蒙藥冷蒿遺傳多樣性研究.pdf

1、冷蒿(Artemisia frigida)，別名小白蒿、兔毛蒿，為菊科蒿屬多年生小半灌木，在內(nèi)蒙古地區(qū)分布尤為廣泛，此外，還分布于我國東北、華北、青海及新疆等地。為蒙古族常用藥用植物，全草入蒙藥，蒙藥名為“阿給”。具有止血、消腫之功效，在臨床上主治各種出血、關(guān)節(jié)腫脹、腎熱、月經(jīng)不調(diào)、瘡?fù)吹?，是蒙醫(yī)上常用的“人造圣水組成之一”。冷蒿除具有藥用價值外，還具有重要的飼用價值、生態(tài)價值及祭祀，因而冷蒿在蒙古族的民間生產(chǎn)生活中具有極其重要的作用。

2、近年來，對冷蒿的研究主要集中在藥理藥效方面，分子水平研究較少。目前，國內(nèi)外尚未見利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)對其遺傳多樣性進(jìn)行研究的相關(guān)報道。
　　本實(shí)驗(yàn)對內(nèi)蒙古自治區(qū)森林草原、草甸草原、典型草原、荒漠草原及沙地5種生境中冷蒿進(jìn)行資源調(diào)查、樣品采集，并對采集的樣品進(jìn)行遺傳多樣性分析。通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，冷蒿在內(nèi)蒙古地區(qū)分布廣泛，而且因生長環(huán)境的不同而在株高、是否可見老莖與形成密集株叢方面存在差異，選定24個居群進(jìn)行樣品采集，最終得到720個樣

3、品，用于后期遺傳多樣性分析。本研究主要利用SSR標(biāo)記的方法對其進(jìn)行研究，并輔以ISSR標(biāo)記對部分樣品進(jìn)行分析。篩選青蒿38對SSR引物，獲得10個目的條帶擴(kuò)增清晰的SSR位點(diǎn)，對720個樣品進(jìn)行分析，共檢測到56個等位基因，多態(tài)位點(diǎn)百分率為100％，期望雜合度He(0.5361～0.6817)、觀察雜合度Ho(0.3299～0.5769)，多態(tài)信息含量PIC值(0.4714～0.6153)均較高，說明冷蒿個體群遺傳變異較大、多樣性豐富。

4、比較分析居群間遺傳多樣性水平，呼倫貝爾草原的冷蒿居群遺傳多樣性(He=0.6361，Ho=0.4514，PIC=0.5684)高于錫林郭勒草原(He=0.6009，Ho=0.4457，PIC=0.5373)。比較5種生境的冷蒿居群，典型草原的遺傳變異(He=0.6672，Ho=0.4994，PIC=0.5375)高于其他生境。24個冷蒿居群的遺傳分化指數(shù)Fst為0.014～0.314，各居群親緣關(guān)系差異較大。其中森林草原L-1居群與森林

5、草原L-2居群，森林草原L-3居群與森林草原L-4居群的Fst值均為0.014，親緣關(guān)系最近，草甸草原C-4居群與荒漠草原H-4居群的Fst值為0.314，親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。
　　利用12條ISSR引物對11個冷蒿居群共254個樣品進(jìn)行檢測，平均多態(tài)位點(diǎn)百分率為100％，居群間的遺傳分化系數(shù)Fst為0.034～0.089，居群間遺傳關(guān)系較近，且遺傳變異大部分存在于種群內(nèi)，各居群間有基因交流，相同生境的冷蒿居群大體可以聚為一類。

6、　　結(jié)合SSR與ISSR分析結(jié)果，推測冷蒿居群可能最先起源于典型草原，后來依次擴(kuò)散至沙地、森林草原、草甸草原和荒漠草原，并在進(jìn)化過程中受外在條件影響，使得典型草原與沙地較近，森林草原與草甸草原較近。
　　總之，本研究對內(nèi)蒙古地區(qū)冷蒿資源分布及利用概況進(jìn)行研究，并首次利用SSR和ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對冷蒿居群進(jìn)行遺傳多樣性研究，從遺傳學(xué)角度揭示其在內(nèi)蒙古地區(qū)作為耐干旱、耐啃食的原因，并為從分子角度揭示冷蒿藥用價值奠定基礎(chǔ)，為冷蒿合理