青-老年大鼠腎臟交互移植模型的構建及機體內環(huán)境衰老關鍵因子的研究.pdf

1、目的:
　　通過建立青年-老年大鼠腎臟交互移植模型，觀察內環(huán)境對腎臟衰老的影響。應用非標記定量蛋白質組學方法篩選與衰老顯著相關蛋白，驗證并探討其對衰老影響的可能作用機制。
　　方法:
　　①通過腎臟原位切除和供腎原位移植術方法，把年輕大鼠的腎臟移植到年老大鼠，同時把年老大鼠的腎臟移植到年輕大鼠，術后體內生長6個月后，建立青年-老年大鼠腎臟交互移植模型;②觀察交互移植后腎臟病理（HE、PAS染色）、組織衰老（β-gal染

2、色）、炎癥因子（TNF-α和IL-1β）的變化情況;③用差異蛋白質組分析篩選參與腎臟衰老的蛋白，并在Wi38細胞進行驗證其參與細胞衰老的作用通路。
　　結果:
　　①成功建立青年-老年大鼠腎臟交互移植模型，移植后腎臟血運正常，腎臟移植后存活;②與青年大鼠腎臟比較，移植到老年大鼠的青年腎臟HE染色、PAS染色腎臟病理無明顯改變，β-gal染色增加，炎癥因子TNF-α和IL-1β表達增加;與老年大鼠腎臟比較，移植到青年大鼠的老年

3、腎臟HE染色、PAS染色腎臟病理無明顯改變，β-gal染色降低，炎癥因子TNF-α和IL-1β表達降低;③蛋白質組學技術比較腎臟移植各組的差異表達蛋白，共鑒定到了279個差異倍數2以上的差異蛋白。最終篩選出16個有與ATP能量代謝、凋亡、細胞死亡有關的蛋白質，蛋白-蛋白相互作用分析提示Sod1與多個蛋白有相互作用。與20代Wi38細胞比較，40代Wi38細胞Sod1表達降低、p16表達升高。Sod1過表達時，Ac-NF-κB表達降低，細