來氟米特對(duì)糖尿病大鼠腎組織MCP-1、TGF-β的影響.pdf

1、目的：研究表明炎癥因子在糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制中起了重要的作用。本研究通過建立糖尿病大鼠動(dòng)物模型，給予來氟米特干預(yù)，觀察各組腎組織病理變化，應(yīng)用免疫組化以及半定量RT-PCR方法檢測(cè)各組MCP-1、TGF-β1表達(dá)情況，探討來氟米特對(duì)糖尿病大鼠腎組織中MCP-1、TGF-β1表達(dá)的影響，進(jìn)一步闡述來氟米特對(duì)早期糖尿病腎病的作用。
　　方法：SD雄性大鼠54只，隨機(jī)分為三組，即正常對(duì)照組（NC組），糖尿病組（DM組），來氟米特干預(yù)組（

2、LEF組），每組18只。DM組、LEF組給予一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)50mg/kg,NC組給予等量緩沖液。成模后LEF組給予來氟米特懸浮液5mg/kg.d灌胃。于第4、6、8周末處死大鼠，處死前留取24h尿量檢測(cè)24h尿蛋白定量，內(nèi)眥靜脈采血檢測(cè)血糖、肌酐、尿素氮，留取兩側(cè)腎臟，HE染色及PAS染色觀察腎組織病理改變，免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腎組織MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)，半定量RT-PCR法

3、檢測(cè)腎組織MCP-1、TGF-β1mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）成模后糖尿病大鼠出現(xiàn)多飲、多食、多尿、消瘦等糖尿病典型癥狀表現(xiàn)；（2）第4周糖尿病大鼠出現(xiàn)蛋白尿，DM組、LEF組24h尿蛋白定量均明顯高于同時(shí)期NC組（P＜0.01）；LEF組24h尿蛋白定量均明顯低于同時(shí)期DM組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；（3）第4、6、8周，DM組、LEF組尿素氮、肌酐水平均高于NC組（P＜0.05）；LEF組肌酐水平較同時(shí)期DM組

4、比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；第4周，LEF組尿素氮水平較DM組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），第6、8周，LEF組尿素氮水平低于DM組（P＜0.05）；（4）腎組織病理結(jié)果顯示：DM組大鼠腎小球系膜細(xì)胞明顯增生，腎小球體積增大，腎小管變性擴(kuò)張萎縮明顯，間質(zhì)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，并隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，病理改變加重，第8周病理?yè)p害積分（8.58±0.61）；LEF組腎小球系膜細(xì)胞輕度增生，腎小管變性擴(kuò)張較輕，間質(zhì)局灶性炎細(xì)胞浸潤(rùn)，第8

5、周病理?yè)p害積分（5.33±1.21），病理改變均較同時(shí)期DM組明顯減輕（P＜0.01）。（5）免疫組化結(jié)果：MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)主要在腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)，腎小球系膜細(xì)胞表達(dá)較少。第4、6、8周，DM組、LEF組MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)均明顯高于NC組（P＜0.01）；第4周，LEF組MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)與DM組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），第6、8周，LEF組MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)低于

6、DM組（P＜0.05）。（6）半定量RT-PCR結(jié)果顯示：第4、6、8周，DM組、LEF組腎組織MCP-1、TGF-β1mRNA表達(dá)均顯著高于NC組（P＜0.01）；LEF組腎組織MCP-1、TGF-β1mRNA表達(dá)均顯著低于DM組（P＜0.01）。（7）相關(guān)性結(jié)果顯示：MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)與24h尿蛋白定量、腎組織病理?yè)p害之間均呈正相關(guān)，并且MCP-1、TGF-β1蛋白表達(dá)之間亦呈顯著正相關(guān)。
　　結(jié)論：來氟米特可能