基于HPLC-MS冠心病代謝組學(xué)及其與腸道菌群宏基因組學(xué)關(guān)聯(lián)的研究.pdf

1、目的:冠心病診治及預(yù)防亟需發(fā)掘新的靶點及方向。本研究旨在通過代謝組學(xué)技術(shù)篩選冠心病特異性代謝標(biāo)志物，并聯(lián)合宏基因組學(xué)技術(shù)尋找腸道菌群參與冠心病患者代謝的證據(jù)、特異性菌群及關(guān)聯(lián)代謝標(biāo)志物。
　　方法:(1)通過采用高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對40名冠心病患者和43名健康對照者的血漿樣本進(jìn)行非靶向代謝組學(xué)研究，結(jié)合單變量統(tǒng)計和多變量統(tǒng)計方法篩選出可以明確區(qū)分冠心痛患者與健康對照人群的代謝物、運用聚類分析方法區(qū)分不同表型下代謝物的變化情況

2、，進(jìn)一步追溯這些代謝物的來源及所涉及的功能通路，找出冠心病患者特征性的代謝標(biāo)志物，從而建立研究冠心病患者代謝特征及代謝標(biāo)志物的分析方法。(2)通過采用上述方法，對另外59名冠心病患者和43名健康對照者的血漿和尿液進(jìn)行代謝分析，篩選出具有良好診斷能力的共同代謝標(biāo)志物，結(jié)合宏基因組學(xué)技術(shù)與腸道菌群的物種、功能水平進(jìn)行關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)與冠心病相關(guān)的特異性菌群。
　　結(jié)果:(1)本實驗通過高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對樣本進(jìn)行非靶向代謝組學(xué)研究，結(jié)

3、合多種統(tǒng)計方法篩選具有良好診斷能力的代謝物，運用聚類分析等方法區(qū)分不同表型下代謝物變化情況，進(jìn)一步通過代謝物數(shù)據(jù)庫追溯代謝物來源和涉及的通路，最終聯(lián)合宏基因組學(xué)技術(shù)與腸道菌群進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，從而建立了冠心病代謝物研究及與菌群關(guān)聯(lián)分析的方法。(2)通過上述方法對40名冠心病患者和43名健康對照者的血漿樣本進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)7種代謝物（1-萘酚、2-萘酚、甲基衣康酸、N-乙酰-D-葡萄糖胺-6-磷酸、L-肉毒堿、二甲酯馬來酸、苯丙酮酸）可以顯著區(qū)

4、分冠心病患者和健康對照者，并發(fā)現(xiàn)N-乙酰-D-葡萄糖胺-6-磷酸和L-肉毒堿可能與腸道菌群參與的代謝相關(guān)。(3)對59名冠心病患者和43名健康對照者的血漿和尿液進(jìn)行代謝分析，篩選出具有良好診斷能力的共同代謝標(biāo)志物N-乙酰-D-葡萄糖胺-6-磷酸和甘露醇，并發(fā)現(xiàn)腸道菌群Clostridium sp.HGF2與N-乙酰-D-葡萄糖胺-6-磷酸、甘露醇顯著正相關(guān)，而Streptococcus sp.M334和Streptococcus sp.