腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩表的改良應(yīng)用及LncRNA作為其新生物標(biāo)志物的初探.pdf

1、第一部分腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩表的改良與應(yīng)用研究
　　目前，心腦血管疾病已成為嚴(yán)重危害我國(guó)居民健康和加重居民疾病負(fù)擔(dān)的主要疾病。腦卒中具有高發(fā)病率、高病死率和高致殘率的特點(diǎn)，早期發(fā)現(xiàn)腦卒中的高危人群，進(jìn)行規(guī)范化管理，可減少或延緩卒中的發(fā)生。目前，在我國(guó)對(duì)腦卒中防控工作及“三早”干預(yù)效果仍不理想，大多數(shù)患者都是出現(xiàn)卒中征兆后才就診。為此，衛(wèi)生部于2012年啟動(dòng)“十二五”新醫(yī)改專項(xiàng)—全國(guó)“腦卒中篩查及防治項(xiàng)目”。在參與本課題開展過程中，我

2、們發(fā)現(xiàn)該項(xiàng)目所用的《腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩表》存在一些不足。因此，本課題擬對(duì)《2012衛(wèi)生部“十二五”新醫(yī)改專項(xiàng)…腦卒中篩查與防治項(xiàng)目腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩表》進(jìn)行改良，建立更有效的腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩預(yù)測(cè)模型，并應(yīng)用于社區(qū)居民的評(píng)估。
　　目的:
　　(1)通過病例對(duì)照調(diào)查，探討人群腦卒中發(fā)病的危險(xiǎn)因素，為腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩預(yù)測(cè)模型的改良提供重要參考依據(jù)。
　　(2)通過對(duì)《衛(wèi)生部“十二五”新醫(yī)改專項(xiàng)---腦卒中篩查與防治項(xiàng)目

3、腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩表》進(jìn)行改良，構(gòu)建更適合本地社區(qū)應(yīng)用的腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩評(píng)估工具。
　　(3)利用新構(gòu)建的腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩評(píng)估工具，評(píng)估中山市三鄉(xiāng)區(qū)40歲以上人群腦卒中危險(xiǎn)度和主要危險(xiǎn)因素，并提出有針對(duì)性的健康管理策略，為腦卒中高危人群篩查、健康管理和個(gè)性化預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:
　　(1)于2015年1-12月，選取在中山市三鄉(xiāng)醫(yī)院內(nèi)科確診并住院接受治療的200例腦卒中患者組成病例組,每入選一個(gè)病例，在3

4、0天內(nèi)（或更短時(shí)間內(nèi)）選擇相匹配（年齡、種族、性別、居住地相匹配）的對(duì)照,對(duì)照與病例采用1:3匹配的方法選取600名成年居民為對(duì)照組;采用自行設(shè)計(jì)的問卷對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行統(tǒng)一的問卷調(diào)查,用單因素分析和多因素Logistic回歸分析篩選出與腦卒中發(fā)生相關(guān)的危險(xiǎn)因素。
　　(2)采用文獻(xiàn)閱讀、現(xiàn)有資料分析等方法構(gòu)建腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩指標(biāo)體系框架；通過專家咨詢法（Delphi法）構(gòu)建評(píng)估指標(biāo)體系，修正指標(biāo)體系，確定權(quán)重，最后確立修訂的腦

5、卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩表。
　　(3)采取分層整群抽樣方法，2014年8月至2015年11月，在中山市三鄉(xiāng)鎮(zhèn)選取4個(gè)衛(wèi)生站（江南、雅居樂、烏石、雍陌）^40歲常住居民2828人,采用本研究構(gòu)建的《腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩新表》進(jìn)行問卷調(diào)查、體格檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查，進(jìn)行腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。
　　結(jié)果:
　　1.腦卒中相關(guān)性危險(xiǎn)因素分析
　　(1)在腦卒中危險(xiǎn)因素中，病例組的高血壓（79.0％)、血脂異常（63.0%)、糖尿?。?

