Inhibition of chemically induced mouse colitis with polysaccharide extracted from Agaricus blazei Murill(ABM).pdf

1、炎癥性腸病(IBD)是一個(gè)世界性的問題，是由于免疫功能障礙及不明病因的膜屏障損傷而引起的疾病。IBD發(fā)病率隨著年齡的增長(zhǎng)而增長(zhǎng)，同時(shí)也會(huì)隨著社會(huì)環(huán)境因素的改變而變化。目前對(duì)于IBD的治療方法十分有限，通常采用抗生素、氨基水楊酸、糖皮質(zhì)激素或免疫調(diào)節(jié)劑進(jìn)行治療，可是對(duì)于患者其藥物的副作用和可能引起的其他作用并不良好。因此，在這種治療背景下，對(duì)于這個(gè)世界性的疾病問題，更有療效的治療方法、更安全的治療方案的探索也更為迫切。在早期文明中，蘑菇被

2、認(rèn)為是一種特殊的美昧食材，同時(shí)被視為具有營(yíng)養(yǎng)藥用價(jià)值的植物，它包含大量的膳食纖維、礦物質(zhì)和維生素。除此之外，蘑菇中含有大量的多糖，這些多糖作為非消化發(fā)酵的碳水化合物對(duì)人體的健康具有非常好的作用，它能夠刺激機(jī)體腸道有益菌的生長(zhǎng)同時(shí)抑制病原菌在胃腸道增殖。
　　目的：
　　本實(shí)驗(yàn)就姬松茸菇多糖(ABM)的提取、特點(diǎn)及其對(duì)小腸結(jié)腸炎的影響進(jìn)行研究。
　　方法：
　　本實(shí)驗(yàn)利用熱水和乙醇萃取法，對(duì)ABM多糖進(jìn)行提取，提取

3、物中蛋白經(jīng)Sevag法去除，最終使用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)提取獲得的單糖進(jìn)行分析處理。通過使用葡聚糖硫酸鈉藥物(DSS)建立小腸結(jié)腸炎動(dòng)物模型，同時(shí)將動(dòng)物模型分為四組:正常對(duì)照組、DSS結(jié)腸炎組、DSS與姬松茸多糖共同作用組、姬松茸多糖作用組，進(jìn)一步評(píng)價(jià)姬松茸多糖對(duì)小腸結(jié)腸炎的影響。姬松茸多糖組為在DSS藥物處理誘導(dǎo)結(jié)腸炎發(fā)生后兩周再進(jìn)行給予，從而進(jìn)行治療。本研究DSS結(jié)腸炎組為通過使用4％葡聚糖硫酸鈉溶液作為小鼠飲水從而誘導(dǎo)小鼠

4、結(jié)腸炎的發(fā)生。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，通過組織學(xué)病理切片等技術(shù)手段對(duì)結(jié)腸損傷程度進(jìn)行觀察檢測(cè)，通過髓過氧化物酶(MPO)對(duì)酶活性進(jìn)行檢測(cè)，通過阿爾新藍(lán)和核固紅染色法對(duì)杯狀細(xì)胞的產(chǎn)生進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)，通過免疫組織化學(xué)和Western blot分析等手段，對(duì)結(jié)腸組織中的粘蛋白2(MUC2)、三葉因子3(TFF3)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、COX-2和NF-κB細(xì)胞因子的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　從ABM提取純化得到多糖產(chǎn)量的比例為2

5、％。通過HPLC對(duì)姬松茸的多糖提取物的分析表明，鼠李糖、巖藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸為其中主要單糖。與結(jié)腸炎對(duì)照組相比，使用多糖組的小鼠表現(xiàn)為抑制結(jié)腸炎的發(fā)生，促進(jìn)杯狀細(xì)胞的產(chǎn)生，增加MUC2，TFF3和HGF的表達(dá)，同時(shí)參與了腸道屏障功能。同時(shí)，姬松茸多糖組中表明，姬松茸多糖(ABM)具有降低炎癥相關(guān)蛋白COX-2，NFkB和MPO活性，DSS對(duì)照組確實(shí)無此現(xiàn)象。綜上可知，姬松茸多糖(ABM)