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文檔簡介
1、目的：通過基因芯片技術(shù)獲得兒童過敏性紫癜中的差異miRNAs表達(dá)譜，生物信息學(xué)分析關(guān)鍵miRNAs分子調(diào)控的靶基因及信號通路，闡明miRNA在兒童過敏性紫癜中發(fā)生發(fā)展中的作用。
方法：收集10例兒童過敏性紫癜病人和10例正常健康兒童的血漿標(biāo)本，提取總RNA；采用基因芯片技術(shù)檢測兒童過敏性紫癜病人和正常健康兒童血漿中的差異miRNAs；運(yùn)用qRT-PCR技術(shù)檢測兩個(gè)差異miRNAs：miR-122和miR-149的表達(dá)水平；并通
2、過生物信息學(xué)分方法分析miR-122和miR-149調(diào)控的靶基因及相關(guān)信號通路。
結(jié)果：
1.獲得兒童過敏性紫癜病人和正常健康兒童血漿的差異 miRNAs表達(dá)譜；兒童過敏性紫癜血清中，上調(diào)的miRNAs有16個(gè)，下調(diào)的miRNAs有12個(gè)。
2.兒童過敏性紫癜病人中，上調(diào)倍數(shù)最大的為miR-122，上調(diào)15.3413倍；下調(diào)倍數(shù)最大的為miR-149，下調(diào)-5.1245倍。
3.10例兒童過敏性紫
3、癜病人中，miR-122的平均值為172.8±7.2，10例正常健康兒童中， miR-122的平均值為31.2±5.5，上調(diào)倍數(shù)為5.5倍；10例兒童過敏性紫癜病人中，miR-149的平均值為18.4±1.6，10例正常健康兒童中，miR-149的平均值為65.7±3.5，下調(diào)倍數(shù)為-3.6倍，基因芯片和qRT-PCR驗(yàn)證結(jié)果一致。
4. miR-122調(diào)控的靶基因有173個(gè)，miR-149調(diào)控的靶基因有445個(gè)。
4、5.173個(gè)miR-122調(diào)控的靶基因涉及的信號通路主要包括：Dicer、MAPK、FAS、AKT、ErbB、p53等6條信號通路；445個(gè)miR-149調(diào)控的靶基因涉及的的功能聚類主要包括：Cell cycle、Wnt、TGF-beta、p53、MAPK、Calcium、Apoptosis、AKT、Ras等10條信號通路。
結(jié)論：
1.通過基因芯片方法獲得了兒童過敏性紫癜病人和正常健康兒童血漿的差異 miRNAs表
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