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1、我們首先將人FHIT基因的真核表達重組質(zhì)粒pcDNA3.1/Hygro(+)/FHIT導入不表達內(nèi)源性Fhit蛋白的永生化人支氣管上皮細胞Y-BE,獲得了穩(wěn)定高表達Fhit蛋白的細胞亞群Y-BE/FHIT.隨后我們分析了外源性FHIT基因表達對Y-BE細胞生物學行為的影響,包括細胞增殖能力、細胞周期和細胞凋亡.結(jié)果發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)染空載體的對照Y-BE/pcDNA3.1細胞與親本細胞Y-BE(p92)相比,生長速度無明顯差異,而Y-BE/FHI
2、T細胞的生長速度則明顯慢于前兩者,提示Fhit蛋白的高表達有抑制細胞的體外生長的作用.采用流式細胞儀進行的細胞周期分析顯示,Y-BE/FHIT細胞G2期DNA的百分含量是Y/pcDNA3.1細胞的1.7倍,提示Y-BE/FHIT細胞發(fā)生了G2/M期阻滯;Western Blot分析發(fā)現(xiàn)的Cyclin B1蛋白表達水平的下調(diào)可能是G2期細胞含量增加的機制之一.用Annexin V進行的細胞凋亡檢測表明:Y-BE/FHIT細胞的早期凋亡高于
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