡喃糖基-5-C-β-D-葡萄吡喃糖基-4，6-二羥基一苯基一對(duì)羥基苯酮(8)*；酚苷類成分4個(gè)：3，5-二甲氧基-4-羥基-苯甲酸-0-葡萄糖苷(9)，4-羥基苯甲酸葡萄糖苷(10)，3，5-二甲氧基-4-羥基-1-0-葡萄糖苷(11)，丁香酸葡萄糖苷(12)；三萜及甾醇類成分4個(gè)：熊果酸(13)，β-谷甾醇(14)，胡蘿卜苷(15)，β-谷甾

4、醇酯-3β-毗喃葡萄糖苷-6'-0-棕櫚酸酯(16)；葸醌類成分1個(gè)：大黃酚(17)；香豆素類成分1個(gè)：佛手內(nèi)酯(18)；醇、酸及酯類成分8個(gè)：十八烷酸(19)，十六烷酸(20)，十四烷酸(21)，二十六烷酸(22)，四十六烷醇(23)，二十八烷醇(24)，二(2-乙基己基)鄰苯二甲酸酯(25)，單棕櫚酸甘油酯(26)；其它類成分3個(gè)：5-羥甲基糠醛(27)，正丁基-β-D-吡喃果糖苷(28)，1-0-[β-D木糖(1→6)-β-D-葡

5、萄糖(1→)乙酸甲酯(29)*。這些化合物中，5、8、29為新化合物，除14，15，19，20，26外，其余化合物均為首次從該屬植物中分離得到，所有化合物均為首次從該種植物中分離得到。 2 對(duì)短柱肖菝葜藥材進(jìn)行了質(zhì)量控制研究。其內(nèi)容主要有：定性部分：性狀，顯微和薄層色譜鑒別；定量部分：采用紫外一可見(jiàn)分光光度法，對(duì)該藥材中的總黃酮進(jìn)行了定量分析；采用RP—HPLC法，分別以芒果苷和丁香酸葡萄糖苷為指標(biāo)，對(duì)本藥材中的芒果苷和丁香酸葡

6、萄糖苷又進(jìn)行了含量測(cè)定；在上述工作的基礎(chǔ)上，起草了短柱肖菝葜藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(草案)。初步建立了短柱肖菝葜藥材的HPLC指紋圖譜條件，利用HPLC保留時(shí)間和LC—MS法對(duì)部分特征峰進(jìn)行了指認(rèn)，并利用所建立的指紋圖譜對(duì)肖菝葜屬不同來(lái)源藥材及同一產(chǎn)地不同采集時(shí)間的短柱肖菝葜藥材進(jìn)行了初步區(qū)分。 3 對(duì)短柱肖菝葜的藥理活性進(jìn)行了初步研究。首先以小鼠H22肝癌、小鼠Lewis肺癌和小鼠S180肉瘤三個(gè)腫瘤模型，對(duì)其正丁醇提取物進(jìn)行了體內(nèi)抗

7、腫瘤實(shí)驗(yàn)；繼而，又用人肺癌細(xì)胞A-549、人結(jié)腸癌細(xì)胞。HCT-8、人肝癌細(xì)胞BEL-7402、人白血病細(xì)胞U-937四個(gè)腫瘤細(xì)胞，對(duì)從正丁醇部位分離得到的13個(gè)單體化合物進(jìn)行了體外抗腫瘤細(xì)胞篩選。上述結(jié)果表明：短柱肖菝葜正丁醇提取物對(duì)所選腫瘤模型均具有比較顯著的抑制腫瘤作用；部分化合物表現(xiàn)出對(duì)所選的腫瘤細(xì)胞具有較好的體外抑制活性。為今后的研究開(kāi)發(fā)奠定了較好的基礎(chǔ)。綜上，通過(guò)對(duì)短柱肖菝葜藥材上述較為系統(tǒng)的研究，獲知了其部分物質(zhì)基礎(chǔ)，進(jìn)一