生漆致癢機(jī)理初探.pdf

1、生漆憑借合成涂料無法比擬的優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國防、科技、民用等領(lǐng)域，素有“涂料之王”的美譽(yù)，但因其對人體的高致敏性，使得生漆在采集和應(yīng)用中存在諸多不便。大量研究已經(jīng)證明生漆的致敏活性是其所含漆酚類化合物所致?；颊咂ぱ滋帯捌姘W難忍”是生漆過敏的病理反應(yīng)之一，本論文為探究生漆過敏的致癢機(jī)理，進(jìn)行了以下研究工作：
　　采用石油醚萃取，硅膠柱層析粗分，MCI、ODS等填料以中壓制備色譜儀進(jìn)行純化，產(chǎn)物以1H-NMR、13C-NM

2、R、高分辨質(zhì)譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定的實(shí)驗(yàn)方法，分離得到一個三烯漆酚單體[3-(8'Z,11'E,13'Z-pentadecatrienyl)catechol]，用HPLC進(jìn)行純度表征，采用峰面積歸一法計算其純度達(dá)95％。
　　根據(jù)人對生漆過敏的臨床觀察結(jié)果，采用小鼠一次涂漆酚致急性皮炎的方法，通過皮膚腫脹度進(jìn)行劑量摸索最后確定漆酚涂藥方法為：純化得到的三烯漆酚用無水乙醇稀釋10倍，小鼠皮膚涂10μL(約1mg)。小鼠背頸部皮膚涂漆酚后第5

3、h時腫脹程度達(dá)到最大值，第24h時出現(xiàn)紅腫、滲出、潰爛等明顯炎癥癥狀。小鼠皮炎皮膚 HE染色顯示，漆酚致急性皮炎后導(dǎo)致皮膚中大量炎性細(xì)胞的聚集，依次出現(xiàn)水腫，潰爛，結(jié)痂，脫痂等癥狀，7~8天后皮損康復(fù)。用Elisa的方法對小鼠造模前后的血清和皮膚分別進(jìn)行相關(guān)炎癥因子的檢測，發(fā)現(xiàn)造模后血清中炎癥因子含量無顯著變化，而皮膚中TNF-α、IL-1β的表達(dá)升高，說明漆酚過敏為局部皮膚的炎癥反應(yīng)。行為實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明漆酚會導(dǎo)致小鼠急性皮炎既產(chǎn)生嚴(yán)重的

4、癢覺反應(yīng)又產(chǎn)生嚴(yán)重的痛覺反應(yīng)，且癢覺表現(xiàn)為皮炎出現(xiàn)前和皮炎出現(xiàn)后兩個相的抓撓行為。
　　通過鈣成像、實(shí)時熒光定量 PCR、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)的方法，發(fā)現(xiàn)漆酚引起小鼠急性皮炎產(chǎn)生的癢覺和TRPA1通道(transient receptor potential A1)相關(guān)。在小鼠用漆酚造模皮炎24h后，背根神經(jīng)節(jié)(DRG)中trpa1基因的表達(dá)下調(diào)， trpa1基因敲除小鼠抓撓次數(shù)明顯比野生型小鼠增加，且參與癢覺或痛覺形成