益氣活血法對(duì)糖尿病鼠心肌組織Hyp和TGF-β1的影響.pdf

1、本課題來源于國家自然基金課題項(xiàng)目“益氣活血方活性組分抑制糖尿病倉鼠心肌病心室重塑及細(xì)胞凋亡的機(jī)制”，（編號(hào):81173258），包括文獻(xiàn)研究和實(shí)驗(yàn)研究兩部分內(nèi)容。第一部分文獻(xiàn)研究結(jié)果顯示益氣活血法是糖尿病心肌病法基本治法，第二部分結(jié)合前期實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果，通過實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步證明益氣活血法對(duì)糖尿病心肌病的治療作用及療效機(jī)制。
　　第一部分文獻(xiàn)研究:
　　通過查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)，氣虛血瘀是糖尿病心肌病的主要病機(jī)，益氣活血法是糖尿

2、病心肌病的主要治法，益氣活血法防治糖尿病心肌病臨床療效顯著，且有大量循證依據(jù)支持。
　　第二部分實(shí)驗(yàn)研究:
　　目的:
　　制備糖尿病心肌病大鼠模型，將前期實(shí)驗(yàn)篩選出的益氣活血方基于有效組分的最佳配方與添加被刪除有效組分后的組分配方及原復(fù)方湯劑進(jìn)行療效比較，從分子水平證明益氣活血法治療糖尿病心肌病的科學(xué)性。
　　方法:
　　50只雄性SD大鼠，隨機(jī)選取44只采用高脂高糖飲食誘導(dǎo)胰島素抵抗，然后給予一次性腹腔

3、注射中等劑量(50mg/kg)鏈脲佐菌素建立糖尿病心肌病動(dòng)物模型，隨機(jī)分為6組，分別為A配方組（A組），B配方組（B組），A配方加人參總皂苷組（A+組），B配方加丹參酮ⅡA、乙酸龍腦酯組（B+組），益氣活血方組（Y組）及模型組，每組7-8只，另設(shè)正常組6只，監(jiān)測(cè)大鼠一般情況、體重和空腹血糖，灌胃4周后以1％戊巴比妥鈉2ml/kg腹腔注射麻醉大鼠取材，計(jì)算大鼠心臟重量指數(shù)，采用蘇木素-伊紅染色觀察各組大鼠心肌組織形態(tài)學(xué)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法

4、測(cè)定心肌羥脯氨酸（Hydroxyproline，Hyp）含量、半定量反轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)測(cè)定轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）mRNA的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.糖尿病心肌病動(dòng)物模型的制備。與正常組比較，模型組大鼠一般情況較差，血糖顯著升高、體重顯著下降(P＜0.01)，心臟重量指數(shù)明顯增大(P＜0.01)，HE染色觀察到明顯心肌病理損害，說明成功制備糖尿病心肌

5、病大鼠模型;與模型組比較，各中藥組大鼠體重和血糖情況均有好轉(zhuǎn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)，且心肌病理損害減輕;A組、B組、Y組大鼠體重和血糖無顯著性差異(P＞0.05);A組、B組較A+組、B+組體重和血糖情況明顯好轉(zhuǎn)(P＜0.01)。
　　2.益氣活血法對(duì)糖尿病鼠心肌組織Hyp含量的影響。與正常組比較，模型組及各中藥組大鼠心肌組織Hyp含量明顯增加(P＜0.01);與模型組比較，除B+組外，各中藥組大鼠心肌H

6、yp含量均較模型組顯著減少(P＜0.01);A組、B組、Y組大鼠心肌組織Hyp含量無顯著性差異(P＞0.05);A+組、B+組大鼠心肌組織Hyp含量較A組、B組明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　3.益氣活血法對(duì)糖尿病鼠心肌組織TGF-β1 mRNA表達(dá)水平的影響。與正常組比較，模型組及A+組、B+組大鼠心肌組織TGF-β1 mRNA的表達(dá)水平明顯升高(P＜0.01)，A組、B組、Y組大鼠心肌組織TGF-β1 mRN

7、A表達(dá)水平無顯著性差異(P＞0.05);與模型組比較，A組、B組、Y組大鼠心肌組織TGF-β1 mRNA表達(dá)水平顯著降低(P＜0.01)，A+組、B+組大鼠心肌組織TGF-β1 mRNA表達(dá)水平無顯著性差異(P＞0.05);A組、B組、Y組大鼠心肌組織TGF-β1 mRNA表達(dá)水平無顯著性差異(P＞0.05);A組、B組大鼠心肌組織TGF-β1 mRNA表達(dá)水平較A+組、B+組顯著降低(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.