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文檔簡介
1、齲病是常見口腔疾病之一。除根部齲外,絕大部分齲損都從釉質(zhì)開始,故研究釉質(zhì)齲的發(fā)病機制對于齲病的防治十分重要。齲病的早期表現(xiàn)為釉質(zhì)脫礦形成白堊色病變,以后,由于色素沉著,白色斑塊狀病變有黃棕色色素沉著,并向周圍組織擴展,病變區(qū)逐漸變得粗糙,最終組織崩潰,齲洞形成。在齲病防治中,早期未形成齲洞可采用再礦化療法進行治療;形成齲洞后需進行充填治療。因此,齲病的早期預(yù)防和控制尤為重要?,F(xiàn)有針對釉質(zhì)脫礦常采用的再礦化材料主要有氟化物溶液、含氟涂料、
2、含氟牙膏等。然而過高濃度的氟又存在潛在毒副作用。故尋找安全有效的再礦化制劑尤為重要。
根據(jù)已有研究,谷氨酸(glutamic acid,Glu)作為有機模板對于牙釉質(zhì)再礦化的作用已被證實,在高濃度Glu存在下,其有效絡(luò)合溶液中的鈣離子,從而大幅度降低溶液的過飽和度,最終抑制了磷酸鈣的生成,但在一定范圍內(nèi)Glu濃度越高,促進礦化效果越明顯[1]。前期研究證實含有谷氨酸和聚丙烯酸(polyacrylic acid,PAA)的仿生策
3、略能促進脫礦牙本質(zhì)的仿生再礦化[2],據(jù)此我們推測,含有谷氨酸和聚丙烯酸的礦化液同樣能促進牙釉質(zhì)的仿生再礦化。
目的:
通過Glu調(diào)控PAA穩(wěn)定的無定形磷酸鈣(amorphous phosphate calcium,ACP)的結(jié)晶動力學(xué),加快脫礦牙釉質(zhì)的仿生再礦化。
方法:
本實驗分為兩部分,首先應(yīng)用含相同濃度Glu但不同濃度的PAA調(diào)控ACP的結(jié)晶動力學(xué),并將合成的ACP顆粒應(yīng)用于脫礦牙釉質(zhì)的仿
4、生再礦化。通過掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscope, SEM)、透射電鏡(TransmissionElectron Microscope,TEM)表征合成的ACP的相變時間以及再礦化牙釉質(zhì)形貌及結(jié)構(gòu)。最后應(yīng)用顯微硬度儀檢測再礦化牙釉質(zhì)層的顯微機械性能。
1.將新近因正畸治療拔除的牙體去凈軟垢、牙石和軟組織,用硬組織切片機切割為0.5×0.5×0.2cm3大小的牙釉質(zhì)片,共計40個樣本,放入超
5、聲清洗機中清洗10min,干燥后涂布臨床用37%磷酸酸蝕劑輕酸蝕60S,用去離子水反復(fù)沖洗后自然干燥,將牙釉質(zhì)片隨機分為4組(N=10),放入含有濃度為0μg/ml、50μg/ml、200μg/ml、350μg/ml的PAA再礦化液的礦化液中,Glu濃度均為20mmol/L,置于37.5℃恒溫水浴箱中培養(yǎng)一周,根據(jù)掃描電鏡結(jié)果選擇出礦化結(jié)果最好的PAA濃度a。
2.設(shè)置實驗組和對照組PAA濃度分別為a和0μg/ml,每組10個
6、牙釉質(zhì)片,按照既定的時間點取樣,選擇出牙釉質(zhì)最短礦化時間。
3.應(yīng)用顯微硬度儀檢測實驗組和對照組不同礦化時間點的再礦化牙釉質(zhì)的顯微機械性能。
結(jié)果:
1.掃描電鏡顯示:PAA濃度為0μg/ml礦化7天的釉質(zhì)表面,可見一層疏松的無規(guī)則礦化物,PAA濃度分別為50、200、350μg/ml礦化7天釉質(zhì)表面均可見到順著釉質(zhì)天然結(jié)構(gòu)形成的一層魚鱗狀再礦化物,且隨著PAA濃度的升高,魚鱗狀結(jié)構(gòu)愈為明顯。
2
7、.PAA濃度為50μg/ml,礦化3h時,溶液中晶體TEM圖片,可見ACP由無定形狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榈湫推瑺盍u基磷灰石形貌;礦化24h時牙釉質(zhì)片SEM圖片,可見牙釉質(zhì)表面形成了一層致密的與天然牙釉質(zhì)結(jié)構(gòu)類似的短棒狀晶體。PAA濃度為0μg/ml,礦化24h時牙釉質(zhì)片SEM圖片,可見牙釉質(zhì)表面也形成了一層薄片狀的晶體。
3.經(jīng)過1-7天礦化后,各組的釉質(zhì)表面顯微硬度值都有不同程度提高,且都隨再礦化時間的延長而增加,相同時間點時,含PAA
8、的實驗組硬度恢復(fù)顯著高于對照組(P<0.05),實驗組第一天硬度就恢復(fù)了約30%,以后隨礦化時間延長緩慢增加。對照組整體都隨礦化時間延長而緩慢增加。
結(jié)論:
本實驗證實了PAA在釉質(zhì)再礦化過程中與Glu的促進作用,PAA濃度越高,生成的晶體結(jié)構(gòu)愈具規(guī)則。含有50ug/mlPAA的礦化液,其中Glu濃度均為20mmol/L能在24h時完成脫礦牙釉質(zhì)的仿生再礦化。并且含PAA的實驗組形成的再礦化牙釉質(zhì)的顯微機械性能較對照
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