蘇北部分地區(qū)耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌基因檢檢測(cè)及其同源性分析.pdf

1、目的：
　　碳青霉烯類(lèi)抗生素已經(jīng)被普及應(yīng)用到臨床抗感染治療中，耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌所占比例也隨之大幅度上升，臨床上對(duì)此類(lèi)問(wèn)題很棘手。CRKP感染成為院內(nèi)感染死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，也成了近幾年國(guó)內(nèi)外乃至全球抗感染研究的熱點(diǎn)。探討蘇北部分地區(qū)幾家醫(yī)院CRKP耐藥機(jī)制和同源性研究，能夠?yàn)榕R床耐碳青霉烯藥物的監(jiān)測(cè)和院感控制工作的順利完成，耐藥菌株流行蔓延事件的預(yù)防發(fā)生，以及能為臨床抗菌藥物的合理應(yīng)用提供比較科學(xué)的依椐。
　　方法：

2、
　　本研究采用WHONET5.6軟件對(duì)蘇北部分地區(qū)四家醫(yī)院臨床分離菌株進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與耐碳青霉烯的篩選。一共篩選出168株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌并進(jìn)一步作以下檢測(cè)：先對(duì)各家醫(yī)院CRKP進(jìn)行耐藥率的統(tǒng)計(jì)與分析；然后采用表型篩選試驗(yàn)對(duì)所有試驗(yàn)菌進(jìn)行產(chǎn)A、B類(lèi)碳青霉烯酶的篩選；接著采用PCR法擴(kuò)增確認(rèn)相應(yīng)的碳青霉烯酶酶型基因，目的產(chǎn)物經(jīng)基因測(cè)序和BLAST網(wǎng)上比對(duì)確定其基因型；使用脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE)分子分型技術(shù)分析連云港第一人民醫(yī)院

3、的88株CRKP的同源性。并選取其中6株菌作多位點(diǎn)序列分型（MLST）。
　　結(jié)果：
　　各家醫(yī)院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌對(duì)常用抗菌藥物均顯示出強(qiáng)耐藥性；碳青霉烯酶表型篩選試驗(yàn)結(jié)果均為陽(yáng)性，141株測(cè)出相應(yīng)的A、B類(lèi)碳青霉烯酶表型，27株未測(cè)出酶型。141株篩選試驗(yàn)測(cè)出A、B類(lèi)酶型的菌株中有130株產(chǎn)A類(lèi)碳青霉烯酶,經(jīng)PCR確定酶基因型均為KPC-2型；11株產(chǎn)B類(lèi)金屬酶,經(jīng)PCR確定它們基因型為NDM-1的5株，基因型為VI

4、M-2的4株，基因型為IMP-4的2株；未測(cè)出酶型的27株菌均未擴(kuò)增出A、B類(lèi)相關(guān)基因。選取連云港市第一人民醫(yī)院的95株中的88株進(jìn)行PFGE分型，其結(jié)果分為5群，產(chǎn)KPC-2型碳青霉烯酶的78株為同一群，其中51株屬于同一型。選取其中的6株外送做MLST分型，分型結(jié)果均屬于ST11型。
　　結(jié)論：
　　產(chǎn)碳青霉烯酶為蘇北部分地區(qū)幾家醫(yī)院CRKP的主要耐藥機(jī)制，且主要以產(chǎn)KPC-2基因型為主，同時(shí)有VIM-2、IMP-4和N