黔產(chǎn)莪術(shù)品質(zhì)及揮發(fā)油對(duì)直腸癌SW1463細(xì)胞血管生成因子影響的研究.pdf

1、目的：通過對(duì)黔產(chǎn)莪術(shù)的顯微、理化特性進(jìn)行研究，判定黔產(chǎn)莪術(shù)是否符合中國藥典要求，從而判定其能否作為莪術(shù)原料藥材使用；研究黔產(chǎn)莪術(shù)油對(duì)人直腸癌SW1463細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和趨化因子蛋白表達(dá)的影響，探討莪術(shù)揮發(fā)油對(duì)腫瘤血管生成的作用機(jī)制。
　　方法：參照《中國藥典》2010版一部附錄有關(guān)顯微、薄層鑒定及吸光度、水分、灰分、浸出物、有效成分含量等檢測方法進(jìn)行測定。將經(jīng)水蒸氣蒸餾提取的莪術(shù)揮發(fā)油，配制成40、80、120、

2、160、200、240、280μg/mL等不同濃度，采用四氮唑鹽（MTT）比色法檢測不同濃度莪術(shù)油干預(yù)直腸癌SW1463細(xì)胞24、48、72h后對(duì)細(xì)胞增殖抑制的影響，計(jì)算莪術(shù)油對(duì)細(xì)胞的抑制率及IC50；于倒置顯微鏡下觀察不同濃度莪術(shù)油對(duì)直腸癌SW1463細(xì)胞的形態(tài)學(xué)影響；采用免疫細(xì)胞化學(xué)和蛋白免疫印跡法（Western Blot）分別檢測直腸癌SW1463細(xì)胞中VEGF、趨化因子IL-8和受體CXCR2、CXCR3蛋白的表達(dá)。
　

3、　結(jié)果：黔產(chǎn)莪術(shù)符合廣西莪術(shù)顯微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，吸光度高于0.45，水分少于14.0％，總灰分低于7.0%，酸不溶性灰分低于2.0%，醇溶性浸出物高于7.0%，揮發(fā)油含量高于1.5%。MTT檢測發(fā)現(xiàn)莪術(shù)油對(duì)SW1463細(xì)胞增殖有一定的抑制作用，并呈劑量依賴性，24、48、72h半數(shù)抑制率分別為128.30±9.55、122.93±10.82、120.77±1.61（μg/mL）。莪術(shù)油處理直腸癌SW1463細(xì)胞24h后，細(xì)胞中促血管生成因子V

4、EGF、IL-8、CXCR2蛋白表達(dá)量下調(diào)，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），莪術(shù)油能抑制腫瘤細(xì)胞VEGF、IL-8、CXCR2蛋白的表達(dá)；而細(xì)胞中抑制血管生成趨化因子CXCR3蛋白表達(dá)量上調(diào)，與陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），莪術(shù)油能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞CXCR3蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.黔產(chǎn)莪術(shù)顯微、理化特性符合《中國藥典》2010版的規(guī)定；
　　2.不同濃度黔產(chǎn)莪術(shù)揮發(fā)油可抑制直腸癌S