兒童過(guò)敏性紫癜血漿miRNAs差異表達(dá)譜研究.pdf

1、目的：通過(guò)基因芯片技術(shù)獲得兒童過(guò)敏性紫癜中的差異miRNAs表達(dá)譜，生物信息學(xué)分析關(guān)鍵miRNAs分子調(diào)控的靶基因及信號(hào)通路，闡明miRNA在兒童過(guò)敏性紫癜中發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：收集10例兒童過(guò)敏性紫癜病人和10例正常健康兒童的血漿標(biāo)本，提取總RNA；采用基因芯片技術(shù)檢測(cè)兒童過(guò)敏性紫癜病人和正常健康兒童血漿中的差異miRNAs；運(yùn)用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)兩個(gè)差異miRNAs：miR-122和miR-149的表達(dá)水平；并通

2、過(guò)生物信息學(xué)分方法分析miR-122和miR-149調(diào)控的靶基因及相關(guān)信號(hào)通路。
　　結(jié)果：
　　1.獲得兒童過(guò)敏性紫癜病人和正常健康兒童血漿的差異 miRNAs表達(dá)譜；兒童過(guò)敏性紫癜血清中，上調(diào)的miRNAs有16個(gè)，下調(diào)的miRNAs有12個(gè)。
　　2.兒童過(guò)敏性紫癜病人中，上調(diào)倍數(shù)最大的為miR-122，上調(diào)15.3413倍；下調(diào)倍數(shù)最大的為miR-149，下調(diào)-5.1245倍。
　　3.10例兒童過(guò)敏性紫

3、癜病人中，miR-122的平均值為172.8±7.2，10例正常健康兒童中， miR-122的平均值為31.2±5.5，上調(diào)倍數(shù)為5.5倍；10例兒童過(guò)敏性紫癜病人中，miR-149的平均值為18.4±1.6，10例正常健康兒童中，miR-149的平均值為65.7±3.5，下調(diào)倍數(shù)為-3.6倍，基因芯片和qRT-PCR驗(yàn)證結(jié)果一致。
　　4. miR-122調(diào)控的靶基因有173個(gè)，miR-149調(diào)控的靶基因有445個(gè)。
　　

4、5.173個(gè)miR-122調(diào)控的靶基因涉及的信號(hào)通路主要包括：Dicer、MAPK、FAS、AKT、ErbB、p53等6條信號(hào)通路；445個(gè)miR-149調(diào)控的靶基因涉及的的功能聚類主要包括：Cell cycle、Wnt、TGF-beta、p53、MAPK、Calcium、Apoptosis、AKT、Ras等10條信號(hào)通路。
　　結(jié)論：
　　1.通過(guò)基因芯片方法獲得了兒童過(guò)敏性紫癜病人和正常健康兒童血漿的差異 miRNAs表