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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究住院患者、腸道門診腹瀉患者、健康體檢者三個(gè)不同人群腸道中肺炎克雷伯菌的攜帶狀況、毒力基因、耐藥性及其分子流行病學(xué)特點(diǎn)。
方法:采集三個(gè)目標(biāo)人群新鮮糞便標(biāo)本接種于培養(yǎng)基上,應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flightMass Spectrometr,MALDI-TOF MS)Vitek MS質(zhì)譜儀鑒定篩選出肺炎
2、克雷伯菌,拉絲試驗(yàn)檢測(cè)高粘液表型,K-B紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn);合成特異性引物對(duì)肺炎克雷伯菌株進(jìn)行莢膜血清型(K1,K2,K5,K20,K54,K57)和相關(guān)毒力基因(wcaG,rmpA,magA和菌素)檢測(cè);PCR擴(kuò)增廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因、超廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因、質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶基因和碳青霉烯類耐藥基因;擴(kuò)增7對(duì)管家基因(rpoB,gapA,infB,gpi,PhoE,rpoB,tonB)對(duì)菌株進(jìn)行多位點(diǎn)序列分型。
3、 結(jié)果:141株肺炎克雷伯菌分離自住院患者(54/125,攜帶率43.2%)、腹瀉的門診患者(44/257,攜帶率17.1%)和健康體檢者(43/141,攜帶率30.5%)。共檢測(cè)到49株產(chǎn)毒株,其中35株為高粘液表型菌株。K1型菌株檢出14株(14/141,9.9%),K2型菌株檢出15株(15/141,10.6%),K20和K57較少檢出,而K54型菌株未檢出;菌素基因檢出率最高(30.5%),rmpA次之(19.9%),wcaG和
4、magA檢出率相對(duì)較低(分別為12.1%和9.9%)。健康體檢者攜帶的肺炎克雷伯菌毒力檢出率最高,其中K1/K2莢膜血清型、wcaG、rmpA、magA和菌素檢出率顯著高于住院患者來(lái)源的菌株,而對(duì)抗生素較敏感。住院患者攜帶的菌株抗生素耐藥率最高,頭孢菌素類抗生素耐藥率大于30%,碳青霉烯類抗生素耐藥率22.2%。肺炎克雷伯菌非產(chǎn)毒株抗生素耐藥率顯著高于產(chǎn)毒株,此外還檢測(cè)到3株同時(shí)攜帶毒力基因和耐藥基因的菌株(magA+K1+blaSHV
5、-2,菌素+blaTEM-1+blaKPC-2,菌素+wcaG+blaCTX-M-14+ blaSHV-1)。產(chǎn)毒株和非產(chǎn)毒株的序列基因型(ST)分布呈現(xiàn)不同的特點(diǎn),非產(chǎn)毒株較為分散,而產(chǎn)毒株相對(duì)較為集中,ST23、ST86為其主要的ST型。ST23菌株均為K1莢膜血清型,ST65和ST86菌株均為K2型。
結(jié)論:肺炎克雷伯菌在住院患者中攜帶率最高,毒力較低而抗生素耐藥率最高;而健康人群攜帶較高比例的產(chǎn)毒株;產(chǎn)毒株比非產(chǎn)毒株對(duì)
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