核因子NF-κB參與背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體痛覺調(diào)制作用的研究.pdf

1、目的：觀察阻斷背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體對(duì)慢性坐骨神經(jīng)縮窄性損傷（CCI）模型大鼠熱縮足潛伏期（TWL）、機(jī)械縮足閾值（MWT）以及NF-κB、p-PKA、p-PKC表達(dá)的影響，從而探討核因子NF-κB在背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體痛覺調(diào)制中的可能機(jī)制。
　　方法：健康雄性SPF級(jí)SD大鼠（4-6周齡，180～200 g），采用隨機(jī)數(shù)字表達(dá)法分為3組（n=12）：假手術(shù)組(S組)，神經(jīng)病理性痛組（NP組），A-317491組（A組， P2X

2、3受體阻斷劑）。三組大鼠均予以鞘內(nèi)置管，置管3天后，NP、A組大鼠建立坐骨神經(jīng)慢性縮窄性（CCI）模型，S組大鼠只游離坐骨神經(jīng)不結(jié)扎。建立CCI模型后1天，S組與NP組鞘內(nèi)注射0.9％生理鹽水(20μl/次)，A組鞘內(nèi)注射A-317491[(100 nmol A-31749110μl+0.9%生理鹽水10μl)/次]，連續(xù)注射14 d（2次/d）。分別測定術(shù)前1 d、術(shù)后第1,3,7,10,14 d鞘內(nèi)給藥后30 min時(shí)大鼠術(shù)側(cè)下肢的

3、TWL和MWT。在第7 d、14 d處死大鼠，取L4~L6術(shù)側(cè)脊髓背根神經(jīng)節(jié)。利用免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)觀察P2X3受體與核因子NF-κB的表達(dá)分布；Western Blot觀察CCI手術(shù)及鞘內(nèi)注射A-317491對(duì)各組大鼠P2X3、NF-κB、p-PKC、p-PKA表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：與S組比較，NP組在各時(shí)點(diǎn)大鼠TWL和 MWT顯著下降(P<0.01)，背根神經(jīng)節(jié)P2X3、NF-κB、p-PKC、p-PKA表達(dá)上調(diào)(P<0.05

4、)；與NP組相比，A組大鼠后TWL在各時(shí)點(diǎn)均高于NP組(P<0.05)，MWT在術(shù)后3,7,10,14 d升高(P<0.05)；大鼠第7、14 d背根神經(jīng)節(jié)P2X3、NF-κB、p-PKC表達(dá)明顯減弱(P<0.05)，p-PKA在大鼠第7 d表達(dá)減弱(P<0.05)，14 d表達(dá)無明顯變化。
　　結(jié)論：背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體通過p-PKC/NF-κB信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)痛覺過敏的產(chǎn)生與傳遞，在背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體痛覺過敏形成過程中起