葡萄籽原花青素分離及其對(duì)胰脂酶活性抑制功能的研究.pdf

1、葡萄籽為葡萄酒廠和葡萄飲料廠的資源副產(chǎn)物，約占葡萄鮮重的5％左右。葡萄籽中脂肪含量約為14%～17%，其中亞油酸的含量高達(dá)68%～76%。葡萄籽中原花青素具有較強(qiáng)的抗氧化作用，其抗氧化、清除自由基能力達(dá)到維生素E的50倍，維生素C的20倍，同時(shí)對(duì)多種酶如胰脂酶、絡(luò)氨酸酶、α-淀粉酶具有較強(qiáng)的抑制作用。
　　本文利用超臨界CO2流體萃取葡萄籽油脂后的葡萄籽粉為原料，采用有機(jī)溶劑萃取法和大孔樹脂進(jìn)行分離葡萄籽中的原花青素，探究葡萄籽原

2、花青素對(duì)胰脂酶活性的抑制作用，確定其抑制類型及抑制常數(shù)。
　　對(duì)脫脂葡萄籽粉中原花青素進(jìn)行初步萃取。通過正交試驗(yàn)探究不同因素如溶劑、料液比、提取時(shí)間、提取溫度、溶劑濃度等對(duì)葡萄籽中原花青素萃取效果的影響。正交試驗(yàn)結(jié)果確定葡萄籽中原花青素的最佳萃取工藝方案，即料液比1:10，在70%乙醇中提取2小時(shí)，提取溫度為70℃，提取三次，在該工藝條件下，提取液中原花青素的含量為4.94%。通過該工藝原花青素具有提取率高、安全性高、容易操作等優(yōu)

3、點(diǎn)。
　　葡萄籽原花青素的純化工藝研究中，利用大孔吸附樹脂對(duì)原花青素的特異性吸附及解吸進(jìn)行原花青素的純化。通過靜態(tài)試驗(yàn)從8種不同樹脂中篩選出最佳樹脂HPD100型樹脂，實(shí)驗(yàn)證明HPD100樹脂對(duì)葡萄籽原花青素吸附量大、解吸率高、噴干后純度高，同時(shí)該樹脂機(jī)械強(qiáng)度大、耐酸堿，有利于葡萄籽原花青素的工業(yè)化分離。通過吸附實(shí)驗(yàn)確定最佳原花青素進(jìn)樣濃度為8.0mg/mL，上樣pH值為3.0，進(jìn)樣流度為3.0BV/h。水洗時(shí)水洗體積為4.0BV

4、，解吸時(shí)用60%乙醇2.0BV/h流速進(jìn)行洗脫，通過該工藝方法獲得的原花青素經(jīng)干燥純度達(dá)到95%以上。
　　在葡萄籽原花青素對(duì)胰脂酶活性的抑制實(shí)驗(yàn)通過改變酶反應(yīng)體系不同條件，探究葡萄籽原花青素對(duì)胰脂酶活性的影響。結(jié)果表明，葡萄籽原花青素在特定條件下對(duì)胰脂酶活性具有抑制作用，通過實(shí)驗(yàn)確定原花青素對(duì)胰脂酶的抑制常數(shù)Ki=0.1032mg/mL，改變不同抑制劑濃度與底物濃度繪制Dixon和Weaver-line圖，證明原花青素對(duì)胰脂酶活