瘦素受體基因rs1137101位點(diǎn)多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性研究.pdf

1、本文分為兩個(gè)部分進(jìn)行探討：
　　第一部分 瘦素受體基因rs1137101位點(diǎn)多態(tài)性與2型糖尿病的Meta分析
　　目的：采用Meta分析的方法綜合系統(tǒng)地評(píng)價(jià)瘦素受體基因rs1137101位點(diǎn)多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)關(guān)系。
　　方法：通過(guò)檢索CNKI、CBM、Pubmed、萬(wàn)方等數(shù)據(jù)庫(kù)收集相關(guān)文獻(xiàn)，采用stata.11軟件進(jìn)行Meta分析。
　　結(jié)果：最終納入10篇病例對(duì)照文獻(xiàn)，6324例研究對(duì)象，其中2型糖尿病患

2、者3633例，對(duì)照組2691例。Meta分析結(jié)果顯示，病例組和對(duì)照組基因頻率分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，攜帶A等位基因者可能增加T2DM的患病風(fēng)險(xiǎn)[A vs G：OR(95％CI)=1.599(1.337，1.913)]，病例組和對(duì)照組基因型分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[AA vs GG：OR(95%CI)=1.069(0.787，1.453)：(AA+AG)vs GG：OR(95%CI)=1.040(0.905，1.194)：AA vs(GG+A

3、G)：OR(95%CI)=0.995(0.798，1.239)]。按種族進(jìn)行亞組分析，在等位基因模式下，黃種人群攜帶A等位基因者是攜帶G等位基因者的1.808倍（OR(95%CI)=1.808(1.571，2.081)），白種人群攜帶A等位基因者是攜帶G等位基因者的1.261倍（OR(95%CI)=1.261(1.052，1.511)，病例組和對(duì)照組基因型分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[黃種人AA vs GG：OR(95%CI)=1.020(0

4、.620，1.679)：AA vs(AG+GG)：OR(95%CI)=1.032(0.892，1.194);(AA+AG)vs GG：OR(95%CI)=1.019(0.875，1.187);白種人：AA vs GG：OR(95%CI)=1.101(0.746，1.623)：AA vs(AG+GG)：OR(95%CI)=0.990(0.775，1.265);(AA+AG)vs GG：OR(95%CI)=1.144(0.818，1.600

5、)]。
　　結(jié)論：LEPRrs1137101位點(diǎn)多態(tài)性與2型糖尿病存在關(guān)聯(lián)，等位基因A可能會(huì)增加2型糖尿病的患病風(fēng)險(xiǎn)。
　　第二部分 瘦素受體基因rs1137101位點(diǎn)多態(tài)性與2型糖尿病關(guān)系的病例對(duì)照研究
　　目的：探討瘦素受體基因rs1137101位點(diǎn)多態(tài)性與2型糖尿病易感性的關(guān)系。
　　方法：1.隨機(jī)選取2010年5月至2011年12月在內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院、內(nèi)蒙古中蒙醫(yī)醫(yī)院內(nèi)分泌科確診的2型糖尿病住院患9

6、4例，收集同期于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院參加體檢的年齡相匹配的健康人員105例作為對(duì)照，研究對(duì)象均簽署知情同意書(shū)；
　　2.收集病歷資料，一般資料包括姓名、性別、民族、年齡、身高、體重、家族遺傳史、高血壓史等。研究對(duì)象的臨床生化指標(biāo)如收縮壓、舒張壓、空腹血糖、空腹胰島素、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯，空腹C肽等在內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科測(cè)定；
　　3.瘦素受體基因位點(diǎn)多態(tài)性的檢測(cè)①基因組DNA的提?。呵宄靠崭褂肊D

7、TA抗凝管抽取外周靜脈血2ml，采用AXYGEN全血DNA快速提取試劑盒（200次量）提取全血基因組DNA，電泳鑒定基因組DNA純度；②采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)‐限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCR‐RFLP）方法檢測(cè)瘦素受體基因rs1137101位點(diǎn)多態(tài)性：PCR擴(kuò)增相應(yīng)的目的基因，PCR反應(yīng)總體系25μl。按照如下反應(yīng)條件在PCR熱循環(huán)儀上擴(kuò)增：95℃預(yù)變性2分鐘，95℃變性45秒，56℃退火30秒，72℃延伸45秒，共進(jìn)行30個(gè)循環(huán)，最后72℃

8、延伸10分鐘；④使用1%瓊脂糖進(jìn)行電泳，穩(wěn)壓80伏電泳20分鐘，在紫外燈下通過(guò)觀察DNA分子發(fā)出的熒光而判斷其片段大小，rs1137101基因純合子GG型產(chǎn)生291bp和127bp兩個(gè)條帶，純合子AA型產(chǎn)生421bp一條條帶，而雜合子AG產(chǎn)生421bp291bp127bp三條條帶。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（百分比）表示。分析病例組與對(duì)照組之間

9、基本臨床資料的差異，兩組計(jì)量資料比較如服從正態(tài)分布采用獨(dú)立t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布采用秩和檢驗(yàn)。采用x2檢驗(yàn)比較兩組間定性資料，采用x2檢驗(yàn)分析各組基因型分布是否符合Hardy‐Weinberg(H‐W)遺傳平衡，采用4種遺傳分析模型分析LEPRrs1137101等位基因及基因型頻率在兩組間的分布。應(yīng)用多因素非條件Logistic回歸計(jì)算比值比（Odds Ratio,OR）及其95%可信區(qū)間（Confidence Interval,CI）評(píng)估

10、年齡、家族遺傳史、高血壓史等與2型糖尿病患病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。
　　結(jié)果：1.T2DM患者年齡為（54.71±1.71）歲，正常對(duì)照組年齡為（53.50±7.37）歲，兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;2型糖尿病患者中男性59例（62.77%），女性
　　35例（37.23%），正常對(duì)照組中男性75例（71.43%），女性30例（28.57%），兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；LEPRrs1137101基因型分布頻率

11、符合Hardy‐Weinberg(H‐W)遺傳平衡（病例組：x2=2.363，P＞0.05；對(duì)照組：x2=1.588，P＞0.05）；
　　2.logistic回歸顯示，高血壓史、高舒張壓、家族遺傳史、肥胖、甘油三酯、異?？崭笴肽是2型糖尿病的危險(xiǎn)因素（OR值分別為1.969,2.012,2.676,2.264,2.257,3.673）；
　　3.通過(guò)比較在4種模型下基因型在兩組間的分布差異，結(jié)果均顯示不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[(A

12、A+AG)vs GG：x2=0.499，P=0.480；AA vs(AG+GG)：x2=0.000,P=1；(AA+GG)vs AG：x2=0.483，P=0.487；A vs G：x2=0.408，P=0.523]。
　　結(jié)論：1.遺傳史、高血壓、肥胖是2型糖尿病的危險(xiǎn)因素，空腹C肽不僅是胰島β細(xì)胞的檢測(cè)指標(biāo)，其在2型糖尿病發(fā)病過(guò)程中可能起保護(hù)作用。
　　2.未發(fā)現(xiàn)瘦素受體基因rs1137101位點(diǎn)多態(tài)性與T2DM存在關(guān)聯(lián)