睪酮受體蛋白表達水平改變在高血壓血管重構(gòu)中的作用.pdf

1、背景：
　　高血壓血管損害——血管重構(gòu)(vascularremodeling,VR)是近年高血壓病研究的熱點之一，其發(fā)生是一個動態(tài)變化進展的過程，包括腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensinsystem,RAS)、細胞因子和生長因子等活性物質(zhì)的合成、釋放，細胞的增殖、肥大、遷移、凋亡，基質(zhì)成分的合成、分泌、降解、重新排布，最終產(chǎn)生血管壁結(jié)構(gòu)的改變。組織形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為血管管壁增厚、平滑肌細胞增生肥大且排列紊亂、彈性纖

2、維排列紊亂、管腔內(nèi)徑減小、中層壁厚與管腔內(nèi)徑比值增大等。從血流動力學(xué)角度看，VR對高血壓的維持、發(fā)展起至關(guān)重要的作用，也是決定血管管腔面積的重要因素，該變化促進動脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）、冠心病、心室肥厚、心力衰竭等疾病的發(fā)生發(fā)展。因此，對高血壓VR的分子機制進行深入探討意義重大，有效的預(yù)防及逆轉(zhuǎn)VR的發(fā)生將對多種心血管疾病產(chǎn)生有益的影響。
　　睪酮是男性體內(nèi)最重要的雄性激素之一。除維持男性正常生理功能（

3、如胚胎期誘導(dǎo)男性生殖器官的形成，青春期促進男性第二性征的發(fā)育，青春期之后維持男性生育功能等）之外，還對機體的糖脂代謝、蛋白質(zhì)合成、炎癥反應(yīng)、促紅細胞生成素分泌、骨骼密度及強度、肌肉生長、電解質(zhì)排泄等產(chǎn)生影響。然而這些功能的實現(xiàn)大多需要睪酮受體（androgenreceptor,AR）的介導(dǎo)，AR是配體調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子，屬于核受體超家族成員中類固醇受體。AR主要存在于胞漿中，并與熱休克蛋白(heatshockprotein,HSP)等伴侶蛋

4、白結(jié)合，與睪酮結(jié)合后被活化，作為轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，指導(dǎo)特定蛋白質(zhì)的合成，調(diào)節(jié)細胞的生長、分化、增殖。
　　絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinases,MAPKs）是高度保守的細胞外信號傳導(dǎo)分子，廣泛分布于細胞漿中，調(diào)控細胞的生長、分化及增殖。既往研究已證實AR與MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路偶聯(lián)，參與了高血壓左室重構(gòu)、動脈粥樣硬化、血栓形成、前列腺癌、卵巢癌及乳腺癌等多種疾病的發(fā)生?；罨腗

5、APKs主要被其磷酸酶去磷酸化而滅活，其中絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（mitogen-activatedproteinkinasephosphatase-1,MKP-1）是MAPK信號通路最重要的特異性負性調(diào)節(jié)磷酸酶。在高血壓VR過程中，是否存在AR表達水平的改變？其可能的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制是什么？目前國內(nèi)外研究很少報道。
　　目的：
　　觀察腎血管性高血壓大鼠主動脈組織上AR蛋白表達水平的改變，及其對高血壓VR的影響，并進一步

6、探討其可能的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制。
　　方法：
　　28日齡雄性Wistar大鼠30只，隨機分為3組（每組10只）：正常對照組、假手術(shù)對照組、腎血管性高血壓組。高血壓組采用“兩腎一夾”法建立腎血管性高血壓大鼠模型。Tail-Cuff法測量大鼠尾動脈收縮壓（systolicbloodpressure,SBP），蘇木精伊紅（HE）染色觀察主動脈組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，圖像分析系統(tǒng)測定血管重構(gòu)的指標：血管內(nèi)膜中層厚度(mediathickness,

7、MT)、管腔內(nèi)徑(lumendiameter,LD)、內(nèi)膜中層厚度/管腔內(nèi)徑(mediathickness/lumendiameter,MT/LD)，免疫組織化學(xué)染色法檢測3組大鼠主動脈組織上AR和MKP-1蛋白表達水平。
　　結(jié)果：
　　1.正常對照組造模前后SBP差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），主動脈無明顯的VR；
　　2.假手術(shù)對照組造模前后SBP差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；與正常對照組相比，假手術(shù)對照組

8、主動脈形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯改變，AR及MKP-1蛋白表達水平差異無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）；
　　3.高血壓組造模前后SBP差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F組間=1211.779，F(xiàn)時間=1613.225，F(xiàn)交互=1537.050，P＜0.001；與正常對照組相比，P＜0.001），主動脈發(fā)生VR，AR和MKP-1蛋白表達水平較正常對照組及假手術(shù)對照組明顯下降（P＜0.001）；
　　4.AR與MKP-1蛋白表達下降在高血壓組呈正相關(guān)（r＝