SREBP-1及內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)蛋白在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的作用.pdf

1、目的：
　　大腸癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率呈上升趨勢。大腸腺瘤與大腸癌關(guān)系密切，約80％大腸癌由大腸腺瘤演變而來，其形成及癌變機制錯綜復雜，目前尚不明確。
　　脂類代謝異常在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用日益受到關(guān)注。脂質(zhì)代謝改變尤其是脂肪酸合成顯著增加是腫瘤細胞快速增殖的一個重要標志，不同于正常細胞直接利用循環(huán)中的脂肪酸，惡性腫瘤細胞生長增殖所需的脂肪酸主要來源于從頭合成途徑。固醇調(diào)節(jié)原件結(jié)合蛋白1(isterol re

2、gulatory element-binding proteins-1，SREBP-1)是調(diào)控脂肪酸從頭合成途徑（DNL）中的關(guān)鍵因子，直接影響脂肪酸從頭合成途徑中關(guān)鍵酶脂肪合酶（fatty acid synthase，F(xiàn)ASN）的生成。FASN是SREBP-1的下游靶基因，二者合稱為代謝原癌基因。研究發(fā)現(xiàn)在不同類型腫瘤的相對早期階段，脂肪酸合成通路就已開始上調(diào)并且SREBP-1在肺癌、乳腺癌、卵巢癌等腫瘤細胞中呈高表達，但在大腸癌中的

3、相關(guān)研究鮮見報道。SREBP-1的活性主要受 PI3K-Akt-mTOR通路調(diào)節(jié)，通路中的哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin complex， mTOR）及上游刺激因子1（upstream stimulatory factors1，USF1）對SREBP-1起重要調(diào)節(jié)作用：mTOR通過增加TSC1/2的表達及促進Akt在S473位點的磷酸化而上調(diào)SREBP-1表達；USF1其基本HLH結(jié)構(gòu)

4、域直接與SREBP-1的N-末端區(qū)域的HLH結(jié)構(gòu)域相互作用，從而也對SREBP-1的表達起到促進作用。
　　為探討脂肪酸的從頭合成途徑是否在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中發(fā)揮作用，本研究采用免疫組化方法檢測脂肪酸從頭合成途徑中的關(guān)鍵蛋白SREBP-1、p-mTOR、FASN及USF1的表達情況并對結(jié)果進行相關(guān)性分析，進一步揭示其在大腸腺瘤癌變中的意義，為大腸腺瘤癌變預防和臨床治療及預后提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1采

5、用免疫組織化學SP法檢測SREBP-1及內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)因子（p-mTOR、USF1、FASN）在40例正常大腸黏膜、112例不同程度異型增生大腸管狀腺瘤以及100例大腸管狀腺瘤癌變組織中的表達，分析其與臨床病理特征的關(guān)系，并進一步進行相關(guān)性分析。
　　2用SPSS21.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析，應用χ2檢驗、wilcoxon符號秩和檢驗和spearman相關(guān)性分析，P<0.05代表有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：
　　

6、1免疫組織化學結(jié)果
　　1.1 SREBP-1在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達情況
　　SREBP-1蛋白在正常大腸黏膜組、異型增生組和瘤癌變組中的陽性表達率分別為7.5%、37.5%、77.0%，其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組明顯高于腺瘤組（P<0.05）。SREBP-1蛋白在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組的陽性表達率分別為20.0%、35.0%、62.5%，依次升高（P<0.05）。

7、其中重度異型增生組高于輕、中度異型增生組（P<0.05），輕度及中度異型增生組間無差異（P>0.05）。
　　1.2 p-mTOR在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達情況
　　p-mTOR蛋白在正常大腸黏膜組、管狀腺瘤異型增生組和管狀腺瘤癌變組中的陽性表達率分別為5.0%、34.8%、87.0%，依次升高（P<0.05），其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組明顯高于腺瘤組（P<0.05）。p-mTOR