6、5.5%)、房顫或瓣膜性心臟?。?4.0%)、腦卒中家族遺傳史（14.0%)、吸煙史（42.5%)以及體育鍛煉很少（60.0%)高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。（2)多因素條件Logistic回歸分析顯示，高血壓（〇R=6.041)、糖尿?。∣ R=4.927)、房顫或瓣膜性心臟?。∣R=18.233)、體育鍛煉很少(OR=2.232)、吸煙史（〇R=3.304)和血脂異常（OR=2.396)是腦卒中發(fā)病的主要影響因素。<

7、br>　　2.腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩表的改良研究
　　(1)選取21名專家參與了兩輪的專家咨詢，咨詢結(jié)果顯示：第1輪、第2輪咨詢的專家積極系數(shù)分別為84%、91.3%。專家權(quán)威系數(shù)為0.771;協(xié)調(diào)系數(shù)為0.57。(2)通過兩輪專家咨詢構(gòu)建了包含主要危險(xiǎn)因素和一般危險(xiǎn)因素共13個(gè)指標(biāo)新的腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩模型，除腦卒中及T IA外，其中主要危險(xiǎn)因素為高血壓、血脂異常、糖尿病及房顫或瓣膜性心臟病四項(xiàng)，一般危險(xiǎn)因素為年齡>50、男性、吸煙

8、、飲酒、體育鍛煉很少、體重超重或肥胖及腦卒中家族史七項(xiàng)。評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)，改良的初篩表信度和效度滿意，能用于后續(xù)研究。
　　3.社區(qū)居民腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及干預(yù)策略研究
　　(1)腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估人群分布情況：被評(píng)估的2828人中，高危人群784例(占27.7%)，中危人群856例（30.3%)，低危人群1188例（42.0%)。高危人群中既往有腦卒中或短暫性腦缺血發(fā)作病史者24例。
　　(2)高、中、低危人群危險(xiǎn)因素暴露率

9、分布情況：在784例高危人群中，主要危險(xiǎn)因素暴露率從尚到低分別為尚血壓（93.4%)、血脂異常（65.7%)、糖尿?。?9.6%)、房顏或_膜性心臟?。?0.0%);在856例中危人群中，分別為血脂異常（32.6%)、糖尿?。?5.1%)、高血壓（12.9%)、房顫或瓣膜性心臟?。?.9%)；高、中、低危人群一般危險(xiǎn)因素暴露率從高到低排列分別為：年齡>50歲、體育鍛煉很少、男性、體重超重或肥胖、吸煙、腦卒中家族史、飲酒、房顫或瓣膜性心臟

10、病。
　　(3)腦卒中高危人群各危險(xiǎn)因素共患情況：主要危險(xiǎn)因素一項(xiàng)的人數(shù)為554例(占19.6%)，有兩項(xiàng)的762例（占26.9%)，有三項(xiàng)的10例（占0.3%);—般危險(xiǎn)因素有一項(xiàng)的人數(shù)為903人（占31.9%)，有兩項(xiàng)的1094例（38.7%)，有三項(xiàng)的582例（占20.6%)，有四項(xiàng)的人數(shù)為87例（占3.1%)
　　結(jié)論:
　　1.腦卒中病例對(duì)照研究顯示：本地區(qū)居民腦卒中的主要發(fā)病危險(xiǎn)因素為高血壓、糖尿病、房顫或

11、瓣膜性心臟病、體育鍛煉很少、吸煙史、血脂異常。
　　2.本研究成功改良了腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩預(yù)測(cè)模型，比舊表新增3個(gè)指標(biāo)，并根據(jù)各個(gè)危險(xiǎn)因素指標(biāo)權(quán)重不同，分為主要危險(xiǎn)因素（高血壓、血脂異常、糖尿病、房顫或瓣膜性心臟?。┘耙话阄ｋU(xiǎn)因素（年齡>50、男性、吸煙、飲酒、體育鍛煉很少、體重超重或肥胖）。經(jīng)過新、舊表的對(duì)比，本初篩評(píng)估表內(nèi)容較為全面，評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)單易懂，容易操作。
　　3.經(jīng)過腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)初篩評(píng)估發(fā)現(xiàn)，中山市三鄉(xiāng)社區(qū)居民

