神經(jīng)元性一氧化氮合酶在電針調(diào)節(jié)抑郁癥雙重狀態(tài)的作用研究.pdf

1、目的:初步探討神經(jīng)元性一氧化氮合酶(nNOS)對電針調(diào)節(jié)抑郁癥雙重狀態(tài)-焦慮和抑郁樣行為的影響。
　　方法:實驗一:將SD大鼠(84只)隨機分為6組:正常組（1和2）、焦慮組、抑郁組、電針抗焦慮組和電針抗抑郁組。分別采用慢性溫和不可預知應激(CUMS)7天和21天結合孤養(yǎng)方法制備焦慮和抑郁樣模型，正常組（1和2）不予任何干預，造模同時電針治療抗焦慮和抗抑郁組，選擇“百會”和“印堂”穴，頻率分別為100Hz和2Hz、電流強度約為1m

2、A，留針15min，每日一次，分別連續(xù)治療7天和21天。
　　實驗二:將SD大鼠(24只)隨機分為3組:正常組(Control)、足底電擊組(FootshockFS)、電針抗足底電擊組(EA-FS)。采用足底電擊結合孤養(yǎng)的方法制備焦慮樣模型，電針“百會”和“印堂”穴，頻率100Hz，電流強度約為1mA，留針15min，每日1次，連續(xù)治療7天。
　　治療結束后，采用高架十字迷宮實驗（EPM評分）評價焦慮樣行為、開野實驗(Ope

3、n-field)、體重、糖水相對消耗量等評價抑郁樣行為，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)、蛋白免疫印跡(Western-Blet)和免疫組化方法分別檢測各組大鼠海馬神經(jīng)元型一氧化氮合酶(Neuronal Nitric Oxide Synthase，nNOS)表達和CA3、CA1區(qū)蛋白的表達。
　　結果:實驗一:1.行為學測試:高架十字迷宮實驗（EPM評分）:與正常組1比較，大鼠接受CUMS7天后在開臂/（開臂+閉臂）的時間和次數(shù)

4、百分比顯著降低(P＜0.01)，電針能夠使其升高(P＜0.01);與正常組2比較，開野實驗(Open-field)中大鼠接受CUMS21天后其水平運動距離和中央探索次數(shù)百分比均顯著下降(P＜0.01)，電針能夠使其顯著性提高(P＜0.01);體重測量:與正常組2比較，造模第7天，抑郁組和電針抗抑郁組體重均有下降趨勢，但兩組間無統(tǒng)計學差異，第14、21天抑郁組體重減少(P＜0.01)，電針可以使其增加(P＜0.05);糖水相對消耗量實驗:

5、與正常組2比較，造模第7天，抑郁組糖水相對消耗量稍有下降，但無統(tǒng)計學差異，第14、21天抑郁組糖水相對消耗量降低(P＜0.01)，電針能夠使顯著升高(P＜0.05);2.RT-PCR顯示，焦慮和抑郁組海馬nNOS mRNA表達均低于正常組（1和2），電針均可以升高其表達;3.蛋白免疫印跡(Western-Blet)顯示，焦慮和抑郁組海馬nNOS蛋白表達均低于正常組（1和2），電針均能夠升高其表達;4.免疫組化顯示，與正常組（1和2）比較

6、，焦慮和抑郁組海馬CA3和CA1區(qū)nNOS平均光密度和累計光密度值均顯著降低(P＜0.05)，電針可以使其表達提高(P＜0.05);
　　實驗二:1.行為學測試:高架十字迷宮實驗（EPM評分）:與正常組(Control)比較，大鼠接受足底電擊7天后在開臂/（開臂+閉臂）的時間和次數(shù)百分比顯著降低(P＜0.05)，電針能夠使其升高(P＜0.05);2.RT-PCR顯示，足底電擊組(FS)海馬nNOS mRNA表達高于正常組（Cont

7、rol），電針可以降低其表達;3.免疫組化顯示，與正常組(Control)比較，足底電擊組(FS)海馬CA3區(qū)nNOS平均光密度和累計光密度值均顯著升高(P＜0.05)，電針可以使其恢復性下調(diào)(P＜0.05)，而CA1區(qū)nNOS平均光密度和累計光密度值均顯著降低(P＜0.01)，電針可以升高其表達(P＜0.01)。
　　結論:抑郁癥在不同的應激時程—慢性應激早期（CUMS7天）和晚期（CUMS21天）表現(xiàn)出不同的狀態(tài)，即焦慮和抑郁