IL-35對口腔扁平苔蘚患者外周血Th17-Treg平衡的影響.pdf

1、目的：了解口腔扁平苔蘚（OLP）患者外周血中Th17/Treg的平衡狀況，以及探討IL-35對OLP患者Th17/Treg平衡的影響。
　　方法：1.OLP患者12例（非糜爛型4例，糜爛型8例）和健康對照13例。無菌提取外周血的單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs），通過流式細(xì)胞儀（FCM）分選出CD4+T細(xì)胞后，先采用Real-time PCR方法檢測Foxp3與RORγt表達(dá)情況；然后通過加入/不加入rIL-35在體外進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束后收

2、集培養(yǎng)細(xì)胞，采用Real-time PCR方法檢測上述相同因子的表達(dá)水平。2.OLP患者15例（非糜爛型6例，糜爛型9例）和健康對照14例。無菌提取外周血的單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs），通過流式細(xì)胞儀（FCM）分選出CD4+CD25+T細(xì)胞，先采用Real-time PCR和ELISA方法分別檢測Foxp3、EBI3、p35和IL-10的表達(dá)情況；然后通過加入/不加入rIL-35在體外進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束后收集細(xì)胞及培養(yǎng)上清，采用Real-t

3、ime PCR和ELISA方法檢測上述相同因子的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1.（1）OLP患者CD4+T細(xì)胞中Foxp3和RORγt mRNA的表達(dá)水平均高于正常對照組（p<0.05），在糜爛型OLP組中RORγt/Foxp3 mRNA比值高于非糜爛型OLP組和正常對照組（p<0.05），Spearman相關(guān)性分析顯示該比值與癥狀記分呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.661,p=0.019）；（2）在健康者CD4+T細(xì)胞中，加入rIL-35后Fo

4、xp3 mRNA表達(dá)下調(diào)（p<0.05），RORγt mRNA表達(dá)差異不明顯（p>0.05），RORγt/Foxp3 mRNA比值在加入rIL-35后上升（p<0.05）；（3）在糜爛型OLP組CD4+T細(xì)胞中，加入rIL-35后Foxp3 mRNA表達(dá)上調(diào)（p<0.05），RORγt mRNA表達(dá)差異不明顯（p>0.05），RORγt/Foxp3 mRNA比值在加入rIL-35后下降（p<0.05），而在非糜爛型OLP組中作用不明顯（

5、p>0.05）。2.（1）OLP患者外周血Tregs細(xì)胞中Foxp3、EBI3、p35 mRNA和IL-10的表達(dá)水平均高于正常對照組（p<0.05）；（2）在健康者Tregs細(xì)胞中，加入rIL-35后Foxp3 mRNA和IL-10的表達(dá)均下調(diào)（p<0.05），IL-35的兩個(gè)亞基EBI3、p35 mRNA在加入rIL-35后表達(dá)也降低（p<0.05）；（3）而在OLP組Tregs細(xì)胞中，加入rIL-35后Foxp3 mRNA和IL-

6、10的表達(dá)均上調(diào)（p<0.05），IL-35的兩個(gè)亞基EBI3、p35mRNA在加入rIL-35后表達(dá)也升高（p<0.05）。
　　結(jié)論：1.在OLP外周血中Th17和Tregs細(xì)胞的表達(dá)均升高，其都參與了OLP的發(fā)病過程，并且存在著以Th17細(xì)胞占優(yōu)勢的Th17/Treg失衡，推測該失衡與OLP長期形成的慢性炎癥有關(guān)。2.外源性IL-35在健康者和OLP患者中影響不同，在健康人群中，其可以下調(diào)Tregs細(xì)胞的表達(dá)，同時(shí)也降低了I