12、腦卒中危險(xiǎn)度較高，應(yīng)加強(qiáng)腦卒中高危人群健康管理工作，進(jìn)行有針對(duì)性的健康行為干預(yù)措施，以有效預(yù)防腦卒中的發(fā)生。
　　第二部分LncRNA作為腦卒中新生物標(biāo)志物的初探
　　目的:
　　(1)通過檢測(cè)腦卒中患者和對(duì)照人群的外周血白細(xì)胞中LncRNA-ANRIL和MIAT的表達(dá)，分析LncRNA與腦卒中發(fā)病的關(guān)系。
　　(2)探索LncRNA作為腦卒中新生物標(biāo)志物的可能性。
　　方法:
　　(1)采用以醫(yī)院為

13、基礎(chǔ)的病例對(duì)照研究方法。選取2015年1月-2015年12月在深圳市2家綜合性三甲醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)外科收治的172例腦卒中患者作為病例組。對(duì)照與病例采用1:1匹配的方法，按照年齡（±5歲）、種族、性別相同的頻數(shù)匹配。所選對(duì)照組均來自同期2家深圳醫(yī)院172例健康體檢者。
　　(2)腦卒中危險(xiǎn)因素的調(diào)查采用自行設(shè)計(jì)的調(diào)查表，由經(jīng)過專門培訓(xùn)的調(diào)查員對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行調(diào)查，內(nèi)容包括基本情況、腦卒中家族史、吸煙、飲酒、體重超重或肥胖等；同時(shí)于研究對(duì)象

14、入院次日清晨采集空腹靜脈血2mL，4 h之內(nèi)提取總RNA，進(jìn)行qPCR技術(shù)檢測(cè)外周血中LncRNA-ANRIL和M IA T的表達(dá)情況。(3)采用SPSS17.0軟件處理系統(tǒng)對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。LncRNA-ANRIL、M IA T的相對(duì)含量以mean±SD表示，兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。診斷價(jià)值用R O C曲線（受試者工作特征曲線）的不同AUC(曲線下面積）來評(píng)價(jià)。
　　結(jié)果:
　　(1)

15、病例-對(duì)照中LncRNA-ANRIL和M IA T的表達(dá)情況
　　ANRIL在病例組的外周血白細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量為3.8751±2.1545，在對(duì)照組中相對(duì)表達(dá)量為2.2701±1.6741;MIAT在病例組的外周血白細(xì)胞中相對(duì)表達(dá)量為0.3922±0.1716，在對(duì)照組中相對(duì)表達(dá)量為0.03726±0.02558，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05)。
　　(2)腦卒中人群暴露危險(xiǎn)因素與LncRNA-ANRIL、MIAT表達(dá)水平

16、r>　　在腦卒中人群主要危險(xiǎn)因素中，有糖尿病疾病史ANRIL、MIAT相對(duì)表達(dá)量最高，分別為4.510牡2.1787，0.4245±0.1639;—般危險(xiǎn)因素中，有腦卒中家族遺傳史的ANRIL相對(duì)表達(dá)量最高，為4.5275±2.1955，男性MIAT相對(duì)表達(dá)量最高，為0.5414±0.1173; ARIL和MIAT分別與血脂異常、年齡>50歲、男性以及腦卒中家族遺傳史有相關(guān)性。
　　(3) LncRNA-ANRIL、MIAT對(duì)腦卒

17、中潛在診斷價(jià)值分析
　　ANRIL ROC曲線面積為0.732(95%CI：0.679-0.785)，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.027;MIAT ROC曲線面積為0.997(95%CI：0.993-1)，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.002。
　　結(jié)論:
　　(1)腦卒中患者外周血白細(xì)胞中ANRIL和MIAT呈現(xiàn)高表達(dá)，這兩個(gè)LncRNA的表達(dá)與腦卒中發(fā)病具有關(guān)聯(lián)性。
　　(2) ANRIL和MIAT可能是腦卒中發(fā)病或高危人群篩選的潛在新生物標(biāo)