CyclinE、Survivin及HPV16-E6蛋白在宮頸上皮癌變過程中的表達及意義.pdf

1、目的：宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率僅次于乳腺癌。宮頸上皮內瘤變(CIN)發(fā)展至宮頸癌是一個復雜而漫長的過程，近年來宮頸上皮內瘤變及宮頸癌的發(fā)病率有上升趨勢，尤其是年輕宮頸癌的發(fā)病率明顯升高。國際癌癥研究中心(IARC)專題討論會(1995年)明確提出人乳頭瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的主要危險因素，分子機制研究表明，E6蛋白是HPV參與細胞惡性轉化的主要蛋白，E6通過與細胞周期調節(jié)因子p53結合發(fā)揮其致癌作用，但從發(fā)病機制上看

2、，宮頸癌的發(fā)生還需要其他多方面因素的參與，如細胞周期紊亂，細胞凋亡機制的抑制等，其中調節(jié)細胞周期的細胞周期蛋白E(CyclinE)與抑制細胞凋亡有關的Survivin是目前研究的熱點。本研究應用免疫組織化學和流式細胞技術的方法檢測CyclinE、Survivin和HPV16-E6蛋白在正常宮頸組織、慢性宮頸炎癥組織、CIN組織、宮頸癌組織中的表達情況，研究它們與宮頸癌年齡、臨床分期、組織分化程度等臨床病理特征之間的關系，探討三者在宮頸癌

3、發(fā)病中的協(xié)同作用，為宮頸癌的發(fā)生發(fā)展機制提供新的思路，為宮頸癌早期診斷提供理論依據，也為宮頸癌的早期防治提供新靶點。 方法 1.應用免疫組織化學(IHC)S-P法檢測10例正常宮頸標本、30例慢性宮頸炎標本、24例CIN和48例宮頸癌標本中CyclinE、Survivin和HPV16-E6蛋白的表達情況。 2.應用流式細胞分析技術(FCM)的方法定量檢測10例正常宮頸標本、12例慢性宮頸炎標本、15例CIN和25

4、例宮頸癌標本中CyclinE、Survivin、HPV16-E6的蛋白含量。 3.運用統(tǒng)計軟件SPSS 13.0進行統(tǒng)計分析。 結果: 1.在正常宮頸標本、慢性宮頸炎標本、CIN和宮頸癌標本中CyclinE的陽性表達率整體上呈上升趨勢，四組比較有顯著性差異(x2=39.65)。正常組與慢性宮頸炎組比較，差異無顯著性；正常組與慢性宮頸炎組合并后分別與宮頸癌組及CIN組比較，差異均有顯著性；宮頸癌組與CIN組比較，差

5、異亦有顯著性。在宮頸癌中，CyclinE的表達與病理類型、組織學分級、臨床分期及淋巴結轉移有關，而與年齡、腫瘤大小、宮旁浸潤及浸潤深度無關。 應用FCM法檢測CyclinE在四組組織中細胞內的蛋白含量，正常宮頸組、宮頸炎組、CIN組和宮頸癌組中表達量的FI值(-x±s)分別為0.98±0.06，1.00±0.04，1.40±0.12和1.68±0.15，依次上升，四組比較有顯著性差異(F=131.95)。組間比較顯示：Cycli

6、nE表達量在正常宮頸組和宮頸炎組間比較無顯著性差異，其余各組進行兩兩比較均有顯著性差異。 2.Survivin在正常宮頸標本、慢性宮頸炎標本、CIN和宮頸癌標本中的陽性表達率整體上呈上升趨勢，四組相比有顯著性差異。正常組與慢性宮頸炎組比較，差異無顯著性；合并正常組與慢性宮頸炎組后，宮頸癌組及CIN組分別與之比較，差異均有顯著性；宮頸癌組與CIN組比較，差異無顯著性。在宮頸癌組織中，Survivin的表達與年齡、病理類型、腫瘤大小

7、、宮旁或脈管浸潤及浸潤深度無關，與臨床分期和組織學分級、淋巴結轉移有關。應用FCM法檢測Survivin在細胞內的總含量，Survivin在正常宮頸組、宮頸炎組、CIN組和宮頸癌組中的蛋白表達量分別為0.99±0.09，1.03±0.02，1.33±0.03和1.93±0.24，四組比較差異有顯著性(F=121.24)。組間比較顯示Survivin表達量在正常宮頸組和慢性宮頸炎組比較無統(tǒng)計學意義，其余各組進行兩兩比較均有統(tǒng)計學意義。

8、 3.HPV16-E6在正常宮頸標本、慢性宮頸炎標本、CIN和宮頸癌標本中的陽性表達率整體上呈上升趨勢，四組比較有顯著性差異。正常組與慢性宮頸炎組比較，差異無顯著性；合并正常組與慢性宮頸炎組后，宮頸癌組及CIN組分別與之比較，差異均有顯著性；宮頸癌組與CIN組比較，差異無顯著性。在宮頸癌組中，HPV16-E6蛋白的表達與年齡及組織學類型有關，與分化程度、臨床分期、有無淋巴結轉移、腫瘤大小及浸潤深度無關。 應用FCM法檢測HP

9、V16-E6在細胞內的含量，在正常宮頸組、宮頸炎組、CIN組和宮頸癌組中的蛋白表達量分別為：0.96±0.08，1.02±0.02，1.35±0.14和1.43±0.16，四組比較有顯著性差異。組間比較顯示正常組與炎癥組比較無顯著性差異，CIN組與宮頸癌組比較無顯著性差異，其它組間比較均有顯著性差異。 4.應用Spearman等級相關分析發(fā)現(xiàn)，在宮頸癌組織中，CyclinE與Survivin表達呈正相關(r=0.4591)；Cy

10、clinE與HPV16-E6蛋白的表達呈正相關(r=0.522)；Survivin與HPV16-E6蛋白的表達亦呈正相關(r=0.404)。 結論: 1.CyclinE、Survivin及HPV16-E6蛋白在正常宮頸標本、慢性宮頸炎標本、CIN和宮頸癌標本中的表達呈依次升高趨勢。它們的異常表達可能與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關。聯(lián)合檢測三者可能有助于宮頸癌的早期診斷。 2.CyclinE表達與宮頸癌的臨床分期、病理類型

11、、組織分化程度、淋巴結轉移有關，Survivin表達與宮頸癌的臨床分期、組織分化程度和淋巴結轉移有關，提示它們可能是預測宮頸癌侵襲性及預后的有效監(jiān)測指標。 3.HPV16-E6蛋白高表達多見于45歲以下宮頸癌患者，且與宮頸鱗癌的發(fā)生有關，提示檢測HPV16感染有助于45歲以下女性宮頸鱗癌的篩查。 4.實驗表明CyclinE、Survivin、HPV16-E6在宮頸癌中的表達兩兩均呈正相關，提示三者可能在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中