郁證失眠的理論探討及三草安神方對(duì)抑郁癥失眠大鼠的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　查閱和整理與抑郁癥失眠相關(guān)的文獻(xiàn)，找出與抑郁癥失眠相似的疾病，并將這類疾病歸類為郁證失眠。依據(jù)郁證失眠的臨床癥狀、病因病機(jī)和其治法方藥，理清郁證與失眠的關(guān)系，探討從氣郁論治郁證失眠的理論基礎(chǔ)。構(gòu)建抑郁癥失眠動(dòng)物模型，觀察三草安神方治療抑郁癥失眠的作用及其對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)和相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)受體的影響。通過(guò)理論探討和實(shí)驗(yàn)研究為三草安神方的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1.理論探討：查閱和整理查閱相關(guān)文

2、獻(xiàn)系統(tǒng)查閱和整理與抑郁癥失眠相關(guān)的文獻(xiàn)，找出與抑郁癥失眠相似的疾病，并將這類疾病整理和歸類。從中醫(yī)理論理清郁證與失眠的關(guān)系，探討從氣郁論治郁證失眠的理論依據(jù)。
　　2.實(shí)驗(yàn)研究：選用SPF級(jí)SD雄性大鼠40只，通過(guò)慢性不可預(yù)見(jiàn)中等應(yīng)激法、孤養(yǎng)法和多平臺(tái)水環(huán)境睡眠剝奪法構(gòu)建抑郁癥失眠動(dòng)物模型，觀察慢性不可預(yù)見(jiàn)中等應(yīng)激法、孤養(yǎng)法和多平臺(tái)水環(huán)境睡眠剝奪法三種造模方法對(duì)大鼠體質(zhì)量和行為學(xué)的影響；各組分別灌胃給藥14D后，通過(guò)Morris水

3、迷宮法檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，應(yīng)用自發(fā)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)視頻分析系統(tǒng)觀察大鼠的自主活動(dòng)；用HE染色法對(duì)比空白組、模型組、西藥組和三草安神方組的大鼠神經(jīng)元；ELISA法檢測(cè)大鼠血清和腦皮質(zhì)中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺和去甲腎上腺素及氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量；Real Time-PCR法檢測(cè)大鼠下丘腦和海馬中5-羥色胺受體和γ-氨基丁酸受體的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.體質(zhì)量實(shí)驗(yàn)結(jié)果：造模期間，空白組大鼠體重呈緩慢上升的趨勢(shì)

4、，未造模時(shí)（T=0），造模組大鼠體質(zhì)量與空白組大鼠體質(zhì)量比較沒(méi)有差異性（P>0.05），造模后（T>0），造模組大鼠體重較未造模時(shí)發(fā)生改變并有緩慢增高的趨勢(shì)，此后造模組大鼠體重逐漸趨于平穩(wěn)，從第7D開(kāi)始造模組大鼠體重與空白組大鼠體重比較具有差異性（P<0.01）。到第28D和第35D，與空白組比較，模型組大鼠體重顯著低于正常組（P<0.01），與模型組比較，西藥組和三草安神方組大鼠體重均顯著上升（P<0.01,P<0.05）。
　

5、　蔗糖偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果：未造模時(shí)（T=0），空白組大鼠蔗糖偏好與造模組大鼠蔗糖偏好比較無(wú)明顯差異（P>0.05）,造模后的第7D，造模組大鼠蔗糖偏好低于正常組大鼠蔗糖偏好（P<0.05），此后造模組大鼠蔗糖偏好明顯持續(xù)低于正常組大鼠蔗糖偏好（P<0.01）。給藥7D（第28D）和給藥14D（第35D）后，與模型組比較，西藥組和三草安神方組大鼠蔗糖偏好均得到提升（P<0.01,P<0.05）。
　　2.Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果：與空白

6、組比較，模型組大鼠找到平臺(tái)所耗時(shí)間和游泳總路程有所增加（P<0.01），與模型組比較，西藥組及三草安神方組大鼠找到平臺(tái)所耗時(shí)間和游泳總路程有所減少(P<0.01， P<0.05），西藥組和三草安神方組大鼠穿越平臺(tái)次數(shù)和目標(biāo)象限時(shí)間均增加（P<0.01，P<0.05），西藥組和三草安神方組大鼠第1次抵原平臺(tái)時(shí)間亦有所縮短（P<0.01，P<0.05）。
　　自主活動(dòng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：與空白組比較，模型組大鼠活動(dòng)次數(shù)和活動(dòng)路程明顯低于空白組（

7、P<0.01）。與模型組比較，西藥組和三草安神方組大鼠活動(dòng)次數(shù)和活動(dòng)路程都有所提高（P<0.01，P<0.05）。
　　3.HE染色結(jié)果：神經(jīng)細(xì)胞核深染，空白組大鼠神經(jīng)元細(xì)胞排列規(guī)則，分布均勻較為飽滿;與空白組比較，模型組部分神經(jīng)元排列不整齊或者紊亂，部分神經(jīng)元數(shù)目減少并有細(xì)胞核固縮;與模型組相比，西藥組和三草安神方組神經(jīng)元細(xì)胞均明顯增加且排列較為規(guī)則。
　　4.ELISA檢測(cè)結(jié)果：與空白組比較，模型組大鼠血清和腦皮質(zhì)中5-

8、HT含量明顯降低（P<0.01），但模型組大鼠血清和腦皮質(zhì)中NE含量無(wú)明顯變化（P>0.05）。西藥組和三草安神方組在給予相應(yīng)的藥物后與模型組比較，其大鼠血清和腦皮質(zhì)中5-HT含量明顯升高（P<0.01）。與空白組比較，模型組大鼠血清和腦皮質(zhì)中 Glu和 GABA含量明顯升高(P<0.01），且Glu/GABA比值亦有升高（P<0.01）。與模型組比較，西藥組和三草安神方組大鼠血清和腦皮質(zhì)中Glu和GABA含量都有所降低（P<0.01，

9、P<0.05），且Glu/GABA比值亦有降低（P<0.01）。
　　5.Real Time-PCR檢測(cè)結(jié)果：與空白組比較，模型組大鼠下丘腦中和海馬中5-HT1AR mRNA表達(dá)水平明顯下降（P<0.01），而下丘腦和海馬中5-HT2ARmRNA表達(dá)明顯上升（P<0.01）。與模型組比較，西藥組和三草安神方組大鼠下丘腦和海馬中5-HT1ARmRNA表達(dá)都有所升高（P<0.01，P<0.05），下丘腦和海馬中5-HT2ARmRNA表

10、達(dá)都有所降低（P<0.01，P<0.05）。與空白組比較，模型組大鼠下丘腦和海馬GABAARα1和GABAARγ2mRNA表達(dá)水平明顯升高（P<0.01）。與模型組比較，西藥組和三草安神方組大鼠下丘腦和海馬中GABAARα1mRNA和GABAARγ2mRNA表達(dá)水平降低（P<0.01，P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.郁證與氣郁一樣都有廣義和狹義之分，氣郁的本質(zhì)是機(jī)體氣機(jī)紊亂，郁證失眠為氣機(jī)功能紊亂而導(dǎo)致的不寐，從氣郁論