8、蛋白在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組中的陽性表達率分別為17.7%、35.0%、59.4%，依次升高（P<0.05），其中重度異型增生組高于輕、中度異型增生組（P<0.05），中度異型增生組高于輕度異性增生組（P<0.05）。
　　1.3 FASN在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達情況
　　FASN蛋白在正常大腸黏膜組、管狀腺瘤異型增生組和管狀腺瘤癌變組中的陽性表達率分別為10.0%、32.1%、85.0%，依次升高（

9、P<0.05），其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組明顯高于腺瘤組（P<0.05）。FASN蛋白在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組中的陽性表達率分別為12.5%、32.5%、56.3%，依次升高（P<0.05），其中重度異型增生組明顯高于輕、中度異型增生組（P<0.05），中度異型增生組高于輕度異性增生組（P<0.05）。
　　1.4 USF1在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達情況
　　USF1蛋

10、白在正常大腸黏膜組、異型增生管狀腺瘤組和管狀腺瘤癌變組中的陽性表達率分別為20.0%、47.3%、65.0%，依次升高（P<0.05），其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組高于腺瘤組（P<0.05）。USF1蛋白陽性表達率在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組依次升高（分別為20.0%、42.5%、87.5%），其中重度異型增生組明顯高于輕、中度異型增生組（P<0.05），中度異型增生組明顯高于輕度異型增生組（P<

11、0.05）。
　　2 SREBP-1及內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)蛋白（p-mTOR、FASN及USF1）與臨床病理特征關(guān)系
　　2.1 SREBP-1蛋白的表達與臨床病理特征關(guān)系
　　管狀腺瘤癌變組中SREBP-1蛋白陽性表達率與腫瘤分化程度相關(guān)，隨著分化程度的降低，SREBP-1蛋白陽性表達率依次升高（χ2=18.368， P<0.05）；與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期以及浸潤深度無相關(guān)性（P>0.

12、05）。
　　2.2 p-mTOR蛋白的表達與臨床病理特征關(guān)系
　　癌變組中p-mTOR蛋白陽性表達率與腫瘤分化程度、浸潤深度相關(guān)，隨著分化程度降低、浸潤深度增加， p-mTOR蛋白陽性表達率增高（χ2=6.917、χ2=7.078，均P<0.05）；而與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Dukes分期無相關(guān)性（P>0.05）。
　　2.3 FASN蛋白的表達與臨床病理特征關(guān)系
　　癌變組中FASN蛋白異常表

13、達率與分化程度，隨著分化程度降低， FASN蛋白異常表達率增高（χ2=10.080， P<0.05）；與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、Dukes分期、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性（P>0.05）。
　　2.4 USF1蛋白的表達與臨床病理特征關(guān)系
　　癌變組中USF1蛋白陽性表達率與分化程度，隨著分化程度降低， USF1蛋白陽性表達率增高（χ2=8.487， P<0.05）；而與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、Dukes分期、浸潤深度

14、和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性（P>0.05）。3 SREBP-1與內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)蛋白（p-mTOR、FASN及USF1）的相關(guān)性分析
　　結(jié)果顯示腺瘤組 SREBP-1與 p-mTOR、FASN、USF1呈正相關(guān)(r=0.247，r=0.494，r=0.397， P<0.05）；癌變組SREBP-1與p-mTOR、FASN、USF1呈正相關(guān)(r=0.213，r=0.702，r=0.247， P<0.05）。
　　結(jié)論：

15、　　1 SREBP-1蛋白表達隨著腺瘤異型增生程度的增高及癌變的出現(xiàn)，其陽性表達率明顯增高，并且與大腸癌分化程度有關(guān)，提示SREBP-1可能參與了散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變的發(fā)生發(fā)展。
　　2脂肪酸從頭合成相關(guān)因子（p-mTOR、FASN、USF1）在正常大腸粘膜、不同程度異型增生管狀腺瘤組和腺瘤癌變組中表達均依次升高，提示可能與大腸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
　　3 SREBP-1與脂肪酸從頭合成相關(guān)因子呈正相關(guān)，提示SREBP-1與