全身免疫及宮頸局部微環(huán)境與不同級別宮頸病變關系的研究.pdf

1、目的:
　　研究宮頸上皮內(nèi)瘤變及早期宮頸癌患者全身免疫功能和宮頸局部微環(huán)境的變化，探討全身免疫、陰道菌群的失衡、局部T淋巴細胞亞群和炎性因子的變化與CIN的關系，進一步對比分析CIN的全身免疫與宮頸局部免疫的變化，初步了解CIN與全身及局部免疫變化的關系。
　　方法:
　　選取2015年1月至2016年12月在廣西醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院婦瘤科廣西區(qū)婦幼保健院及柳州市工人醫(yī)院婦科門診就診的婦女，年齡為20歲至65歲有性生活

2、史的女性共254例，行宮頸脫落細胞學(TCT)檢查及用導流雜交基因芯片技術檢測HPV-DNA，最終選取經(jīng)病理活檢確診為慢性炎癥組77例及CIN患者142例為實驗組(其中宮頸低級別上皮內(nèi)瘤變(Low cervicalintraepithelial neoplasia LSIL)組52例、宮頸高度上皮內(nèi)瘤變(High Cervica1Intraepithelial Neoplasia HSIL)組90例;以同期HPV陰性且宮頸活檢正常者35

3、例為對照組，以上患者均在初診時收集實驗所需的陰道分泌物及陰道灌洗液，陰道分泌物用精密PH試紙測pH值，革蘭氏染色檢測乳酸桿菌、霉菌、線索細胞，陰道菌群用懸滴濕片法檢測滴蟲。用生理鹽水沖洗陰道后穹窿并收集陰道灌洗液用酶聯(lián)免疫吸附實驗(Enzyme linked immunosorbent assayELISA)檢測免疫細胞因子:白介素-2（Interleukin-2，IL-2）白介素-10(Interleukin-10，IL-10)、CD

4、4+和CD8+。并將以上患者中HPV陰性且宮頸活檢正常者25例（對照組）、宮頸上皮內(nèi)瘤變(Cervical Intraepithelial Neoplasia CIN)包括LSIL組20例和HSIL組56例，Ⅰ期宮頸癌60例（早期宮頸癌組），檢測患者的外周血樣本，體液免疫檢測的指標包括:免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)(IgA+IgG+IgM)和補體(C3+C4)。細胞免疫包括CD3（總T淋巴細胞）、CD4（輔助性淋巴細

5、胞Th）、CD8（抑制性淋巴細胞Ts）、CD4/CD8（Th/Ts），并對所得結果進行比較分析。
　　結果:
　　1、外周血中免疫球蛋白與補體:IgA在對照組、LSIL組、HSIL組和早期宮頸癌組差異無統(tǒng)計學意義(P=0.256＞0.05)，但IgA有隨著宮頸病變程度的加重而升高的趨勢;IgG在對照組、LSIL組、HSIL組和早期宮頸癌組差別無統(tǒng)計學意義(P=0.558＞0.05);IgM在對照組、LSIL組HSIL組和早期

6、宮頸癌組差異無顯著性意義(P=0.731＞0.05);補體C3在對照組、LSIL組HSIL組和早期宮頸癌組差異無統(tǒng)計學意義(P=0.362＞0.05);補體C4在對照組、LSIL組HSIL組和早期宮頸癌組四組間無統(tǒng)計學意義(P=0.413＞0.05)。
　　2、外周血中T淋巴細胞亞群:CD3+隨著宮頸病變程度的加重而呈下降趨勢，CD3+在對照組、LSIL組、HSIL組和早期宮頸癌組差異有統(tǒng)計學意義(P=0.002＜0.05);CD

7、4+隨著宮頸病變程度的加重而呈下降趨勢，CD4+在對照組、LSIL組、HSIL組和早期宮頸癌組，組間比較差別有統(tǒng)計學意義(P=0.038＜0.05);CD8+在對照組、LSIL組、HSIL組和早期宮頸癌組差異無顯著性意義(P=0.075＞0.05);對照組CD4+/CD8+比值在四組間差異無統(tǒng)計意義(P=0.059＞0.05)。
　　3、宮頸脫落細胞中HPV的感染情況:254例患者總的HPV感染率為78.54％，排在前三位的基因型

