大鼠臂旁核內(nèi)神經(jīng)元型一氧化氮合酶參與內(nèi)臟傷害性刺激傳導(dǎo)的研究.pdf

1、目的：1.觀察內(nèi)臟傷害性刺激后，大鼠臂旁核(PBN)內(nèi)被激活神經(jīng)元的亞核定位情況；2.探討PBN內(nèi)神經(jīng)元型一氧化氮合酶(nNOS)是否參與對內(nèi)臟傷害性刺激傳導(dǎo)過程的調(diào)節(jié)；3.探討臂旁核-中央杏仁核通路(PBN-CeA)是否參與對內(nèi)臟傷害性刺激的上傳過程，并闡明nNOS是否參與了對此傳導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)。 方法：1.給予大鼠2﹪福爾馬林溶液灌胃后，用Fos蛋白免疫組織化學(xué)方法觀察PBN內(nèi)Fos陽性神經(jīng)元在各亞核內(nèi)的分布情況；2.用還原

2、型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(NADPH-d)組織化學(xué)結(jié)合Fos蛋白免疫組織化學(xué)雙重染色的方法，觀察內(nèi)臟傷害性刺激后，F(xiàn)os陽性神經(jīng)元和nNOS陽性神經(jīng)元及纖維在PBN各亞核內(nèi)的分布與共存情況；3.大鼠CeA內(nèi)注射熒光金(FG)后，用FG、Fos免疫熒光結(jié)合NADPH-d組織化學(xué)三標(biāo)染色的方法，觀察內(nèi)臟傷害性刺激后Fos、FG和nNOS在PBN內(nèi)的分布及共存情況。 結(jié)果：1.同本實(shí)驗(yàn)室既往觀察結(jié)果類似，在正常大鼠PBN內(nèi)具有

3、NADPH-d的廣泛分布：TypeⅠ型NADPH-d陽性神經(jīng)元顏色深染、突起較長，主要分布在PBN的嘴側(cè)部分；TypeⅡ型NADPH-d陽性神經(jīng)元染色較淡，突起較短，主要沿PBN的背外側(cè)界分布；PBN嘴側(cè)可見大量的近似水平方向走行的纖維束穿過小腦上腳(scp)，臂旁外側(cè)核外亞核(PBel)內(nèi)可見密集點(diǎn)狀分布的NADPH-d陽性纖維終末。2.內(nèi)臟傷害性刺激后，F(xiàn)os陽性神經(jīng)元在PBN內(nèi)的分布具有亞核特異性：PBel、K-F核和臂旁外側(cè)核背

4、亞核(PBdl)有大量分布；臂旁外側(cè)核中央亞核有少量分布；其余各亞核偶見或未見分布。3.內(nèi)臟傷害性刺激后，PBN內(nèi)NADPH-d與Fos陽性神經(jīng)元有三種不同的共存方式：(1)在PBdl內(nèi)，部分TypeⅠ型NADPH-d陽性神經(jīng)元發(fā)出長的突起緊貼鄰近Fos陽性神經(jīng)元的胞體，但未見其與Fos形成雙標(biāo)神經(jīng)元；(2)在PBdl內(nèi)，TypeⅡ型NADPH-d陽性神經(jīng)元與Fos陽性神經(jīng)元相互交錯(cuò)分布，并可見少量Fos/NADPH-d雙標(biāo)神經(jīng)元；(3

5、)在PBel內(nèi)，密集、深染的NADPH-d陽性纖維終末與Fos陽性神經(jīng)元呈混雜分布。4.PBN內(nèi)FG逆行標(biāo)記的神經(jīng)元主要分布于PBel；內(nèi)臟傷害性刺激后，PBel內(nèi)Fos/FG雙標(biāo)神經(jīng)元較對照組明顯增加；Fos/FG雙標(biāo)神經(jīng)元與NADPH-d陽性纖維終末呈混雜分布，但未見Fos/FG/NADPH-d三標(biāo)神經(jīng)元。 結(jié)論：1.內(nèi)臟傷害性刺激能夠特異性激活PBN內(nèi)PBel、PBdl和K-F核中的神經(jīng)元；2.nNOS在PBN各亞核內(nèi)的