性激素對小鼠免疫的影響.pdf

1、傳染性疾病的防控一直是規(guī)模養(yǎng)殖場的工作重點,疫苗接種是預防傳染病的有效方法之一,但免疫失敗的情況仍時有發(fā)生,給畜牧業(yè)造成了巨大的經濟損失。畜禽機體產生免疫應答是一個復雜的,受多種因素影響的過程,在影響機體免疫應答能力的諸多因子中,性激素的作用不可忽視。本論文研究了外源性雌激素、外源性雄激素以及異性對小鼠免疫應答的影響,為在實踐中如何增強機體的免疫應答作用提供參考。1、外源性雌激素對雌性小鼠免疫應答的影響目的觀察雌二醇和具有雌激素樣作用的

2、人參皂甙Rb1和Rg1對雌鼠的免疫應答的影響。方法將72只ICR小鼠隨機分為9組,每組8只。給抑制劑對照組連續(xù)一周經腹股溝皮下注射ICI182,780(氟維斯群)(200μg/d)后,各組分別按如下方案進行免疫:組1:生理鹽水;組2:OVA(10μg);組3:200μg ICI(注射含10gμOVA和200μg ICI的混合疫苗,下同);組4:30μg雌二醇(E2);組5:30μg E2+200μg ICI;組6:50μg Rb1;組7

3、:50μg Rb1+200μg ICI;組8:50μg Rg1;組9:50μg Rg1+200μg ICI。3周后加強免疫一次,方法同前。在免疫后2周采血測血清抗OVA特異性抗體IgG及其亞類水平;無菌分離脾淋巴細胞后,采用MTT法檢測淋巴細胞增殖;RT-PCR法測定脾淋巴細胞表達細胞因子mRNA的水平。結果外源雌激素(E2)可以提高小鼠的抗OVA特異性抗體水平以及抗體亞類IgG1水平,細胞因子(IFN-γ、IL-12、IL-4和IL-

4、10)和轉錄因子(T-bet和GATA-3)的mRNA表達水平,且均顯著高于其抑制劑對照組。具有雌激素樣作用的人參皂甙Rg1、Rb1可以提高小鼠抗OVA特異性抗體IgG和抗體亞類水平,顯著促進脾臟淋巴細胞增殖能力和4種細胞因子和2種轉錄因子的mRNA表達水平,且均顯著高于或稍高于各自的抑制劑對照組。結論雌激素和人參皂甙Rg1、Rb1都具有免疫調節(jié)作用,雌激素主要促進Th2型免疫應答,人參皂甙可促進Th1和Th2型免疫應答。雌激素和人參皂

5、甙Rg1、Rb1的免疫調節(jié)作用與雌激素受體存在一定關聯。2、外源性雄激素對雄性小鼠免疫應答的影響目的觀察睪酮(Te)對小鼠的免疫應答的影響,同時運用雄激素受體拮抗劑氟他胺,研究人參皂甙的免疫調節(jié)作用是否與雄激素受體有關。方法將72只ICR小鼠隨機分為9組,每組8只。對抑制劑對照組連續(xù)一周經腹股溝皮下注射氟他胺(300μg/d)后,各組分別按如下方案進行免疫:組1:生理鹽水;組2:OVA(10μg);組3:300μg Flu(注射含10μ

6、g OVA和300μg Flu的混合疫苗,下同);組4:50μg Te;組5:50μg Te+300μg Flu;組6:50μg Rb1;組7:50μg Rb1+300μgFlu;組8:50μg Rg1;組9:50μg Rg1+300μg Flu.3周后加強免疫一次,方法同前。在免疫后2周采血測血清抗OVA特異性抗體IgG及其亞類水平;無菌分離脾淋巴細胞后,采用MTT法檢測淋巴細胞增殖;RT-PCR法測定脾淋巴細胞表達細胞因子mRNA的

7、水平。結果外源雄激素不能提高小鼠抗OVA特異性抗體和各抗體亞類水平以及淋巴細胞轉化能力,且與雄激素抑制劑對照組未形成顯著差異;人參皂甙Rg1、Rb1可以提高小鼠抗OVA特異性免疫應答水平,但較其雄激素抑制劑對照組無顯著差異。結論雄激素不能上調機體對抗原注射的免疫應答反應,且與雄激素受體之間的關聯性不明顯。人參皂甙的免疫調節(jié)作用與雄激素受體無關。3、同種異性小鼠對免疫反應的影響目的觀察同種異性對小鼠激素水平及其對免疫反應的影響。方法實驗一

8、:將30只ICR雌鼠隨機分成3組,每組10只,第3組中添加一只雄鼠(為防止雌鼠懷孕,在試驗前對此雄鼠實行了輸精管結扎術)。實驗二:將30只ICR雄鼠隨機分成3組,每組10只,第3組多一只雌鼠。分別注射生理鹽水(組1)或OVA(組2,組3),3周后加強免疫一次,方法同前。2免后2周眼眶采血,雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測小鼠血清中雌二醇(E2)和睪酮(Te)的含量;間接ELISA法檢測血清抗OVA抗體水平;無菌分離脾淋巴細胞后,RT-

9、PCR法測定脾淋巴細胞表達細胞因子mRNA的水平。結果異性小鼠可使雌、雄性小鼠血清中雌二醇水平顯著提高而睪酮并無顯著變化,雌雄小鼠的抗OVA特異性IgG抗體水平均顯著提高,雌鼠Th1類的細胞因子(IFN-γ和IL-12)和轉錄因子T-bet的mRNA表達水平下降以及Th2類的細胞因子(IL-4和IL-10)和轉錄因子GATA-3的mRNA表達水平顯著提高;雄鼠Th1類細胞因子和轉錄因子的mRNA表達水平上升，而Th2類細胞因子和轉錄因子