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文檔簡介
1、背景與目的:
肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,簡稱KPN)是導致醫(yī)院內感染的常見病原菌,可引起呼吸道、消化道和泌尿系統(tǒng)感染。根據2013年中國CHINET細菌耐藥性監(jiān)測報道,在腸桿菌科細菌中克雷伯菌屬耐藥性較上年有所增多,且在對碳青霉烯類耐藥株中,以肺炎克雷伯菌為最多,其對亞胺培南和美洛培南的耐藥率均>10.0%。KPN容易產生生物膜(biofilm,BF),將細菌層層包裹,增加該菌對抗菌藥物的耐受性
2、。隨著對生物被膜研究的深入,發(fā)現(xiàn)KPN對抗生素的耐藥性與生物膜形成密切有關。生物膜的主要組成物質是多糖蛋白復合物,國內外研究表明,喹諾酮類藥物與大環(huán)內酯類藥物聯(lián)合使用可以有效抑制細菌合成多糖蛋白復合物,從而抑制生物膜的形成。綠原酸(Chlorogenic acid,簡稱CA)是中藥有效成分,由金銀花等中草藥提取。有資料顯示綠原酸可以抑制銅綠假單胞菌的生物膜形成,但綠原酸對同樣容易產生生物膜的KPN抑制作用如何則鮮有報道。
本研
3、究擬先對某醫(yī)院肺炎克雷伯菌臨床分布及耐藥情況進行分析,同時檢測形成BF肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型,再通過體外實驗,探討綠原酸對KPN生物膜的影響及與左氧氟沙星(LEV)聯(lián)合對KPN的作用。為臨床制定合理科學的抗菌治療策略提供依據。
方法:
收集廣州某三甲醫(yī)院臨床分離肺炎克雷伯菌62株,進行鑒定及藥敏分析,采用半定量結晶紫染色法進行生物膜陽性菌株篩選,同時采用PCR法對這類菌株進行ESBLs基因型檢測、并構建生物膜
4、模型及進行藥物干擾研究。
結果:
共分離鑒定出62株肺炎克雷伯菌株,其中33株菌生物膜檢測陽性,占53.2%(33/62)。產BF菌株中檢出超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)菌株24株,這24株ESBLs陽性菌株中SHV基因型的占54.17%(13/24),TEM基因型占41.67%(10/24),有4株同時存在SHV和TEM基因,未檢測出CTX-M基因。經體外建模及藥物干擾,單獨藥物組顯微鏡下黑色絮狀物(代表致密生物
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