小鼠背部單穿支與多穿支皮瓣choke vessels重構(gòu)的對(duì)比研究.pdf

1、目的：Choke vessels是位于相鄰血管體間的吻合區(qū)血管。作為連接相鄰血管體的橋梁結(jié)構(gòu)，choke vessels在跨區(qū)皮瓣的設(shè)計(jì)和切取方面起到十分重要的作用。但是到目前為止，對(duì)于choke區(qū)的研究多是局限于相鄰兩條穿支之間，研究的內(nèi)容主要是血流動(dòng)力學(xué)與形態(tài)學(xué)，而對(duì)多血管體間的choke vessels以及血流動(dòng)力學(xué)和形態(tài)學(xué)關(guān)系的研究卻鮮有報(bào)道；本實(shí)驗(yàn)通過建立小鼠背部單穿支和多穿支皮瓣模型，重點(diǎn)觀察跨區(qū)皮瓣多血管體間choke區(qū)微

2、循環(huán)重構(gòu)的特點(diǎn)；其次我們是通過外科延遲術(shù)結(jié)扎不同數(shù)量的穿支血管，以造成皮瓣內(nèi)不同程度的血流灌注，并對(duì)流經(jīng)皮瓣中央choke區(qū)的血流灌注量、形態(tài)學(xué)的變化進(jìn)行監(jiān)測(cè)，從而在宏觀和微觀上探討血流量對(duì)choke vessels形態(tài)學(xué)的影響。
　　方法：清潔級(jí)Balb/c小鼠100只，7-8周齡，[溫州醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物質(zhì)量合格證：SCXK（滬）2012-0002]。隨機(jī)分為對(duì)照組(10只)，實(shí)驗(yàn)A、B、C組（每組30只）。用5％的水

3、合氯醛以6ml/kg的劑量進(jìn)行腹腔注射麻醉。將麻醉好的小鼠以俯臥位的體位固定于手術(shù)臺(tái)上，背側(cè)皮膚剃毛后用聚維酮碘和75%酒精消毒；再用記號(hào)筆標(biāo)記出切取范圍和中央choke區(qū)，鋪上無菌洞巾，根據(jù)解剖學(xué)標(biāo)記切取5cm×3cm的背部跨區(qū)皮瓣（選擇小鼠背部包括2個(gè)胸背穿支體區(qū)和2個(gè)髂腰穿支體區(qū)的跨區(qū)皮瓣作為建模標(biāo)準(zhǔn)，頭側(cè)水平線為肩胛下角處，尾側(cè)水平線為髂后上棘處，以背部中線為界，左右各旁開約1.5cm）；隨后切開皮瓣外周，同時(shí)止血，鈍性分離皮膚

4、和皮下組織；術(shù)中用0.9%生理鹽水濕潤皮膚，防止干燥。
　　結(jié)果：⑴與對(duì)照組相比7.86±1.12，實(shí)驗(yàn)各組choke區(qū)血流灌注量增加明顯，并于術(shù)后1d，3d，5d在實(shí)驗(yàn)組間出現(xiàn)差異表達(dá)，術(shù)后7天各組的血流分別是A組：（18.07±0.92），B組：（20.40±3.57），C組：（17.32±1.89），均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；此外，choke區(qū)血管曲度也明顯增加，整個(gè)皮瓣形態(tài)學(xué)的變化以術(shù)后1d，3d和7d較為明顯，術(shù)后

5、7天，實(shí)驗(yàn)C組的蒂部血管伴有明顯的軸型性改變。⑵與對(duì)照組相比，各實(shí)驗(yàn)組術(shù)后choke區(qū)的血管管徑擴(kuò)張，管壁增厚，血管數(shù)量也有所增加，且在術(shù)后7天維持在一個(gè)較高水平（P＜0.01），對(duì)照組：（5.20±1.32），術(shù)后7d各組choke區(qū)的血管平均數(shù)量為A組：（9.60±2.97）， B組：（10.93±2.02），C組：（9.00±2.42），對(duì)比而言，術(shù)后7d，B組的血管數(shù)量更為豐富，但差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；組間的差異表達(dá)出現(xiàn)在術(shù)后1d

6、，3d和5d。⑶術(shù)后7d蛋白e-NOS位于血管內(nèi)，而蛋白MMP-2主要位于血管外周。WB結(jié)果顯示：蛋白e-NOS和MMP-2的表達(dá)于術(shù)后有所增加，其中蛋白e-NOS于術(shù)后1d在實(shí)驗(yàn)組間出現(xiàn)了差異表達(dá)；蛋白MMP-2在實(shí)驗(yàn)組間沒有出現(xiàn)差異性表達(dá)。⑷術(shù)后1d，各組HIF-1α與ICAM-2的表達(dá)水平增高，隨后逐漸降低，實(shí)驗(yàn)C組于術(shù)后5d又出現(xiàn)了高表達(dá)。兩蛋白的表達(dá)在各實(shí)驗(yàn)組的變化趨勢(shì)一致。HIF-1α在實(shí)驗(yàn)組間的差異性表達(dá)出現(xiàn)在術(shù)后3d，5