8、是16，52，58。高危型HPV16型和58型三組中的感染率分別是7.14％、15.38％、65.56％和5.19％、9.62％、11.11％，隨著宮頸病變程度的升高，HPV16型和58型感染率逐漸增高;高危型HPV52型三組中的感染率分別是15.58％、30.77％、10％，HPV52型在宮頸低度病變的感染較為常見，高危HPV感染率在炎癥組、LSIL組和HSIL組分別為49.35％、67.35％、93.33％，高危HPV隨著宮頸病變程

9、度的加重而升高，差別有統(tǒng)計學意義(P＜0.05).
　　4、陰道PH值與菌群的檢測:對照組、炎癥組、LSIL組和HSIL組pH值分別為（4.6±0.78）、（4.6±0.71）、（4.8±0.59）和（5.1±0.53），四組的pH值差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，對照組分別與LSIL組和HSIL組有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);對照組、炎癥組、LSIL組和HSIL組間乳酸桿菌的陽性率分別為8.57％、7.79％、7.69％和3.

10、33％，隨著宮頸病變程度的加重，乳酸桿菌的陽性率隨之下降，但四組間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。四組間滴蟲(Trichomonas vaginalis TV)的感染率分別為8.57％、9.09％、11.54％和6.67％，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。假絲酵母菌的感染率分別為11.43％、9.09％、13.46％、11.11％，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);細菌性陰道病(Bacterial vaginosis BV)的感染率

11、分別為8.57％、5.19％9.62％、10％，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　5、陰道灌洗液中炎性細胞因子的檢測:IL-2在對照組、炎癥組、LSIL組和HSIL組中分別為171.02±22.75 pg/ml、173.31±19.72pg/ml、155.09±33.78pg/ml、145.16±34.47 pg/ml，IL-2在炎癥組、LSIL組和HSIL組低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.001);IL-10在對照組

12、、炎癥組、LSIL組和HSIL組分別為43.91±11.16pg/ml、46.53±14.61pg/ml、50.17±16.77pg/ml、55.36±20.46pg/ml; IL-10在炎癥組、LSIL組和HSIL組高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　6、陰道灌洗液中T淋巴細胞亞群的檢測:CD4+在對照組、炎癥組、LSIL組和HSIL組分別為27.09±5.09ug/L、25.98±7.81ug/L、25.58±

13、6.92ug/L、25.24±5.33ug/L;組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。CD8+在對照組、炎癥組、LSIL組和HSIL組分別為31.07±4.85IU/mL、31.52±8.19IU/mL、32.30±5.81U/mL、33.99±7.96IU/mL;在組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　7、全身免疫T淋巴細胞亞群中的CD4+隨著宮頸病變程度的加重而呈下降趨勢，在對照組、LSIL組和HSIL組有統(tǒng)計學

14、意義(P＜0.001);局部免疫T淋巴細胞亞群中的CD4+也隨著宮頸病變的加重而稍有降低，但三組間尚無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，CDS+在全身及局部T淋巴細胞亞群均無統(tǒng)計學意義。
　　8、進展為HSIL的高危因素:對照組或炎癥組進展為HSIL組的危險因素是HPV感染與否、PH值升高和IL2降低，LSIL組進展為HSIL組的危險因素是PH值升高。
　　結論:
　　1.宮頸病變及早期宮頸癌作為宮頸及其周圍組織的局部病變，

15、除對機體體液免疫中與粘膜免疫相關的IgA可能有一定影響外，對體液免疫中的其他指標影響不大。但宮頸病變及早期宮頸癌卻導致機體的CD3+及CD4+逐漸下降，說明在C1N向早期宮頸癌進展的過程中，全身細胞免疫功能逐漸下降，細胞免疫的變化在宮頸病變發(fā)展的過程中具有重要作用。
　　2.高危型HPV感染率隨著宮頸病變程度的加重而升高，HPV感染是CIN進展的危險因素。
　　3.陰道微環(huán)境中pH值隨著宮頸病變程度的加重而升高，PH值是CI

16、N進展的重要危險因素。但目前尚不能確定細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎及外陰陰道假絲酵母菌病與CIN的發(fā)生存在聯(lián)系。
　　4.隨著宮頸病變程度的加重，陰道局部的炎性細胞因子IL2逐漸降低，IL-10升高，提示IL2和IL-10變化在宮頸病變進展中起著重要的免疫作用;
　　5.宮頸局部體液免疫因子的變化是宮頸病變進展的重要因素，而對全身的體液免疫中除IgA外，其余免疫球蛋白及補體影響不大。
　　6.全身T淋巴細胞亞群變化在宮頸